离子色谱法测定特殊医学用途配方食品中肌醇

毛 琏，张 斌，王清波，郭美娟，王利平，张兰天,*，史国华,*

（1.河北省食品检验研究院，河北省食品安全重点实验室，河北 石家庄 050200；2.瑞士万通中国有限公司，北京 100080）

特殊医学用途配方食品是我国的一类特殊食品，是指为满足进食受限、消化吸收障碍、代谢紊乱或特定疾病状态人群对营养素或膳食的特殊需要，专门加工配制而成的配方食品，包括适用于0～12 月龄婴儿的特殊医学用途婴儿配方食品和适用于1 岁以上人群的特殊医学用途配方食品，该类产品需在医生或临床营养师指导下使用。特殊医学用途配方食品依据产品标准[1-2]可以添加多种营养成分，其中包括肌醇，依据相关国家标准[1-2]规定，肌醇在特殊医学用途配方食品中的添加量应为1.0～9.5 mg/100 kJ。肌醇又名肌糖、环己六醇，为B族维生素的一种[3]，外观为白色或类白色结晶性粉末，无臭、味甜，易溶于水[4]，是合成许多生物分子，如肌醇磷脂、膜磷脂、鞘磷脂的前体，也是人体不可缺少的营养成分之一[5]。

目前食品中肌醇的测定方法主要有气相色谱法[6-9]、气相色谱-质谱法[10-11]、微生物法[12-13]、液相色谱法[14]、液相色谱-质谱法[15-17]、离子色谱法[18-19]等。但是特殊医学用途配方食品中肌醇的检测方法研究较少，国内文献鲜有报道。本研究建立离子色谱法检测特殊医学用途配方食品中肌醇的方法，对于肌醇检测方法的完善具有一定意义。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

市场采购17 种特殊医学用途配方食品，包括乳蛋白部分水解配方（样品编号1、2、3、4）、乳蛋白深度水解配方（样品编号5、6、7）、氨基酸配方（样品编号8、9）、全营养配方（样品编号10、11）、早产/低出生体质量婴儿配方乳粉（样品编号12、13、14）、早产/低出生体质量婴儿配方液态乳（样品编号15）、无乳糖配方（样品编号16、17）等不同基质。

质控样品：婴儿配方乳粉QC-IP-707，肌醇含量参考值为131.1 mg/100 g，肌醇含量参考值范围为110.2～152.0 mg/100 g。

超纯水（电阻率＞18.2 MΩ·cm） 实验室自制；乙酸钠、氢氧化钠（色谱纯） 德国Merck公司；盐酸（优级纯） 天津市光复精细化工研究所；标准品：肌醇（纯度≥99%） 北京曼哈格生物科技有限公司。

1.2 仪器与设备

930离子色谱仪（配安培检测器，金工作电极）、Metrosep Carb 2-150/4.0分离柱 瑞士万通中国有限公司；Quintix124-1CN万分之一电子天平 北京赛多利斯公司；PHS-3C pH计 上海仪电科学仪器股份有限公司。

1.3 方法

1.3.1 标准溶液配制

准确称取0.050 0 g肌醇标准品，在（105±1） ℃烘干2 h，用超纯水溶解后转移到50 mL容量瓶中并定容，配制成肌醇质量浓度为1 000 mg/L的标准储备液。将储备液用超纯水逐级稀释，配制质量浓度分别为0.000、0.025、0.050、0.100、0.250、0.500、1.000、2.000、5.000、10.000、20.000、40.000 mg/L的标准使用液，现用现配。

1.3.2 样品前处理

准确称取31.25 g样品，用超纯水溶解并定容至250 mL容量瓶中，摇匀。移取8 mL样品溶液于100 mL容量瓶中，加超纯水2 mL，用体积分数0.5%盐酸调节溶液pH值为4.5±0.2，静置至少2 min，用超纯水稀释至刻度，混匀。用定性滤纸过滤，弃去最初10 mL滤液，取后续滤液用0.22 μm针式过滤器过滤至自动进样器样品瓶中进行测定。

1.3.3 色谱条件

色谱柱：Metrosep Carb 2-150/4.0mm分离柱或同等性能的色谱柱；淋洗液：100 mmol/L NaOH＋10 mmol/L CH3COONa（体积比1∶1），流速0.5 mL/min；进样量20 μL；柱温30 ℃；运行时间45 min；检测器温度35 ℃；检测器时间程序为300 ms、0.05 V，50 ms、0.55 V，200 ms、－0.1 V。

1.3.4 肌醇含量的计算

肌醇含量按下式计算。

式中：X1为由标准曲线查得的测试液中肌醇含量/（mg/L）；31.25为称样量/g；250为样品定容体积/mL；8为移取的样品测试液体积/mL；100为移取的样品测试液定容体积/mL；10和10 000均为单位换算系数。

2 结果与分析

2.1 线性范围、检出限和定量限

绘制肌醇含量-峰面积标准曲线，得出回归方程及相关系数。结果显示，在0.025～40.000 mg/L范围内，肌醇含量与峰面积呈良好的线性关系，线性方程为y=141.4x－2.8（R2=0.999 9）。

配制一定质量浓度的肌醇标准溶液逐级稀释，其中质量浓度0.012 5 mg/L的肌醇溶液测试结果满足测定10 个样品时检出率为50%的要求，根据1.3.4节公式得出该方法检出限为0.125 mg/100 g。定量限一般为3～5 倍检出限，即为0.5 mg/100 g。

2.2 准确度实验

将质控样品按照所建立的方法测定肌醇含量，计算平均值与参考值的偏差。由表1可知，该质控样品的测定值与参考值的偏差为3.5%，满足GB/T 27404—2008《实验室质量控制规范 食品理化检测》[20]中对准确度的要求。

表1 质控样品的准确度实验结果（n=3）Table 1 Accuracy of ion chromatography for quality control sample (n = 3)

2.3 精密度实验

将17 种样品按照所建立的方法测定肌醇含量，计算相对标准偏差。由表2可知，不同基质、不同肌醇含量的特殊医学用途配方食品肌醇含量测定结果的相对标准偏差均满足GB/T 27404—2008[20]要求（＜5%），说明本方法的测定重复性满足实验要求。

表2 肌醇的精密度实验结果（n=6）Table 2 Precision of ion chromatography for inositol determination (n = 6)

2.4 加标回收率实验

取8 mL、4 种基质类型（样品编号见表3）样品溶液，进行加标回收率实验，参考GB/T 27404—2008[20]中的要求并结合样品肌醇的本底值确定加标水平（分别做3 次平行），验证方法在不同特殊医学用途配方食品基质中的回收率。

表3 肌醇的加标回收率实验结果（n=3）Table 3 Spiked recovery of inositol (n = 3)

续表3

由表3可知，不同基质样品离子色谱法测得的回收率为83.1%～102.9%。除样品8外，其他3 个样品不是所有加标量的回收率均满足GB/T 27404—2008[20]中的要求（95%～105%），说明不同样品基质的方法适用性可能存在差异。

3 结 论

采用离子色谱法测定不同基质特殊医学用途配方食品中游离肌醇含量，建立特殊医学用途配方食品中肌醇的定量分析方法，方法的精密度、准确度、加标回收率、曲线的线性范围等均符合分析要求，且操作过程简单、快速、分析时间短、可行性好，适用于特殊医学用途配方食品中游离肌醇含量的测定。