G蛋白β3亚单位C825T基因多态性与富马酸比索洛尔降压疗效的相关性

卫 玉，张 兰，汪 驰,朱 航

富马酸比索洛尔是一种长效、高选择性β1肾上腺素受体阻滞药，可以有效降低舒张压[1,2]。G蛋白β3亚单位(GNβ3)基因第10位外显子存在一个多态位点C825T，该多态位点存在CC、CT、TT三种基因型，其多态性将影响相应蛋白质的功能，从而导致应用β肾上腺素受体阻滞药治疗高血压的疗效产生个体差异。本研究旨在探讨GNβ3-C825T基因型与富马酸比索洛尔降压效果的相关性；建立富马酸比索洛尔的适用人群基因库，为β1肾上腺素受体阻滞药在临床中的应用提供参考。

1 对象与方法

1.1 对象 选择2018-10至2020-10在解放军总医院第一医学中心心内科住院或门诊就诊的轻、中度原发性高血压患者，进行GNβ3-C825T基因型测定，分为CC组、CT组、TT组，每组150例。CC组年龄(51.6±5.7)岁，男88例，女62例；CT组年龄(53.3±3.8)岁，男74例，女76例；TT组年龄(49.0±7.2)岁，男83例，女67例。3组间一般资料比较差异无统计学意义。高血压诊断标准：应用2018年ESC/ESH国际高血压指南[3]，纳入1级高血压(SBP140～159 mmHg或DBP 90～99 mmHg)及2级高血压(SBP160～179 mmHg 或 DBP 100～109 mmHg)患者为研究对象。

1.2 纳入与排除标准 纳入标准：(1)年龄18～75岁；(2)2周内服用过降压药者，停用该类药物5个半衰期后，坐位血压(3次测量平均值)符合上述高血压诊断标准；(3)2周内未服用过降压药者，在间隔至少1 d时间内连续做两次检查，两次坐位血压平均值符合高血压诊断标准；(4)患者自愿参加并签署知情同意书。排除标准：(1)正在服用其他降压药物且根据研究者判断其不能停止服用该类药物5个半衰期；(2)已知或怀疑为继发性高血压；(3)重度高血压；(4)合并严重的内科疾病，包括：恶性肿瘤、严重的肝功能异常、肾功能不全、营养不良、造血功能障碍、器官移植术后、急性心肌梗死、急性脑卒中、1型糖尿病或未控制的2型糖尿病、各种类型的肝炎活动期，以及其他严重的器质性疾病等；(5)对高选择性β1肾上腺素受体阻滞药不能耐受者，如各种缓慢性心律失常；(6)存在明显的实验室检查或体征异常者，而且根据研究者的判断，这种异常显示患者存在严重疾病，或根据研究者的判断，可能对药物疗效或不良事件的观察有影响。

1.3 治疗方法 所有患者每日晨起均规律服用富马酸比索洛尔5 mg(默克雪兰诺有限公司生产，商品名康忻)。

1.4 观察指标 (1)GNβ3-C825T基因多态性：所有符合纳入标准的患者，晨起空腹抽取静脉血，采用北京斐然智达科技有限公司研发的GNβ3-C825T基因多态性检测试剂盒对静脉血标本进行检测；(2)富马酸比索洛尔血药浓度：治疗7 d,1、3、6个月后，分别于晨起空腹服药30 min后抽取静脉血，由解放军总医院药理研究室采用高效液相色谱法对受试者的静脉血标本进行测定；(3)24 h动态血压监测采用Oscar2型24 h动态血压监测仪进行监测，测量数据包括：静息状态下收缩压及舒张压(SBP、DBP)，24 h平均收缩压(24 h SBP)、24 h平均舒张压(24 h DBP)、日间平均收缩压(d SBP)、日间平均舒张压(d DBP)、夜间平均收缩压(n SBP)、夜间平均舒张压(n DBP)；(4)24 h动态心电图监测采用NT9200型24 h动态心电图监测仪进行监测，测量数据包括：24 h平均心率、窦性心律震荡水平；(5)在3组受试者治疗前、治疗7 d后，以及治疗1、3、6个月后进行随访，再次行24 h动态血压及动态心电图检查，测量24 h平均收缩压、24 h平均舒张压、日间平均收缩压、日间平均舒张压、夜间平均收缩压、夜间平均舒张压、24 h平均心率、窦性心律震荡水平，其中窦性心律震荡水平中包括震荡初始(TO)、震荡斜率(TS)。

2 结 果

2.1 不同基因组患者间血药浓度水平比较 治疗后不同时间点TT组患者富马酸比索洛尔血药浓度均高于CT组及CC组，差异均有统计学意义(P<0.05)。各组内治疗7 d后，及随访1、3、6个月后血药浓度变化无统计学差异(表1)。

表1 3组原发性高血压患者治疗后富马酸比索洛尔血药浓度变化

2.2 不同基因组患者血压水平比较 治疗前3组患者各个血压指标比较均无统计学差异；治疗7 d后，3组患者血压水平均有下降趋势，其中TT组>CT组>CC组,差异具有统计学意义(P<0.05)。各组内治疗7 d后血压水平与治疗前血压水平比较，差异具有统计学意义(P<0.05)；治疗1个月后，3组患者血压水平较治疗前下降，其中TT组>CT组>CC组，组间比较有统计学差异(P<0.05)，其中TT组降低舒张压优于CT组及CC组；随访3、6个月后，3组患者血压较治疗前下降，TT组>CT组>CC组，其中TT组及CT组DBP、nDBP下降水平高于CC组，差异具有统计学意义(表2)。

表2 不同基因组原发性高血压患者治疗前及治疗期间血压的比较

2.3 不同基因组患者治疗前后24 h平均心率、窦性心律震荡比较 3组患者治疗前24 h平均心率、震荡初始、震荡斜率间无明显统计学差异；治疗7 d后，24 h平均心率较前均有下降，其中TT组>CT组>CC组，其中TT组心率下降程度较其他两组明显，组间比较有统计学差异(P<0.05)。随访3、6个月后，CT组患者心率下降程度>CC组，差异具有统计学意义(P<0.05)；治疗7 d，1、3、6个月后，3组患者震荡初始水平较前下降，其中TT组患者下降水平>CT组及CC组，差异具有统计学意义(P<0.05)；治疗7 d，1、3、6个月后，3组患者TS水平较前升高，其中TT组患者TS水平高于CT组及CC组，差异具有统计学意义(P<0.05，表3)。

表3 不同基因组原发性高血压患者治疗前及治疗期间24 h平均心率、窦性心律震荡比较的比较

3 讨 论

富马酸比索洛尔作为临床常用降压药物，其药物效果呈现个体差异性，其通过阻断心脏β肾上腺素受体，降低心肌收缩力，使每博输出量减小，进而降低血压；对于心率快的患者，通过负性肌力作用，使心脏舒张期延长，使经主动脉流向外周的血流相对增多，故舒张末期主动脉内残存血流减少，进而导致舒张压下降[3]；同时，还可通过阻滞肾小球旁器细胞的β1肾上腺素受体抑制肾素的释放起到降压作用[4]。研究发现能够引起药物对不同患者药效学的个体基因差异的遗传因素主要是通过改变机体内受体、转运体或代谢酶表达等方式[5]。G蛋白是自主神经系统、肾素-血管紧张素系统、内皮素系统等血压调控系统特异受体的耦联蛋白，可影响细胞的钠-氢交换及血浆肾素活性和血清Na+，K+浓度[6]，偶联蛋白的变异可通过影响细胞间传导功能[7]，进而参与血压调控。

Siffert等[8，9]发现，GNβ3基因第10位外显子存在一个多态位点C825T，该多态位点存在CC、CT、TT三种基因型,可能导致个体化差异，其差异可能与T等位基因使G蛋白过度活化有关。Nejatizadeh等[10]发现，GNβ3-C825T多态性与细胞内信号转导增加具有相关性，其中TT基因型患者发生高血压的风险显著增高(P<0.0001；95%CI2.9～12.7)。本研究显示，提示高血压与GNβ3基因多态性相关，TT基因型患者更易通过影响富马酸比索洛尔浓度而降低血压，因此，T基因活化可能通过影响信号传导通路而影响富马酸比索洛尔的降压效果。

Célia Sousa等[11]发现，在西班牙人群中，GNβ3-C825T的基因变异与高血压病显著相关(OR1.275；95%CI1.042～1.559)。张相杰等[12]发现，不同基因型可影响心力衰竭患者富马酸比索洛尔血药浓度，提示基因型可影响富马酸比索洛尔在体内代谢程度，与本研究结果一致。Chen等[13]发现，不同Gnβ3-C825T基因型的高血压患者，其代谢指标明显不同，提示Gnβ3-C825T基因型变化可能影响血压水平。本研究发现，G蛋白T基因活化后，可通过影响富马酸比索洛尔药物浓度，达到不同降压水平。对于不同基因型患者，其富马酸比索洛尔血药浓度有明显差异，随访研究发现，当患者服用富马酸比索洛尔7 d后，其血药浓度基本可达到稳态， 1、3、6个月后复测富马酸比索洛尔血药浓度时，较服药7 d后血药浓度无明显差异。其中TT基因组患者血药浓度明显高于其他两组，且治疗7 d，1、3、6个月后随访发现，TT基因组患者降压及减慢心律效果均优于其他两组，提示富马酸比索洛尔β1肾上腺素受体阻滞作用在TT组优于CT组及CC组，可能与T组基因过度活化相关。此外，CT组血药浓度高于CC组，但两组患者心率下降水平比较无明显统计学差异，考虑单组T基因活化水平较双组T基因突变水平降低。随访研究发现，服用富马酸比索洛尔3、6个月后，CT组较CC组DBP、dDBP有明显下降，考虑单组T基因突变可影响部分G蛋白表达，需长期服药并达到理想血药浓度后，才可体现出降压优势。

窦性心率震荡(HRT) 是指当室性早搏发生后，正常的窦性心律出现短暂加速和减速的过程，包括震荡初始(TO)和震荡斜率(TS)，反映室性早搏后出现自主神经的快速调节反应[14]。目前学术界认为其机制可能与室早的直接作用、压力反射机制及心脏自主神经的功能调节有关[15]。HRT现象能够反映自主神经，尤其是迷走神经的功能状态[16]。Addio 等[17]发现，TS与自主神经功能失调的严重程度有明显相关性(P<0.01)。本研究显示，服用相同剂量富马酸比索洛尔，TT组患者震荡初始水平及震荡斜率均优于CT组及CC组，提示TT组患者应用富马酸比索洛尔优于其他基因型患者。目前研究显示，应用β受体阻滞药对室性心律失常有保护作用[18]，提示β受体阻滞药可能通过改善窦性心律震荡而降低恶性心律失常的发生率，本研究显示，应用富马酸比索洛尔后，所有患者TO及TS水平均较应用前有所改善，与既往研究结果类似。其中TT组患者TO及TS的改善较其他两组有明显差异性(P<0.01)，可能与T基因过度活化影响富马酸比索洛尔血药浓度相关。

综上所述，随着科技发展及基因型探索的逐渐深入，同一药物作用于不同基因型患者群体时，其药效明显不同，本研究发现，富马酸比索洛尔与GNβ3C825T基因多态性有明显相关性，其中TT型基因患者效果优于其他基因型，因此，在临床应用中，对于轻中度高血压患者，TT基因型患者应用富马酸比索洛尔效果可能优于其他患者，以上结论尚需大规模临床研究进一步支持。