三种血清肿瘤标志物在原发性肝癌诊断中的价值

常静霞，张丽，朱旖清，沈敏，王冰，汪俊军

原发性肝癌（PHC）是临床常见的消化道恶性肿瘤，发病率位居我国常见肿瘤的第4位，死亡率位居第2位[1]。肝癌的预后极差，早期诊断困难，患者生存率低。血清肿瘤标志物检测是肝癌早发现、早诊断的重要手段，临床最常用的血清标志物为甲胎蛋白（AFP）[2]。但AFP诊断肝癌的敏感性和特异性均不够理想，因此当前亟待寻求其他标志物或能与之联合检测的标志物，以期提高肝癌早期诊断的敏感性和特异性。随着临床检验技术的不断进步，异常凝血酶原（PIVKA-Ⅱ）和高尔基体蛋白73（GP-73）被为用于肝癌早期诊断。PIVKA-Ⅱ为肝

1 资料与方法

细胞合成凝血酶原过程中的异常产物[3]。GP-73，又称高尔基体Ⅱ型跨膜蛋白，是一种新发现的与肝癌密切相关的岩藻糖基化蛋白[4]。本研究通过检测患者血清PIVKA-Ⅱ、AFP及GP-73的水平，探讨3项指标在诊断PHC中的价值，报道如下。

1.1 一般资料 选取2017年1―12月在东部战区总医院（原八一医院）全军肝病中心住院期间检查PIVKA-II、AFP和GP-73的肝病患者134例。PHC组52例，其中男43例，女9例；平均年龄（60.3±9.8）岁。肝硬化组40例，其中男32例，女8例；平均年龄（55.6±11.5）岁。慢性乙型肝炎（慢乙肝）组42例，其中男36例，女6例；平均年龄（45.6±12.6）岁。另选同期收治的非肝病组50例，其中男27例，女23例；平均年龄（47.6±13.9）岁。PHC、乙型肝炎肝硬化、慢性乙型肝炎诊断标准符合《原发性肝癌诊疗规范》（2019年版）[1]和《慢性乙型肝炎防治指南》（2015年版）[5]中的诊断标准。

1.2 血清PIVKA-II、AFP和GP-73的测定 血清PIVKA-II检测采用雅培Abbot公司的ARCHITECT-i2000全自动电化学发光免疫分析仪及配套PIVKA-II检测试剂盒。血清AFP检测采用雅培Abbot公司的ARCHITECT-i1000全自动电化学发光免疫分析仪及配套AFP检测试剂盒。血清GP-73检测采用北京热景生物公司的UPT-3A上转发光免疫分析仪及配套的GP-73检测试剂盒。各项操作（含诊断结果判断）严格遵照相关仪器和配套试剂盒使用说明书。诊断标准：PIVKA-II≥40 mAU/ml、AFP≥10 g/L、GP-73≥150 ng/ml为阳性。采用GEPIA2数据库（http://gepia2.cancer-pku.cn/#analysis）分析PIVKA-Ⅱ、AFP和GP-73在原发性肝癌和相应正常组织中的表达，并分析3项指标的表达水平与肝癌总生存期关系。

1.3 统计方法 用SPSS 17.0统计软件进行分析。非正态分布的计量资料以中位数（最小值～最大值）表示，多组比较运用Cruskal-Wallis H检验，两组比较运用Mann-Whitney U检验；计数资料比较用2检验；制作受试者工作特征（ROC）曲线，计算曲线下面积，用以评价诊断的灵敏性和特异性。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 血清PIVKA-Ⅱ、AFP和GP-73水平比较 4组PIVKA-Ⅱ、AFP和GP-73水平差异均有统计学意义（均P＜0.05），其中PHC组PIVKA-Ⅱ、AFP和GP-73水平高于肝硬化组、慢乙肝组及非肝病组（均P＜0.05），肝硬化组与慢乙肝组及非肝病组差异均有统计学意义（均P＜0.05）。而慢乙肝组与非肝病组差异无统计学意义（均P＞0.05）。见表1。

表1 各组血清PIVKA-Ⅱ、AFP和GP-73水平比较

2.2 血清PIVKA-Ⅱ、AFP和GP-73单独及联合检测对诊断PHC的价值 3项指标ROC曲线下面积分别为0.936、0.886和0.861，见图1。进一步分析发现，PIVKA-Ⅱ、AFP和GP-73的灵敏性差异无统计学意义（2=0.083，P＞0.05）。但是PIVKA-Ⅱ单独检测的特异性高于AFP及GP-73（2=12.736，P＜0.05）。并联联检PHC的灵敏性为92.31%，串联联检时PHC特异性可高达97.15%，见表2。

图1 血清PIVKA-Ⅱ、AFP和GP-73单独诊断PHC的ROC曲线

表2 血清PIVKA-Ⅱ、AFP和GP-73单独及联合鉴别PHC的灵敏性和特异性 %

2.3 PIVKA-Ⅱ、AFP和GP-73在PHC和正常组织中的表达及与PHC总生存期关系 3项指标在PHC中的表达水平均高于正常组织（图2）。进一步分析发现，PIVKA-Ⅱ、AFP和GP-73表达水平高的患者预后不良（图3）。

图2 PIVKA-Ⅱ、AFP和GP-73在PHC和正常组织中的表达

图3 PIVKA-Ⅱ、AFP和GP-73与肝癌总生存期关系

3 讨论

近年PHC的病死率和发病率均呈逐渐上升趋势[6]。血清AFP一直被认为是诊断肝癌的首选指标。但由于血液中AFP水平与癌肿直径、分化、生长及变性坏死有密切关系，故有些肝癌患者血清AFP水平较低或处于正常水平。这些因素导致采用AFP作为肝癌诊断的独立指标，可能存在假阴性的问题，从而限制了其在肝癌早期诊断中的临床价值[7]。

PIVKA-II是一种异常脱羧基凝血酶原，其产生与肝癌细胞内凝血酶原前体异常羧基化密切相关，可作为诊断肝癌的高度特异的血清标志物[8]。定位于高尔基体的Ⅱ型跨膜蛋白GP-73，是一个岩藻糖基化蛋白，其与肝癌的发生密切相关。血清GP73在PHC诊断方面具有较高的特异性和灵敏性[9]。

本研究发现，PHC患者的PIVKA-Ⅱ、AFP和GP-73血清水平高于其他组（均P＜0.05），且肝硬化组3项指标水平高于慢乙肝组和对照组。单项检测中PIVKA-II的灵敏性最高，为76.92%，特异性达到了85.11%，均高于AFP，与谢芳等[10]结果相符。ROC曲线分析发现，PIVKA-II的曲线下面积最大，为0.936（作独立指标诊断PHC）。这表明PIVKA-Ⅱ可明显提高PHC诊断的准确度，具有较高的单项诊断价值。本研究进一步分析发现，并联试验将灵敏性提高至92.31%，串联试验可提高肝癌诊断的特异性，至97.15%。通过相关数据库分析发现，PIVKA-Ⅱ、AFP、GP-73在PHC组织中的表达均高于正常组织，且表达水平越高的患者愈后越差。

综上所述，PIVKA-Ⅱ、AFP、GP-73联合检测可以提高PHC的诊断效能，弥补单项检测的不足，为肝癌的早诊早治提供帮助，具有广泛的应用价值。