奶粉中ARA和DHA的加标回收率研究

朱芹华

加标回收率的简介：加标回收实验是化学分析中常用的实验方法，回收率是判定分析结果准确度的量化指标。本公式只针对本实验的回收率计算：R=（加标试样测定值-试样测定值）/加标量×100%。

ARA和DHA的检测现状：对高级不饱和脂肪酸分析检测的文献报道较多，其中气相色谱法应用较为普及，样品的处理过程也较为简单。

实验

试剂和材料。

（1）乙酰氯甲醇溶液（体积分数为10 %）：量取80 mL 甲醇于100 mL 干燥的烧杯中，吸取10.0mL乙酰氯逐滴加入，不断搅拌，冷却后转移并定容至100 mL 干燥的容量瓶中。临用前配制。

（2）碳酸钠溶液：称取60.0 g 无水碳酸钠于1000 mL 烧杯中，加水溶解，转移并用水定容至1000 mL 容量瓶中。

分析步骤。

（1）样品预处理：称取奶粉试样0.5 g于12 mL 干燥螺口玻璃管中，加入5.0 mL 甲苯，在试样中加入10 %乙酰氯甲醇溶液6.0 mL，旋紧螺旋盖，振荡混合后于80 ℃ ±1 ℃水浴中放置2 h，期间每隔20 min取出振摇一次，水浴后取出冷却至室温。将反应后的样液转移至50 mL离心管中，用3.0 mL碳酸钠溶液清洗玻璃管三次，合并碳酸钠溶液于50 mL离心管中，混匀，8000 转/分钟离心5 min。取上清液过0.22um过滤膜，滤液作为试液，气相色谱仪测定。

（2）加标样品的预处理：称取奶粉试样0.5g于12 mL 干燥螺口玻璃管中，往玻璃管中加入不同量的标准溶液后加入5mL甲苯，进行处理。

标准溶液的制备。将10mg/mL的ARA和DHA标准品用甲苯稀释到0.01，0.02，0.05，0.10，0.20mg/mL的浓度，进行进样，进样量为1uL 。

样品溶液的测定。

（1）标准溶液的测定：分别吸取1.0 μL ARA和DHA标准测定液注入色谱仪，以色谱峰响应值定量。标准曲线如图：

图1中可见，ARA在在上述条件下进行色谱分析，以分面积定量，对浓度为0.01、0.02、0.05、0.10、0.20mg/mL的ARA标准溶液进行进行并线性回归。结果表明，ARA在0.01～0.20浓度范围内线性良好，线性回归方程式为：Y=34055243.15X+29938.88；r2=0.999774

图2中可见，DHA在在上述条件下进行色谱分析，以分面积定量，对浓度为0.01、0.02、0.05、0.10、0.20mg/mL的ARA标准溶液进行进行并线性回归。结果表明，ARA在0.01～0.20浓度范围内线性良好，线性回归方程式为：Y=34703183.04X+30065.29；r2=0.999470

（2）样品溶液的测定：吸取1.0uL的样品测定液注入色谱仪，以色谱峰响应值根据标准曲线定量。结果如下表：

ARA加标样品：当添加量是样品含量的0.5倍时，平均回收率在108.5%；当添加量是样品含量的1.0倍时，平均回收率在98.4%；当添加量是样品含量的2.0倍时，平均回收率在100.7%；当添加量是样品含量的4.0倍时，平均回收率在80.2%。

DHA加标样品：当添加量是样品含量的0.5倍时，平均回收率在101.5%；当添加量是样品含量的1.0倍时，平均回收率在101.1%；当添加量是样品含量的2.0倍时，平均回收率在107.8%；当添加量是樣品含量的4.0倍时，平均回收率在89.6%；

结果与讨论

从图3中可以看出，检测ARA时，当加标量在样品含量的1.0-2.0倍时，回收率效果最好，回收率在97.6%-103.5%，RSD值在0.48-2.36；

从图4中可以看出，检测DHA时，当加标量在样品含量的0.5-1.0倍时，回收率效果最好，回收率在101.1%-101.5%，RSD值在0.22-0.71；

结论

（1）检测ARA时，当加标量在样品含量的1.0-2.0倍时，回收率效果最好。

（2）检测DHA时，当加标量在样品含量的0.5-1.0倍时，回收率效果最好。

（3）从图3和图4中可以明显看出，不同的加标量对回收率有着明显的影响和差异，当检测结果需要体现回收率时，适当的加标量可以获得较好的回收率。较好的回收率对于婴幼儿奶粉中DHA和ARA等物质的检测，提供更可靠的数据。