特殊医学用途婴儿配方食品中氯的国标检测方法适用性

吴 昊，张 斌，刘晓光，郭美娟，张兰天，张 岩

（河北省食品检验研究院，河北省食品安全重点实验室，河北 石家庄 050200）

特殊医学用途婴儿配方食品指针对患有特殊紊乱、疾病或医疗状况等特殊医学状况婴儿的营养需求设计制成的粉状或液态配方食品。在医生或临床营养师的指导下，单独食用或与其他食物配合食用时，其能量和营养成分能够满足0～6 月龄特殊医学状况婴儿的生长发育需求[1-2]。氯是人体必需元素，血液中的氯等电解质离子比例失调时，轻者使人疲乏无力、厌食嗜睡、消化不良，重者导致呕吐、抽搐、昏迷不醒、心律失常等症状[3]。特殊医学用途婴儿配方食品中的氯主要来自加工过程中加入的食盐[4]。GB 25596—2010《食品安全国家标准 特殊医学用途婴儿配方食品通则》规定，特殊医学用途婴儿配方食品中氯的含量范围为12～38 mg/100 kJ。

GB 25596—2010指定特殊医学用途婴儿配方食品中氯的检测方法为GB 5413.24—2010《食品安全国家标准 婴幼儿食品和乳品中氯的测定》。目前，GB 5413.24—2010已被废止，现行国标为GB 5009.44—2016《食品安全国家标准 食品中氯化物的测定》[5]。GB 5009.44—2016规定了食品中氯化物的3 种检测方法，分别为电位滴定法、佛尔哈德法（间接沉淀滴定法）、银量法（摩尔法或直接滴定法）。目前婴幼儿配方乳粉中氯采用GB 5009.44—2016第三法，即银量法（摩尔法或直接滴定法）进行检测，而对于种类繁多、基质不同的特殊医学用途婴儿配方食品，该方法的适用性仍需进一步验证。

作为乳蛋白过敏婴幼儿的唯一食物来源，特殊医学用途婴幼儿蛋白质水解配方和氨基酸配方产品的质量控制尤为重要[6-9]。本研究共有7 家实验室参与，依据GB 5009.44—2016对3 类不同配方特殊医学用途婴儿配方食品、共8 种产品中的氯进行测定，研究特殊医学用途婴儿配方食品中氯国标检测方法的适用性，期望能够为建立特殊医学用途婴儿配方食品中氯的检测方法提供技术支撑。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

目前因无法得到特殊医学用途婴儿配方食品的参考样品，代以市售婴儿配方乳粉作为参考样品，参考值由具有ISO 17043资质的实验室基于AOAC 986.26的内部检测方法，依据能力验证统计方法计算得出。

本研究选用市售不同品牌、不同配方的特殊医学用途婴儿配方食品为样品，具体为4 种乳蛋白部分水解配方产品、2 种乳蛋白深度水解配方产品及2 种氨基酸配方产品。样品信息详见表1。

表1 特殊医学用途婴儿配方食品样品信息Table 1 Information about samples tested in this study

本研究中各实验室所用仪器、试剂及标准溶液配制均参照GB 5009.44—2016要求进行。

1.2 仪器与设备

855型全自动电位滴定仪 瑞士万通有限公司。

1.3 方法

样品前处理及氯的检测分析采用GB 5009.44—2016第三法银量法（摩尔法或直接滴定法）和GB 5009.44—2016第一法电位滴定法。

1.4 数据处理

使用Microsoft Office Excel 2007软件和SPSS软件进行数据处理。

2 结果与分析

2.1 婴儿配方乳粉参考样品中氯含量测定结果

本研究参加比对的7 家实验室使用GB 5009.44—2016第三法对参考样品中的氯进行检测。由表2可知，参考值为423 mg/100 g，各实验室检测值为412～490 mg/100 g，相对标准偏差为6.17%。直接滴定法的终点是靠肉眼进行判断，而且在滴定管的估读上可能存在误差，从而导致结果出现差异[10]。

表2 婴儿配方乳粉参考样品中氯含量测定结果（GB 5009.44 —2016第三法）Table 2 Results of silver nitrate titration for chlorine in infant formula reference samples

2.2 特殊医学用途婴儿配方乳粉中氯含量测定结果

由表3可知，各样品检测结果的相对标准偏差为12.7%～32.9%。蛋白质水解配方和氨基酸配方样品中含有氨基酸，酸性较强，在此条件下，会转化为从而指示终点的Ag2CrO4沉淀出现延迟。此外，样品中的氨基酸还有可能会与银离子发生反应，形成有色（如红棕色）物质，影响终点判定，最终导致检测结果偏高[11-13]。而GB 5009.44—2016第三法是在碱性环境（pH 6.5～10.5）中用硝酸银进行滴定，通过目测颜色变化来判定终点，因此采用GB 5009.44—2016第三法检测蛋白质水解配方和氨基酸配方样品中氯时，样品基质影响终点判断，导致检测结果差异性较大。

表3 特殊医学用途婴儿配方乳粉中氯含量测定结果（GB 5009.44—2016第三法）Table 3 Results of silver nitrate titration for chlorine content in infant formula for special medical purposes

2.3 各实验室测定结果的ZB值

ZB值即实验室间Z比分数（Z值），用来衡量实验室间测试结果的系统误差[14]。Z值用来衡量某一测试结果在一组数据中相对于中位值的偏离程度，Z绝对值越小，表明该结果的偏离程度越低。Z值的计算公式为：Z=（测试结果－中位值）/测试结果的标准四分位数间距。依据CNAS-GL02《能力验证结果的统计处理和能力评价指南》中对Z比分数评价准则的规定，|Z|≤2为满意结果，2＜|Z|＜3为可疑或有问题结果，|Z|≥3为不满意结果。

由表4可知，实验室4氨基酸配方样品D、乳蛋白部分水解配方样品E，实验室7乳蛋白部分水解配方样品B、F和氨基酸配方样品H 5 个样品检测结果的|ZB|大于2，其余51 个检测结果的|ZB|≤2，说明检测结果精密度符合实验要求。

表4 各实验室测定结果的ZB值Table 4 ZB values obtained in seven laboratories

2.4 回收率测定结果

为了进一步验证GB 5009.44—2016第三法的方法适用性，选择乳蛋白深度水解配方样品C、氨基酸配方样品D、乳蛋白部分水解配方样品E进行加标回收实验，考察方法的准确性。GB/T 27404—2008《实验室质量控制规范 食品理化检测》规定，含量大于100 mg/kg的被测组分，其加标回收率应为95%～105%。

由表5可知：对于乳蛋白深度水解配方样品C，实验室2的加标回收率为108%，略高于105%，实验室4的加标回收率高达125%；对于氨基酸配方样品D，实验室1的加标回收率为106%，略高于105%；对于乳蛋白部分水解配方样品E，实验室1、2的加标回收率为108%，略高于105%，其他实验室加标回收率检测结果均符合GB/T 27404—2008要求。

表5 各实验室加标回收率测定结果Table 5 Spiked recoveries of silver nitrate titration obtained in different laboratories

2.5 方法间比对

GB 5009.44—2016第一法（电位滴定法）是在酸性（硝酸）环境中用硝酸银进行滴定，银离子和氯离子生成白色沉淀，经硝酸酸化后，硝酸银可排除多种杂质离子的干扰，从而能够准确测定溶液中的含氯离子。田洪芸等[9]报道，电位滴定法测定结果准确度好、精密度高，能避免基质干扰，因此，采用电位滴定法来进一步验证国标方法的适用性。采用电位滴定法重新检测8 种特殊医学用途婴儿配方乳粉样品中的氯，并进行加标回收实验。

由表6可知，GB 5009.44—2016第一法检测结果低于GB 5009.44—2016第三法，乳蛋白深度水解配方样品C、氨基酸配方样品D的加标回收率均符合GB/T 27404—2008要求，但乳蛋白部分水解配方样品E的加标回收率偏低，仅75.6%，不符合GB/T 27404—2008要求。

表6 特殊医学用途婴儿配方乳粉中氯含量测定结果（GB 5009.44 —2016第三法和第一法）Table 6 Results of silver nitrate titration and potentiometric titration for chlorine contents in real samples of infant formula for special medical purposes

3 结 论

采用GB 5009.44—2016第三法银量法（摩尔法或直接滴定法）检测特殊医学用途婴儿配方食品中乳蛋白部分水解配方、乳蛋白深度水解配方、氨基酸配方样品中氯含量，得到的样品加标回收率分别为95%～108%、98%～125%、100%～106%，相对标准偏差为12.7%～32.9%。采用GB 5009.44—2016第一法电位滴定法得到的检测结果低于第三法检测结果，电位滴定法检测乳蛋白部分水解配方样品的回收率较低，后期需进一步对该方法进行验证。