升阳益胃颗粒的制备工艺研究

王宏,马全龙,姜亮,李鹏,王坤

(1.山东慈德医药有限公司,山东 济南 250100；2.济南龙华医药技术有限公司,山东 济南 250032；3.山东仙河药业有限公司,山东 东营 257231；4.山东省食品药品检验研究院，山东 济南 250101)

升阳益胃颗粒是在升阳益胃汤基础上制成的颗粒剂，升阳益胃汤是金元时期著名医家李东垣《脾胃论》中的经典名方，已入选国家中医药管理局古代经典名方目录，由黄芪、半夏、人参、甘草、防风、白芍药、羌活、独活、橘皮、茯苓、泽泻、柴胡、白术、黄连、生姜和大枣组成[1]。主治脾胃之虚，怠惰嗜卧，四肢不收，时值秋燥令行，湿热少退，体重节痛，口苦舌干，食无味，大便不调，小便频数，不嗜食，食不消；兼见肺病，沥淅恶寒，惨惨不乐，面色恶而不和[2]。本试验对升阳益胃颗粒的提取和成型工艺进行了优化筛选。

1 仪器与试药

1.1 仪器 AL204电子分析天平[梅特勒-托利多国际贸易(上海)有限公司]；CAV313C电子分析天平(上海皆准仪器设备有限公司)；LC-15C高效液相色谱仪(岛津)；UC-120D超声波清洗器(宁波市双嘉仪器有限公司)；DHG型鼓风干燥箱(郑州宏华仪器有限公司)。

1.2 试药 黄芪、半夏、人参、甘草、防风、白芍、羌活、独活、橘皮、茯苓、泽泻、柴胡、白术、黄连、生姜和大枣等药材饮片均购自山东博康中药饮片有限公司；糊精(曲阜市天利药用辅料有限公司，批号：F20209990413)；蔗糖(湖南新绿方药业有限公司，批号：F20170000474)；可溶性淀粉(山东聊城阿华制药股份有限公司，批号：F20190000179)；芍药苷对照品(20 mg,批号：110736-201943，纯度为95.1%，含量测定用)、甘草苷对照品(20 mg,批号：113280-201928，纯度为97.4%，含量测定用)购自中国食品药品检定研究院；乙醇(山东龙玉泉药用辅料有限公司，批号：F20170000523)；乙腈(东莞市斯巴达化学有限公司)；磷酸(天津赛孚瑞科技有限公司)为色谱纯，水为重蒸水，其余试剂为分析纯。

2 方法与结果

2.1 含量测定

2.1.2 色谱条件 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；SB-C18色谱柱(150 mm×4.6 mm，5 μm，安捷伦)；以乙腈-0.1%磷酸(15∶85)为流动相，检测波长230 nm[3]。

2.1.3 混合对照品溶液制备 精密称取芍药苷对照品12.89 mg置于50 mL量瓶中，甘草苷对照品12.58 mg置于100 mL量瓶中，分别加70%甲醇稀释至刻度，摇匀，制得质量浓度分别为245.17 μg·mL-1和122.53 μg·mL-1的单一对照品储备液。分别精密量取芍药苷与甘草苷对照品储备液各2.0 mL置于同一10 mL量瓶中，加70%甲醇至刻度，摇匀，得混合对照品溶液(芍药苷49.03 μg·mL-1，甘草苷24.51 μg·mL-1)。

2.1.4 试验样品溶液制备 取各试验项下提取液，滤过后合并，精密吸取5 mL，水浴蒸至近干，用70%甲醇转移至5 mL量瓶中，用70%甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.1.5 颗粒样品溶液制备 取颗粒剂适量，混匀，研细，取约6 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%甲醇100 mL，密塞，称定重量，超声处理(功率100 W，频率40 kHz)30 min，放冷，再称定重量，用70%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得[4]。

2.1.6 阴性对照溶液的制备 按处方组成比例，称取除甘草、白芍外的其余药味，制成不含甘草、白芍的阴性样品，同法制成阴性对照品溶液。

2.1.7 方法学考察 按《中国药典》2015年版(通则9101)药品质量标准分析方法验证指导原则进行，结果甘草苷在12.18～73.06 μg·mL-1范围内，回归方程为Y=283 863X-16 496(R2=0.999 5)，精密度RSD=0.63%、重复性RSD=0.83%、加样回收率范围96.59%～101.25%、RSD=1.38%，在12 h内稳定性RSD=1.55%；芍药苷在24.52～147.10 μg·mL-1范围内，回归方程为Y=836 229X-19 615(R2=0.999 7)，精密度RSD=1.12%、重复性RSD=0.87%、加样回收率范围98.96%～101.89%、RSD=1.52%，在12 h内稳定性RSD=1.29%。

2.2 提取工艺 分别称取黄芪165 g、半夏82.5 g、人参82.5 g、甘草82.5 g、防风41.2 g、白芍41.2 g、羌活41.2 g、独活41.2 g、橘皮33 g、茯苓24.8 g、泽泻24.8 g、柴胡24.8 g、白术24.8 g、黄连16.5 g、生姜50 g，大枣12 g，共9份，每份共计788 g，参考文献[5]，以甘草苷和芍药苷含量为指标按表1进行试验，结果见表2～3。

表1 因素水平表

表2 正交试验设计与结果

表3 甘草苷含量方差分析

从表2～4分析，以甘草苷与芍药苷为共同指标时，A3明显优于A2、A1，B3明显优于B2、B1，C因素各组间无明显区别，可任意选择；从可操作和生产成本等方面综合考虑，最终确定提取工艺A3B3C1(加8倍量水提取3次，每次30 min)。

表4 芍药苷含量方差分析

2.3 提取验证试验 按“2.2”项下分别称取升阳益胃颗粒处方中黄芪等饮片3份，每份788 g，按优选的工艺(加8倍量水提取3次，每次30 min)提取验证3次，测定出膏率、甘草苷和芍药苷含量(见表5)。

表5 提取工艺验证试验结果表

结果表明，按优选的升阳益胃颗粒提取工艺提取验证3次，出膏率及含量稳定。

2.4 成型工艺研究

2.4.1 润湿剂的选择 分别按升阳益胃颗粒处方称取黄芪等饮片共4份，每份788 g，分别按优选的提取工艺提取，合并滤液，制成干膏，结合本品日服量，经预试验，加入适量辅料，混匀，以不同润湿剂制软材，以尼龙筛网制粒，干燥，整粒(见表6)。

表6 润湿剂选择结果

由上表可知，干膏粉与赋形剂混匀后以20%乙醇制软材，颗粒合适，可操作性强。

2.4.2 赋形剂的选择 分别按升阳益胃颗粒处方称取黄芪等饮片4份，每份788 g，分别按优选的提取工艺提取，制成干膏，粉碎，混匀，平均分成4份，与不同比例辅料混匀，制成制粒，以颗粒的成型率、制粒可操作性为评价指标，结果见表7。

表7 赋形剂选择结果

结果：糖粉∶可溶性淀粉∶糊精=2∶3∶5为赋形剂时，颗粒的成型性好，可操作性强。

2.5 中试工艺验证 按升阳益胃颗粒处方160倍投料，分别称取黄芪13.2 kg、半夏6.6 kg、人参6.6 kg、甘草6.6 kg、防风3.3 kg、白芍药3.3 kg、羌活3.3 kg、独活3.3 kg、橘皮2.64 kg、茯苓1.98 kg、泽泻1.98 kg、柴胡1.98 kg、白术1.98 kg、黄连1.32 kg、生姜4.0 kg、大枣0.96 kg，中试生产3批，对生产工艺进行验证，结果见表8。

表8 升阳益胃颗粒中试表

结果经3批中试验证，升阳益胃颗粒的出干膏率、成品率和含量等指标稳定可行。

3 讨论

3.1 升阳益胃汤是补气升阳名方，以黄芪为君，健脾益气，升举清阳；党参、甘草健脾益胃，助黄芪补气健脾之功；白术苦温燥湿，茯苓淡渗利湿，白术与茯苓既能补脾益气，又能化湿除浊，而助脾土健运；陈皮、半夏行气和胃，调畅脾胃气机升降；泽泻甘寒利水渗湿，助白术茯苓健脾化湿；柴胡、羌活、独活、防风四味皆为风药，具有燥湿之功；风药升散，又助黄芪升举清阳；白芍养阴补血；黄连苦寒燥湿，以清除滞留余热，配白芍可制风药辛燥的作用[6]。全方令浊阴降、清阳升，脾气健旺，气机调畅，虚实并治，攻补兼施，补中有散，发中有收，气足阳升，湿热自除[7]。

3.2 为保持升阳益胃颗粒的经典名方特色，保证临床疗效，也符合国家关于古代经典名方除成型工艺外的其他制备方法应当与古代医籍记载基本一致的相关规定[8]，结合日服用饮片量及出膏率等因素，宜制成颗粒剂。升阳益胃汤原方煎法为加水三盏，同煎至一盏，去渣，温服[2]，经文献考证[9-11]，金元时期一中盏者，约五合，1升=700 mL；1斤约合如今的660 g，生姜1片约等于5 g，枣1枚约等于3 g，每服三钱，相当于饮片剂量约12.4 g，每次服用干膏约3 g，加入糖粉、可溶性淀粉和糊精制成颗粒剂，单剂量包装为10 g，每次服用1袋，便于患者携带和服用。

3.3 对升阳益胃颗粒提取工艺验证3次，结果出膏率及含量稳定；以颗粒的成品率和制粒可操作性为评价指标，优选后颗粒的润湿剂为低浓度乙醇，赋形剂为糖粉、可溶性淀粉和糊精，制成的颗粒硬度合适，溶化性好；按升阳益胃颗粒处方量的160倍投料，进行了3批中试生产，结果升阳益胃颗粒剂的成品率，甘草苷和芍药苷含量稳定，优选的升阳益胃颗粒剂工艺适用于生产。