名医夏惠明教授平推法干预慢性腰肌损伤兔模型的研究

杨丽秋 夏惠明 龙鑫 汪昂 岳阳 杨宇 杨阳 杨永兰

摘要：目的 明确夏教授辨证运用平推法作用于慢性腰肌损伤的兔动物模型后，柔和及渗透是手法的重要因素，为临床推广夏教授平推法的辨证学术经验打下基础。方法 取日本大耳白兔70只，随机分为不用手法对照组、作用时间长手法组、作用时间短手法组、频率快手法组、频率慢手法组、手下有压力组、手下无压力组，每组10只，采用人工固定家兔加桑枝击打腰部肌肉造模，经过周期治疗对比，测定兔血清中免疫功能、血液流变学，处死后腰肌病理切片，观察镜下肌肉组织的变化，后进行统计学分析。结果 有压力且作用时间长的平推法能提高慢性腰肌损伤的免疫力水平（P<0.05）;其余平推法组无显著性差异（P>0.05）。结论 夏惠明教授平推法能提高慢性腰肌损伤的免疫力水平，改善血流变学，在治疗慢性腰肌损伤手法的选择有较高的临床应用價值。

关键词：慢性腰肌损伤;推拿疗法;免疫功能

中图分类号：R244.1   文献标志码：B   文章编号：1007-2349（2021）07-0076-04

Research on Professor Xia Huiming's Flat Push Method on Intervention of theRabbit Model of Chronic Lumbar Muscle Injury

YANG Li-qiu， XIA Hui-ming， LONG Xin， WANG Ang， YUE Yang， YANG Yu， YANG Yang， YANG Yong-lan

（Yunnan Hospital of Traditional Chinese Medicine， Kunming 650021， China）

【Abstract】Objective： To make sure that the softness and penetration were important factors of the method after Professor Xia Huiming's flat push method was used to treat the rabbit animal model of chronic lumbar muscle injury and to lay a foundation for the clinical application of Professor Xia's dialectical academic experience of the method. Methods： 70 Japanese white rabbits were randomly divided into non-manipulation control group， long-acting time manipulation group， short-acting time manipulation group， fast frequency manipulation group， slow frequency manipulation group， pressure group and no pressure group， 10 rabbits each group. The artificially fixed rabbits and mulberry sticks were used to hit the waist muscles to create a model. After periodic treatment and comparison， the immune function and hemorheology in the rabbit serum were measured. The rats were sacrificed to make the pathological sections of the psoas muscles and the muscle tissues changes were observed under the microscope and then the statistical analysis was made. Results： The flat push method with pressure and long acting time can raise the immunity level of chronic psoas muscle injury （P<0.05）. There is no significant difference in the other flat push groups （P>0.05）. Conclusion： Professor Xia Huiming's flat push method can raise the immunity level of chronic psoas muscle injury and improve blood rheology and has higher clinical application value in the choice of treatment for chronic psoas muscle injury.

【Key words】Chronic Psoas Muscle Injury; Massage Therapy; Immune Function

慢性腰肌损伤是临床见疾病，是由于经常的反复的积累性轻微损伤（劳损）可引起肌肉附着点、骨膜、韧带等组织的充血，水肿渗液纤维组织增生和粘连等病理改变刺激和压迫神经末稍导致腰部的慢性疾病。在临床中证实，推拿治疗慢性腰肌损伤疗效明确有效，它是作为首选的治疗方案。本研究慢性腰肌损伤的兔动物模型，改良软组织损伤兔模型（参照kami，周忠群等机械冲击挫伤的造模方法用重锤整体打击重量为2.9 kg，重复击打目标骨骼肌，造成目标肌急性钝挫伤）[1-2]以桑枝击打腰部肌肉造模慢性腰肌损伤模型兔，经过周期治疗后，以IgA、IgM、IgE、C反应蛋白、腰肌病理切片为检测指标，明确夏教授辨证运用平推法作用于慢性腰肌损伤的兔动物模型后，柔和及渗透是手法的重要因素，从分子水平探讨平推法治疗慢性腰肌损伤的作用机理。

1 材料与方法

1.1 动物 健康成年白兔70只，体重（2.2±0.3）kg，雌雄不限，重量分布均一（由动物云南中医学院实验动物中心提供），动物实验饲养环境：室温，自然光照，自由饮水，喂养标准饲料料（云南中医药大学实验动物中心提供）。

1.2 实验试剂 4%多聚甲醛固定液;伊红染色液;中性树胶检测试剂盒（索莱宝公司，生产编号：P1110，G1105，G8590）。柠檬酸盐缓冲液（中杉金桥，生产编号：ZLI-9065）。IgA、IgM、IgE、C反应蛋白ELISA试剂盒（江苏酶标生物科技有限公司，生产编号：MB-3935B，MB-3939B，MB-3938B，MB-3837B）。

1.3 实验分组与造模 改良慢性腰肌损伤白兔模型，将实验动物分为7组，分别为不用手法对照组、作用时间长手法组、作用时间短手法组、频率快手法组、频率慢手法组、手下有压力组、手下无压力组每组10只兔。

1.4 造模方法 按照以上分组将白兔称重编号后，用3%的戊巴比妥钠1 ml/kg静脉注射麻醉。白兔俯卧位。背腰部剃毛，人工固定实验动物，将其脊柱置于平台上，桑枝击打腰部肌内。作用于脊柱两侧50次，开放环境下饲养，15 d后形成慢性牧组织损伤模型。标准见参考文献[2]进行造模并取材，病理切片：肉眼观组织无肿胀，有少量淤血消失和少量炎性渗出，病理学提示肌纤维断裂，存在纤维增生，证明肌肉组织有损伤，并且进入了慢性瘢痕增生修复期，说明造模成功。

1.5 实验方法 作用时间长手法组：平推法操作15 min;作用时间短手法组：平推法操作5 min;频率快手法组：操作频率300次/min，操作10 min;频率慢手法组：操作频率100次/min，操作10 min;手下有压力组：操作时压住皮下有凹陷用力推，操作10 min;手下无压力组：操作时手轻放皮上轻推，操作10 min。6组均为每天操作1次，手法维作周期10 d。对照组治疗方法：不做手法治疗，仅给饲料正常喂养。

1.6 取材和指标检测 血清采集：采空腹静脉血6 mL注入含EDTA二钠采血管中，4℃混匀，3000 r/min，离心10 min，分离血浆，分装于2～3个试管，-2℃保存，测定前将样本置于室温中复融，再次4C3000 r/ min，离心5 min，取上清测定。用 1 ∶125 单位抗凝。取肝素抗凝的全血 0.8 mL于全自动血液流变仪上测定全血黏度的高切、中切、低切值，红细胞压积。将剩余的全血离心（2500 rpm 离心 10 min，离心分离血清及血浆，-20℃保存备用），取 0.8mL 血浆于全自动血液流变仪上测定血浆黏度;ELISA检测IgA、IgM、IgE、C反应蛋白相关指标的蛋白表达情况，试剂盒按照说明书操作进行检测;病理制作取材：将各实验组白兔分别在治疗后 10 d采用空气栓塞法处死动物，无菌操作下解剖分离腰部肌肉组织，肉眼观察肌肉形态，生理盐水清洗后立即投入冷冻的固定液中，4 ℃固定12～24 h后;在0.2 mol磷酸缓冲液中充分漂洗，经常规的脱水、透明、浸蜡、包埋、连续切片、贴片、烤片后，HE染色石蜡切片，苏木精-伊红染色，显微镜下观察病理变化。

1.7 统计学方法 应用SPSS25.0统计学软件进行统计，计量资料用t检验，计数资料用卡方检验，实验结果中的数值表示以均数±标准差（x±s）表示，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 ELISA检测结果 见表1。

2.2 病理组织结果 经HE染色后，镜下可见正常组：可见肌纤维排列紧密、规律，肌纤维膜中肌细胞核相对均匀排列，肌膜较完整，无坏死、出血及炎细胞浸润。不用手法对照组：可见肌纤维大量断裂，间宽，萎缩，肌细胞形状、大小不规则，损伤部位出现新生肌纤维且直径小，炎细胞浸润，可见新生毛细血管。作用时间长手法组：可见肌纤维排列紊乱，断裂，间隙增宽，新生毛细血管，部分炎细胞浸润。作用时间短手法组：可见肌纤维部分断裂，排列不规则，少量纤维组织增生。频率快手法组：可见新生毛细血管、肌纤维，部分断裂及炎细胞。频率慢手法组：可见钙化及少量出血，肌纤维间隔增宽、断裂，肌纤维及毛细血管增生，炎细胞。手下有压力组：可见肌纤维断裂，排列不规则，炎细胞浸润。手下无压力组：可见肌纤维断裂，间隔增宽，出血及毛细血管新生，炎细胞浸润。见图1。

2.3 血流动力学指标检测结果 见表2。

3 讨论

慢性腰肌劳属于中医“痹症”“腰痛”“筋伤”等范畴。《素问·宣明五气篇》说：“久视伤血，久卧伤气，久坐伤肉，久立伤骨，久行伤筋，是谓五劳所伤。”说明劳逸失常，会导致肉筋骨的损伤。腰部经常的反复的积累性轻微损伤（劳损），使腰部肉筋骨损伤，日久形成慢性腰肌劳损。《医宗金鉴·正骨心法要旨》中说：“因跌扑闪失……气血郁滞，为肿为痛，宜用按摩法。按其经络，以通郁闭之气，摩其壅聚，以散瘀结之肿，其患可愈。”说明推拿具有舒经通络，散瘀止痛，可治疗慢性腰肌劳损。

手法基本要求有五点，持久、有力、均匀、柔和，以达到深透的目的，夏教授特别强调手法的柔和性，柔和、深透是推拿手法治病的关键。夏教授认为柔和是指轻巧之力，并不是指力量弱，通过均匀有节律之操作，将手法技巧与力量完美结合，体现“轻而不浮，重而不滞”的道理，最终达到深透的目的，“柔中带刚，刚柔相济”直达病所。夏老师的平推法很讲究，操作者腕关节，肘关节，肩关节都应该放松，用身体腰部发力，并不是操作者于患者体表直接施于压力，压力不等同于渗透力，如果故意增加压力，关节就都不会放松，作用力集中于表皮，那么渗透力就很小了。在《素问·调经论》中说：“血气者，喜温而恶寒，寒则泣而不能流，温则消而去之。”夏老师认为平推法的热量渗透，顺应血气的特性，能使气血复归于平衡从而达到治病目的。平推法是夏教授的特色手法，體现了夏教授手法的学术思想。平推法关键在于热量的渗透，而渗透与否，主要在于施术者腕关节及上臂的放松操作[3]。

在本研究中手法治疗后，发现作用时间长对C-反应蛋白明显变化，病理切片提示有新生毛细血管，促进肌肉修复，有压力治疗组对IgA及C-反应蛋白有明显变化，无压力更有助于肌肉修复，说明柔和深透是平推法产生疗效的重要因素;而频率的快慢在治疗中对免疫功能无明显差异;手法治疗均对血流变都有明显改善，作用时间长短无明显区别;频率快可更快改变血流变学。进一步说明夏教授的平推法对慢性腰肌劳损有治疗作用，为临床推广运用夏惠明教授平推法提供了客观的依据。

参考文献：

[1]Kami K，Masuhara M，Kashiba H，et a1.Changes of vinculin and extracellular matrix components following blunt trauma to rat skeletal muscle[J].Med Sci Spots Exerc，1993，25（4）：832-840.

[2]周忠群，卢振和，高崇荣.射频热凝治疗兔慢性软组织损伤的实验研究[J].中国疼痛医学杂志.2008，14（5）：298-301.

[3]杨丽秋.夏惠明老师关于腰椎侧弯调整三步法的经验总结[J].云南中医中药杂志.2013，9（34）：7-8.

（收稿日期：2021-03-20）

基金项目：云南省内设厅级项目（2017NS147）

第一作者简介：杨丽秋（1976-），女，副主任医师，研究方向：中医推拿。