胶体金法和酶联免疫法应用于艾滋病抗体检测的结果分析

彭佰贤，魏移娟

（梅州兴宁妇幼保健院，广东 梅州 514500）

艾滋病是一种由艾滋病病毒（HIV 病毒）感染引起的获得性免疫缺陷疾病，艾滋病病毒会攻击人体免疫系统，主要攻击目标是CD4T 淋巴细胞，使得人体丧失免疫功能[1]。患上艾滋病以后，人体容易感染各种类型疾病，并且不容易治愈，反复发病，严重的可发生恶性肿瘤，具有极高的死亡率，是对人类威胁最大的疾病之一，至今没有特效药，无法治愈[2]。艾滋病具有非常长的潜伏期，感染者无自觉症状，期间可以对其它健康人群进行感染，社会危害很大，潜伏期可达8-9年之久[3]。对疑似艾滋病患者进行艾滋病筛查是非常有临床意义的，可以及时发现艾滋病病毒，并且尽早接受相关治疗，减少病毒进一步传播，延长患者生存年限[4]。临床上常用与艾滋病检测的方法包括胶体金法和胶体金法，都有不错的检测效果，检测准确率都比较高[5]。为此，本研究对胶体金法和酶联免疫法应用于艾滋病抗体检测中的效果进行了总结和对比，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择本院2012年2月至2019年8月期间收治的25 例HIV 初筛阳性患者作为研究对象，分别对其进行胶体金法和酶联免疫法艾滋病抗体检测，比较检测结果。患者均为女性，年龄范围22-47 周岁，平均年龄（36.45±3.45）岁。

1.2 方法

全部患者都接受了胶体金法和酶联免疫法检测艾滋病抗体。具体操作如下：

1.2.1 血液样本采集

患者同时采集两份3ml 的血液样本存放在无抗凝剂的真空试管中，并且存放在2-8℃的冰箱内，在一周内完成艾滋病检测。如果一周内无法完成检测，则需将血液样本保存在-20℃的冰柜中。

1.2.2 血清分离

采集到的200 份血液样本需要进行离心操作，在医用离心机上进行离心，转速设定为3000r/min，离心时间不能少于15min，将血清分离后分别进行胶体金法和酶联免疫法检测。

1.2.3 检测仪器

检测仪器：多功能酶标仪、洗板器、洗板机、恒温培养箱。

1.2.4 胶体金法艾滋病检测

检测试剂：万孚HIV-TP 联合检测试剂(胶体金法)（生产厂家：广州万孚生物技术股份有限公司，国药准字：H20163401），规格型号：1 人份。检测方法：在检测前取出万孚HIV-TP 联合检测试剂(胶体金法)，将试剂和血清样本放置在常温下30min，待其恢复到室温以后，20-30℃，开始检测。使用检测习惯取出1 滴血清样本滴入检测试剂中，马上滴入2 滴血清样本稀释液，在15min-20min 时间段内观察检测结果，如果质控线出现一条红线，检测线位置没有出现红线，则为阴性。如果质控线和检测线处都出现一条红线，则为阳性。如果没有出现红线则说明操作失误，本次检测结果无效。

1.2.5 酶联免疫法艾滋病检测

检测试剂：人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒（酶联免疫法）（生产厂家：珠海丽珠试剂股份有限公司，国药准字：H20020011），包装规格：96 人份/盒。检测方法：检测前准备好试剂盒、检测仪器，调节好仪器参数，取出检测试剂，恢复到室温后使用，打开包装后1h 内完成检测。严格按照人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒（酶联免疫法）使用说明书进行艾滋病抗体检测，检测结果A 值≥Cut-off 则检测结果为阳性，反之为阴性。

1.3 评价指标

对比胶体金法和酶联免疫法检测艾滋病抗体的结果。即对比两种检测方法的阳性率。

1.4 统计学处理

使用SPSS22.0 软件处理数据，计量资料和计数资料分别用均数±标准差和数或率的形式代表，用t 和卡方检验，P＜0.05，有统计学意义。

2 结果

对25 例疑似HIV 初筛阳性患者的血清进行艾滋病抗体检测，确诊阳性18 例，阴性7 例，使用胶体金法检测出艾滋病抗体阳性18 例，阳性率为100.00%，使用酶联免疫法检测出艾滋病抗体阳性17 例，阳性率为94.44%。检测结果差异不显著，数据不具有统计学意义，P＞0.05，如表1 所示。

表1 胶体金法和酶联免疫法检测艾滋病阳性率[n(%)]（n=18）

3 讨论

艾滋病是一种对人类健康和生命威胁极大的疾病，是全球性疾病，世界性医学难题，一旦发病无药可以治愈，只能通过药物维持病情，尽量延长存活时间[6]。艾滋病患者容易感染各种细菌、病毒等，极易患上其它疾病，主要原因是因为艾滋病病毒破坏了免疫系统淋巴细胞的免疫功能。艾滋病是具有高度传染性，主要传播渠道包括性交感染、母婴感染、血液感染，艾滋病病毒不容易被发现，在人体内的潜伏期非常长，可达8-9年[7]。艾滋病的防治没有特别有效的措施，只能通过人们自觉，养成健康的生活习惯，洁身自好，不卖淫、不嫖娼、避免高危性行为[8]。同时，人们需要严禁吸毒，不与他人共用注射器，不能在非正规医疗机构进行献血、输血和使用血制品，个人洗漱用品（牙刷、剃须刀、刮脸刀）不要借用和共用。

胶体金是一种由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下，聚合成的金颗粒，在静电作用下处于稳定的胶体状态，是一种带负电的疏水胶溶液，因此称为胶体金。胶体金是一种非常好的免疫标记物，在艾滋病抗体检测中可以对艾滋病抗体进行准确标记，通过分析胶体金可以准确发现其中的艾滋病抗体，起到诊断艾滋病和筛查的作用[9]。胶体金法在艾滋病抗体检测中的应用具有非常强的敏感性，特异性高，并且检测结果准确，检测操作简单，在检测的过程中只依靠胶体金法检测试剂盒和检测设备即可快速获得检测结果，结果容易观察和判读，十分方便，在临床上的应用非常广。

酶联免疫法是应用在艾滋病抗体检测中的常规固相免疫测定法，其检测原理是将艾滋病抗体包被到固相载体表现上，并可以保持免疫活性，以此完成检测。测定艾滋病抗体时，检测人员需要将待检血清样本和酶标抗原按不同的步骤加入到固相载体表面，发生相关反应，通过洗涤方法将抗原抗体复合物和游离的未结合成分分离开，在加入酶反应底物，根据酶催化后的颜色和吸光度去进行定性和定量分析，测定艾滋病抗体。

祝喆[10]的研究中选择120 例疑似艾滋病患者，全部患者都接受了胶体金法和酶联免疫法检测艾滋病抗体，胶体金法检测出阳性111 例，阳性率达到92.5%，酶联免疫法检测出阳性115 例，阳性率为95.8%，两种检测方法的阳性检出率都比较高，并且检出准确性相差不大，差异无统计学意义，P＞0.05，结论与本次研究结果一致。本次研究结果显示，所选的25 例疑似艾滋病患者最终确诊阳性18 例，阴性7 例同时接受了胶体金法和酶联免疫法检测，其中使用胶体金法检测出艾滋病抗体阳性18 例，阳性率为100.00%，使用酶联免疫法检测出艾滋病抗体阳性17 例，阳性率为94.44%。检测结果差异不显著，数据不具有统计学意义，P＞0.05。

由此可见，胶体金法和酶联免疫法在艾滋病抗体检测中的应用效果基本一致，都可以比较准确的检出艾滋病抗体，都是比较可靠的艾滋病检测方法。

综上所述，胶体金法和酶联免疫法应用于艾滋病抗体检测中的结果都比较准确，具有较高的特异性、稳定性以及敏感性，检测结果准确，操作简单，使用的试剂和设备简单，检测条件要求不高，在临床上具有非常好的应用效果，是检测艾滋病抗体的有效方法。