EB病毒相关性传染性单核细胞增多症患儿T淋巴细胞亚群临床意义分析

和 岚，刘 青，谭雅楠

（1北京大学第三医院海淀院区儿科 北京 100080）

（2北京大学第三医院海淀院区检验科 北京 100080）

传染性单核细胞增多症(IM)是一种由EB病毒感染引起的急性或亚急性全身性疾病，其临床症状复杂多样，包括发热、咽峡炎、颈部淋巴结肿大、肝脾肿大等[1]。IM在小儿与青少年中好发，主要传播途径为经口密切接触，比如共用餐具、亲吻等，且该病早期临床症状不典型，早期鉴别诊断较为困难，易造成误诊[2]。孙洪运[3]认为，IM发病机制、人体细胞免疫调节及细胞免疫应答之间存在密切相关性，若免疫功能紊乱、潜伏感染反复激活，IM患儿的相关症状可能持续存在，且呈反复发作。因此，本研究通过检测IM患儿急性期细胞免疫变化情况，分析EB病毒-DNA载量与T淋巴细胞亚群间的相关性；对IM患儿实施更昔洛韦联合还原型谷胱甘肽治疗，观察期对T淋巴细胞亚群的变化，为临床治疗提供参考方案。

1.资料与方法

1.1 一般资料

选取2017年1月—2019年12月本院收治的80例传染性单核细胞增多症患儿(IM)为观察组，均符合《诸福棠实用儿科学》[4]中关于传染性单核细胞增多症的诊断标准，其中男48例，女32例；年龄1.5～12岁，平均(4.95±1.32)岁；3岁 以 下21例(26.25%)，3～6岁27例(33.75%)，6岁 以 上32例(40.00%)；病 程5～15d，平均(7.26±2.13)d；首诊发热62例。另选取同期住院其他疾病儿童80例为对照组，男50例，女30例；年龄0.4～12岁，平均(5.02±1.41)岁；年龄分布：3岁 以 下23例(28.75%)，3～6岁26例(32.50%)，6岁以上31例(38.75%)。两组一般资料比较差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 治疗方法：观察组患儿给予更昔洛韦静脉滴注，5 mg/(kg·次)，2次/d；还原型谷胱甘肽静脉滴注，30 mg/(kg·次)，1次/d。连续治疗7～14 d后比较临床疗效。

1.2.2 EB病毒-DNA载量检测：采集患儿空腹外周静脉血2 mL，以EDTA抗凝，采用荧光定量PCR检测EB病毒-DNA载量，试剂盒购自上海之江生物科技有限公司，所有操作均严格按照试剂盒说明书进行，以EB病毒-DNA载量≥5×102copies/μL为阳性。

1.2.3 T淋巴细胞亚群检测：采集IM患儿治疗前后及同期住院其他疾病儿童治疗前空腹外周静脉血2 mL，以EDTA抗凝，采用流式细胞仪对T淋巴细胞亚群进行检测，包括CD3+、CD4+、CD8+，计算CD4+/CD8+比值。所用试剂含有FITC标记的CD3，克隆SK7；PE标记的CD8，克隆SK1；PerCP标记的CD45，克隆2D1；APC标记的CD4，克隆SK3，购自于美国碧迪医疗器械有限公司。

1.3 临床疗效评价

显效：患者治疗3 d内体温恢复正常，其临床症状及体征均得到缓解；有效：患者治疗3～5 d体温恢复正常，其他临床症状及体征均缓解；无效：患者治疗5 d后体温仍超过37.5 ℃，其他临床症状及体征无改善甚至加重[5]。

1.4 统计学方法

采用SPSS 20.0统计软件进行数据处理。正态分布的计量资料采用均数±标准差（±s）表示，组间比较采用t检验，计数资料用频数和百分比（%）表示，组间比较采用χ2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2.结果

2.1 两组T淋巴细胞亚群水平比较

观察组(急性期IM患儿)CD3+、CD8+显著高于对照组(P＜0.05)，CD4+、CD4+/CD8+比值均高于对照组，差异有统计学意义(P＜0.05)，见表1。

表1 两组T淋巴细胞亚群水平比较(±s，%)

表1 两组T淋巴细胞亚群水平比较(±s，%)

注：与对照组比较，aP＜0.05。

组别 CD3+ CD4+ CD8+ CD4+/ CD8+比值观察组81.36±5.48a 17.68±8.95a 60.84±12.89a 0.29±0.16a对照组65.78±6.05 32.64±6.72 23.26±4.89 1.40±0.51 t 8.746 -6.125 12.492 -9.517 P 0.000 0.000 0.000 0.000

2.2 观察组急性期EB病毒-DNA载量与T淋巴细胞亚群之间的相关性分析

观察组急性期EB病毒-NDA载量为(6.85±0.85)×102copies/μL，与CD3+、CD8+T细胞均呈正相关(P＜0.05)，与CD4+、CD4+/CD8+比值均呈负相关(P＜0.05)，见表2。

表2 观察组急性期EB病毒-DNA载量与T淋巴细胞亚群之间的相关性分析（±s）

表2 观察组急性期EB病毒-DNA载量与T淋巴细胞亚群之间的相关性分析（±s）

项目 CD3+ CD4+ CD8+ CD4+/ CD8+比值观察组81.36±5.48 17.68±8.95 60.84±12.89 0.29±0.16 r 0.296 -0.408 0.175 -0.459 P 0.037 0.001 0.028 0.003

2.3 观察组治疗前后T淋巴细胞亚群水平变化及临床疗效T淋巴细胞亚群

治疗后观察组CD3+、CD8+低于治疗前(P＜0.05)，CD4+、CD4+/CD8+比值均较显著升高(P＜0.05)，见表3；临床疗效：急性期IM患儿采用更昔洛韦联合还原型谷胱甘肽治疗后，显效43例(53.75%)，有效31例(38.75%)，无效6例(7.50%)，总有效率为92.50%。

表3 观察组治疗前后T淋巴细胞亚群水平变化比较(±s，%)

表3 观察组治疗前后T淋巴细胞亚群水平变化比较(±s，%)

注：与对照组比较，bP＜0.05。

时间 CD3+ CD4+ CD8+ CD4+/ CD8+比值治疗前81.36±5.48 17.68±8.95 60.84±12.89 0.29±0.16治疗后68.97±6.29b 28.83±6.54b 29.95±5.06b 0.96±0.34b t 12.547 -11.574 17.769 -14.897 P 0.000 0.000 0.000 0.000

3.讨论

EB病毒是一种嗜淋巴细胞的DNA病毒，主要通过唾液接触传播，感染初期，病毒大量复制，促使一些细胞炎症因子的产生，导致病毒传播。有研究[6-7]就IM的各种临床症状发生机制进行探讨，认为EB病毒侵入人体后可激活T淋巴细胞，产生强烈的免疫应答反应，导致机体免疫功能紊乱引起。T淋巴细胞亚群较多，其中CD3+是所有T细胞的表面标志；CD4+是辅助性T细胞的表面标志，具有辅助细胞免疫与体液免疫的作用；CD8+则属于细胞毒性T细胞表面标志；CD4+/CD8+比值是重要的免疫状态的监测指标，其比例的降低与免疫系统损伤的程度相关[8]。本研究中，与对照组比较，观察组(急性期IM患儿)CD3+、CD8+高于对照组(P＜0.05)，CD4+、CD4+/CD8+比值均较对照组显著下降(P＜0.05)，提示急性期IM患儿免疫功能下降。此结果与许多相关研究相一致[9]。

荧光定量PCR检测EB病毒-DNA载量是近年来发展的新技术，可定量反映体内EB病毒-DNA水平，并准确反映EB病毒感染和复制情况，且EB病毒-DNA载量与IM临床表现的严重程度呈正相关[10]。本研究结果显示，观察组急性期EB病毒-NDA载量与CD3+、CD8+T细胞均呈正相关(P＜0.05)，与CD4+、CD4+/CD8+比值均呈负相关(P＜0.05)。因此，EB病毒-DNA载量浓度越高，多系统损害越严重，从而得出患儿的免疫功能越差。为改善IM患儿免疫功能，本文采用更昔洛韦联合还原型谷胱甘肽进行治疗，结果：IM患儿免疫功能显著改善(P＜0.05)，总有效率为92.50%。分析原因为[11-12]：更昔洛韦可通过抑制多聚酶的活性来阻断病毒复制和转录过程，其是抗病毒药物中病毒抑制作用活性最强的；还原型谷胱甘肽是肝内主要抗氧化物，通过与自由基、过氧化物结合发挥抗氧化作用，对多种原因引起的肝损伤均有很好的治疗作用。两药联合应用既保证IM患儿的治疗有效性，又保证用药的安全性。

综上所述，IM患儿急性期存在细胞免疫及免疫功能紊乱，其免疫功能紊乱程度与EB病毒-DNA载量密切相关，为更好的治疗IM患儿，采用更昔洛韦联合还原型谷胱甘肽可促进IM患儿机体免疫功能的恢复，加快患儿的康复。