CYP11B2、APOA5基因多态性与老年高血压的关系

陈昭喆，简立国，宋亚辉，谢秀乐，张登科，冯 磊，彭 坤，康 锐

CYP11B2、APOA5基因多态性与老年高血压的关系

陈昭喆1，简立国2，宋亚辉1，谢秀乐1，张登科1，冯 磊1，彭 坤1，康 锐1

摘要：目的探讨醛固酮合成酶(CYP11B2)、载脂蛋白A5(APOA5)基因多态性与老年高血压的关系。方法选取2017年2月—2019年2月在信阳市中心医院治疗的老年高血压病人200例(观察组)，同时选取健康体检者200名作为对照组，采用限制性片段长度多态性聚合酶链反应测定CYP11B2、APOA5基因多态性。结果两组CYP11B2、APOAT5基因型分布差异有统计学意义(P<0.05)，观察组CYP11B2、APOAT5等位基因C比例分别为34.00%和33.75%，明显高于对照组(P<0.05)；高血压分级越高，病人CYP11B2、APOA5基因型CC+TC型比例越高(P<0.05)，其中高血压分级3级病人CYP11B2、APOA5基因型CC+TC型比例分别为76.92%、78.85%，明显高于高血压分级1级和2级病人(P<0.05)。结论CYP11B2、APOA5基因多态性可能在老年高血压发病过程中有重要作用。

关键词：高血压；醛固酮合成酶；载脂蛋白A5；基因多态性；老年

基金项目河南省医学科技攻关计划项目(No.201832569)

作者单位：1.信阳市中心医院/郑州大学附属信阳医院(河南信阳464000)；2.郑州大学第二附属医院

引用信息陈昭喆，简立国，宋亚辉，等.CYP11B2、APOA5基因多态性与老年高血压的关系[J].中西医结合心脑血管病杂志，2021，19(14)：2414-2416.

doi：10.12102/j.issn.1672-1349.2021.14.028

老年高血压是指年龄高于65岁，血压持续或非同日3次检测超过标准血压的病人[1]。本类高血压病人由于机体老化，动脉管壁弹性较小，其临床特征以收缩压上升，收缩压与舒张压差距明显等为主[2]。老年高血压发病机制除与病人机体老化有关外，还与遗传、饮食、肥胖等因素有关。醛固酮是盐皮质激素的一种，可通过基因或非基因方式增强血管平滑肌细胞增殖、肥大，并参与血管重塑，醛固酮合成酶(CYP11B2)是醛固酮合成、裂解的重要调控因子；载脂蛋白A5(APOA5)可对血浆三酰甘油(TG)水平进行调控，临床研究发现，APOA5基因多态性与血脂代谢异常密切相关，并可因此引发高血压、心脏病等[3]。为探讨CYP11B2、APOA5基因多态性与老年高血压的关系，本研究选取我院治疗的200例老年高血压病人进行研究。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2017年2月—2019年2月在信阳市中心医院治疗的老年高血压病人200例(观察组)，纳入标准：①诊断符合世界卫生组织(WHO)制定的高血压诊断标准；②年龄≥60岁；③汉族；④病人及家属知情同意。排除标准：①继发性高血压；②合并有糖尿病、肝肾功不全、恶性肿瘤、免疫系统疾病、心脏病、甲状腺疾病等其他疾病。同时选取健康体检者200名作为对照组。两组一般资料比较差异均无统计学意义(P>0.05)。详见表1。

表1 两组一般资料比较

1.2 方法 抽取研究对象静脉血3 mL，置于抗凝试管内冷藏备用，选用Trizol法提取血液DNA，选用琼脂糖凝胶电泳进行DNA浓度及纯度检测，选用美国菲力尔分子凝胶成像仪读取结果。取4 μg样本，在PubMed.SNP数据库查询CYP11B2、APOA5基因序列，并设计引物，CYP11B2正向引物：5′-AGAGCGGCATGAAGAAGGAGTG-3′，反向引物：5′-GAAATGGGAGAAGGTAGTGTCAAA-3′；APOA5正向引物：5′-GAAGAAACCTTAAGGAGTG-3′，反向引物：5′-AGGAGGTTCAAGGTCCTTC-3′。聚合酶链式反应(PCR)反应体系为：模板2 μL，正向/反向引物各1 μL，PCRmix 12 μL，灭菌双蒸水9 μL。反应条件为：95 ℃，10 min；94 ℃，45 s；63 ℃，40 s；72 ℃，45 s。共30个循环，对反应产物进行限制性酶切消化，并选用2.5%琼脂糖凝胶电泳检测酶切产物，最终选用赛默飞EGel Imager凝胶成像系统读取结果。

2 结 果

2.1 CYP11B2、APOA5基因型 根据Hae Ⅲ酶切片段结果，CYP11B2基因型分为CC、TT和CT型，详见图1；根据MseⅠ酶切片段结果，APOA5基因型分为CC、TT和TC型。详见图2。

图1 CYP11B2基因电泳图

图2 APOA5基因电泳图

2.2 两组CYP11B2、APOA5基因多态性比较 两组CYP11B2、APOA5基因型分布符合Hardy-Weinberg遗传平衡(P>0.05)；两组CYP11B2、APOA5基因型分布差异有统计学意义(P<0.05)，观察组CYP11B2、APOA5等位基因C比例明显高于对照组(P<0.05)。详见表2、表3。

表2 两组CYP11B2基因型和等位基因比较 单位：例(%)

表3 两组APOA5基因型和等位基因比较 单位：例(%)

2.3 观察组不同高血压分级病人CYP11B2、APOA5基因多态性分析 高血压分级越高，病人CYP11B2、APOA基因型CC+TC型比例越高(P<0.05)，其中高血压分级3级病人CYP11B2、APOA5基因型CC+TC型比例明显高于高血压分级1级和2级病人(P<0.05)。详见表4。

表4 观察组不同高血压分级病人CYP11B2、APOA5基因多态性分析 单位：例(%)

3 讨 论

醛固酮可与心脏盐皮质激素受体反应，诱导胶原蛋白及心肌成纤维细胞增殖，最终引起心室结构改变，导致室壁增厚[4]。醛固酮还可影响人体血钾浓度，并促使血管紧张素Ⅱ高表达，影响血管结构。有研究发现，醛固酮可促进血管内中膜增厚，并参与血管重构[5]。CYP11B2是细胞氧化酶家族成员之一，是醛固酮合成的重要参与酶。CYP11B2主要表达于肾上腺皮质内，其基因位于人8q22染色体上，含有8个内含子、9个外显子[6]。CYP11B2具有两种变异基因，一种是转录因子的结合位点，其突变体现为胸腺嘧啶及胞嘧啶的变换；另一种变异则与第二内含子内大部分基因被其同源基因代替，最终导致CYP11B2从野生型向转换型转变[7-8]。对于CYP11B2基因多态性与高血压间的联系，临床还存在一定争议。有研究认为，男性人群CYP11B2 CC基因型可促进其醛固酮水平上升，并且高于CYP11B2 TT及TC型基因；而女性人群CYP11B2 344TC位点基因多态性与其血清醛固酮水平并无联系[9]。还有研究发现，原发性高血压与CYP11B2 344CT等位基因多态性密切相关[10]。本研究中，两组CYP11B2基因型分布差异有统计学意义(P<0.05)，并且观察组CYP11B2等位基因C比例为34.00%，明显高于对照组(14.00%)，表明CYP11B2 C型(CC型+TC型)等位基因是老年高血压的影响因素，其原因可能为CYP11B2的344TC位点变异可促使机体醛固酮异常表达，并引发相关疾病。但对于性别与CYP11B2 C型基因及高血压间的联系如何，尚无结论，这有待进一步的研究。本研究结果显示，高血压分级越高，病人CYP11B2基因型CC+TC型比例越高，其中高血压分级3级病人CYP11B2基因型CC+TC型比例为76.92%，明显高于高血压分级1级和2级病人，这也表明CYP11B2基因型CC+TC型是老年高血压的危险因素，并且与病人疾病进展密切相关。

APOA5是脂类运转的重要介质，可调整脂蛋白代谢相关酶表达，并影响机体脂质代谢。大量研究显示，血脂异常是多种心血管疾病的独立危险因素[11-12]。有研究发现，小鼠APOA5基因过度表达时，其血浆胆固醇浓度显著下降，其原因可能与APOA5异常表达导致血浆脂蛋白水平下降，脂蛋白内的胆固醇浓度也随之下降[13]。1131位点是APOA5基因的第4个外显子的突变点，与血浆三酰甘油(TG)水平密切相关[14]。本研究中，两组APOA5基因型分布差异有统计学意义(P<0.05)，观察组APOA5等位基因C比例明显高于对照组(P<0.05)，表明APOA5等位基因C型多态性与老年高血压密切相关，其原因可能为：APOA5基因1131位点多态性与高血压密切相关，CC纯合子可能具有高血压保护功能，当1131基因位点出现C碱基与T碱基变换时，CC纯合子的保护作用将失去，病人高血压发病风险上升[15]。随后的研究发现，高血压分级越高，病人APOA5基因型CC+TC型比例越高，其中，高血压分级3级病人APOA5基因型CC+TC型比例明显高于高血压分级1级和2级病人，表明APOA5等位基因CC+TC型还与高血压疾病严重程度相关。

本研究发现CYP11B2、APOA5等位基因C型多态性与老年高血压密切相关，同时还与病人疾病严重程度相关，临床或可通过检测CYP11B2、APOA5基因多态性来诊断老年高血压，并评估其疾病严重程度。受限客观条件，本研究还存在一定不足，如尚未明确性别与CYP11B2 C型基因及高血压间的联系。

综上所述，CYP11B2、APOA5基因多态性可能在老年高血压发病过程中有重要作用。

(收稿日期：2020-03-01)

(本文编辑 王丽)