辣椒素对小鼠免疫功能的影响
2016-06-25欧阳日威张琪曾慧黄祺刘思思杨将
欧阳日威+张琪+曾慧+黄祺+刘思思+杨将
摘 要 辣椒素具有多种药理生理学活性,对某些含有 P-物质的感觉神经系统、 心血管、体温调节、胃肠机能有显著影响;具有消炎止痛止痒、促进脂肪代谢及保护胃肠等作用。本实验主要研究 辣椒素对小鼠免疫功能的影响。
关键词 辣椒素 小鼠 免疫功能
中图分类号:Q954.4 文献标识码:A
生活在潮湿阴冷、四季变化明显地区的居民有特定的饮食习惯来增强自身免疫,达到御寒防潮目的。而在这些地区,人们普遍都存在吃辣椒的习惯,因此猜想这是否与他们长期食用辣椒存在关联。而辣椒素是辣椒中的主要成分,因此通过研究辣椒素对小鼠免疫功能的作用,是否有增强小鼠免疫力的功效,具有一定的研究价值,实验报告如下:
1 材料与方法
1.1辣椒素
每粒500mg,纯度为98%,由北京某公司提供,推荐成人抗炎日用量为20mg/kg,试验时将受试物配制成不同浓度。
1.2实验动物
清洁级昆明种小鼠120只,体重 21-25g,6-12周龄。
1.3主要仪器和试剂
全自动酶标仪(瑞士Tecan公司);倒置显微镜(日本 Olympus公司);细胞计数仪(德国Scharfe system公司);RPMll640 培养液(美国Gibco公司)。
1.4剂量选择
根据受试物推荐用量进行剂量设计,分别以每天推荐用量的1、10和30倍作为低剂量(20mg/kg体重)、中剂量(200 mg/kg体重)和高剂量(600 mg/kg体重),同时设阴性对照组。
1.5实验方法及指标测定
按照卫生部《保健食品检验与技术评价规范》(2003年[3中规定的方法。小鼠(昆明种,体重:20-25g,6-12周龄),将120只小鼠随机分为 4 组,分别为3组低剂量、中剂量、高剂量阳性实验组,和1组生理盐水阴性对照组(生理盐水0.2ml/只)。1 次/天,连续30天后,做以下小鼠免疫功能指标检测。
(1)脾脏指数和胸腺指数的测定:
脾脏指数=脾脏重量(mg)/体重(g)
胸腺指数=胸腺重量(mg)/体重(g)
(2)细胞免疫,淋巴细胞增殖能力的测定:
将小鼠处死,将脾脏取出,制成脾脏单细胞悬液,调整细胞浓度为3€?06 ml-1 ,将脾脏单细胞悬液加入96孔培养板,用MMT方法检测增殖指数。
(3)体液免疫,血清溶血素(HC50)的测定:
取小鼠血液30 ml,将血液室温静置30min,2000rpm/min 离心 10min,吸取血清分装,-20℃保存。血清经处理,利用分光光度计在540nm波长测出样品的吸光度值和绵羊红细胞半数溶血时的吸光度值。血清溶血素含量以半数溶血值HC50表示,样品管中半数溶血值HC50按下式计算:每只小鼠的血清HC50=(样品的吸光度值/绵羊红细胞半数溶血时的吸光度值)€紫∈捅妒?
1.6统计学方法
应用 SPSS 13.0 软件对数据进行单因素方差分析,数据以x€眘 的形式表示。
2 结果
(1)辣椒素对小鼠脏体比值影响 各剂量组小鼠脾/体及胸腺/体比值与阴性对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05,表1)。
(2)辣椒素对小鼠细胞免疫功能的影响中、高剂量组小鼠足跖肿胀度值与阴性对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05),提示辣椒素具有增强小鼠迟发性变态反应的功能。中、高剂量组小鼠脾淋巴细胞增殖能力与阴性对照组比较,差异亦有统计学意义(P<0.01或P<0.05,表2)。
(3)辣椒素对小鼠体液免疫功能的影响高剂量组小鼠溶血空斑数明显高于阴性对照组,经统计学分析,差异具有统计学意义(P<0.01),提示辣椒素具有增高小鼠抗体形成细胞数的作用。各剂量组小鼠血清半数溶血值(HC50)(下转第171页)(上接第168页)与阴性对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05,表3)。
3结论
在之前的研究表明,TRPV1参与介导炎症条件下伤害性热刺激引起的痛觉过敏。文献表明,辣椒素治疗可使SP的免疫反应纤维减少,通过降低感觉神经敏感性,缓解并消除变应性鼻炎的炎症反应,从而达到治疗效果。Tohda等研究表明,急性外周炎可减少背根神经节中TRPV1的mRNA水平,增加TRPV1mRNA经轴突向周围和中枢末梢的转运。急性炎症引起TRPV1在神经末梢的表达上调,至少是由TRPV1mRNA的轴浆运输增加实现的。在急性炎症中,背根神经节的中枢端对辣椒素的敏感性增加。从而认为TRPV1可能参与了初级传入神经对辣椒素的高敏性并调节炎性痛觉。
该试验则是拟通过细胞免疫功能和体液免疫功能观察其对小鼠免疫功能的影响,试验结果显示,辣椒素可显著提高小鼠足跖肿胀度值、脾淋巴细胞增殖能力及脾脏抗体生成数,在小鼠细胞免疫试验结果呈阳性,表明辣椒素具有促进小鼠免疫功能的作用。
研究结果表明,辣椒素可明显提高机体免疫力,为相关制剂的进一步研究开发提供有效的实验依据。另外,研究结果还显示,高剂量组在增加足跖肿胀度值和脾淋巴细胞增殖能力均不如中剂量组,推测其原因可能与作用浓度过高反而抑制了机体的吸收有关,其具体作用机制有待于进一步研究。
参考文献
[1] 张军.辣椒素的药理与临床研究进展[J].国外医学中医中药分册,1996,18(2):8-11
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