血清UCP2、TSLP在老年肺炎脓毒症患者中的表达及其预后评估价值*

范志强，佟庆

（秦皇岛市第一医院内科ICU，河北秦皇岛066000）

脓毒症是指感染诱发的机体调节失衡，导致危及生命的器官功能障碍，临床发病率、病死率居高不下，不及时干预可能发展为重度脓毒症、脓毒症休克等。肺炎是诱发脓毒症的重要病因，肺炎合并脓毒症是临床常见疾病，多发于老年人群，是诱发老年患者死亡的危险因素之一，早期诊断并给予有效干预对提高患者预后具有重要意义[1]。UCP2 是线粒体解偶联蛋白家族的一员，是一种内源性抗氧化蛋白，在心、肺、脑等器官和组织中广泛分布，可减少线粒体ATP 合成，同时抑制活性氧物质生成，参与多种疾病的发生、发展。近几年研究显示，UCP2 可作为严重脓毒症的临床特异性标志物[2-3]。TSLP 是一类白细胞介素-7 样细胞因子，在上皮细胞、胸腺基质细胞、血管平滑肌细胞中均有表达，可刺激树突状细胞、巨噬细胞、骨髓细胞等炎症细胞产生前炎细胞因子，从而引起全身炎症反应失调，因此在多种炎症性疾病中发挥重要作用[4]。有研究发现，抑制TSLP 表达能改善脓毒症患者的急性炎症反应，从而进一步减少多器官继发性衰竭[5]。本研究旨在探讨血清UCP2、TSLP 在老年肺炎脓毒症中的表达及其预后评估价值，以期为老年肺炎脓毒症患者早期诊断及预后提供参考依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2017年7月—2019年7月秦皇岛市第一医院收治的肺炎合并脓毒症患者103 例为肺炎脓毒症组，年龄61～92 岁；另取同期本院收治的单纯肺炎患者100 例为单纯肺炎组，年龄60～93 岁。肺炎诊断标准参考2006年中华医学会呼吸病学分会制定的《社区获得性肺炎的诊断和治疗指南》[6]，脓毒症诊断标准参考2016年美国重症医学会与欧洲重症医学会发布的脓毒症3.0 定义及诊断标准：脓毒症相关的序贯器官衰竭评分急性改变≥2 分[7]。记录肺炎脓毒症组28 d 生存状态，将其分为生存组（76 例）和死亡组（27 例）。本研究经医院医学伦理委员会批准，患者及家属均同意并签署知情同意书。

1.2 纳入与排除标准

1.2.1 纳入标准①年龄≥60 岁；②临床资料完整者。

1.2.2 排除标准①纳入前有抗生素、糖皮质激素等使用史者；②合并肺结核、肺间质性疾病等其他肺部疾病者；③合并自身免疫系统疾病者；④合并心、肝、肾等脏器严重功能不全者；⑤开胸手术者。

1.3 方法

1.3.1 血清UCP2、TSLP 水平检测入院次日采集患者5 ml 空腹静脉血，室温凝固15 min，3 000 r/min离心20 min，收集血清并置入-80℃冰箱冷冻保存。采用酶联免疫吸附试验检测血清UCP2、TSLP 水平，试剂盒购自上海酶研生物科技有限公司，货号分别为EK-H11808 和M-00046，严格按照试剂盒说明书进行操作，依据平均数将UCP2、TSLP 分为高、低水平。

1.3.2 急性生理学和慢性健康状况评估Ⅱ（acute physiology and chronic health evaluation Ⅱ,APACHEⅡ）评分采用APACHE Ⅱ评分系统评估患者病情严重程度。APACHE Ⅱ评分系统包括3 个部分：急性生理参数、慢性健康状况、年龄，满分71 分，分值越高，对应病情越严重。

1.4 统计学方法

数据分析采用SPSS 17.0 统计软件。计量资料以均数±标准差（±s）表示，比较用t检验；计数资料以构成比表示，比较用χ2检验；相关性分析用Pearson 法； 绘制受试者工作特征（receiver operating characteristic,ROC）曲线；影响因素的分析用单因素和多因素Cox 回归模型。P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 单纯肺炎组、肺炎脓毒症组患者一般资料比较

单纯肺炎组、肺炎脓毒症组患者性别、年龄、体重指数（body mass index,BMI）比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。两组APACHE Ⅱ评分比较，经t检验，差异有统计学意义（P＜0.05），肺炎脓毒症组APACHE Ⅱ评分较高。见表1。

表1 两组患者一般资料比较

2.2 单纯肺炎组、肺炎脓毒症组患者血清UCP2、TSLP水平比较

肺炎脓毒症组与单纯肺炎组血清UCP2、TSLP水平比较，经t检验，差异有统计学意义（P＜0.05），肺炎脓毒症组血清UCP2、TSLP 水平较高。见表2。

表2 两组血清UCP2、TSLP水平比较 （±s）

表2 两组血清UCP2、TSLP水平比较 （±s）

组别单纯肺炎组肺炎脓毒症组t 值P 值n 100 103 UCP2/（ng/ml）346.81±73.62 463.59±87.41 10.281 0.000 TSLP/（pg/ml）207.19±34.01 283.38±35.24 15.667 0.000

2.3 肺炎脓毒症患者血清UCP2、TSLP 水平与APACHE Ⅱ评分的相关性

Pearson 相关性分析结果显示，肺炎脓毒症患者血清UCP2、TSLP 水平与APACHE Ⅱ评分呈正相关（r=0.618 和0.681，均P=0.000）。见图1、2。

图1 肺炎脓毒症患者血清UCP2水平与APACHE Ⅱ评分的相关性分析散点图

图2 肺炎脓毒症组患者血清TSLP水平与APACHE Ⅱ评分的相关性分析散点图

2.4 血清UCP2、TSLP对肺炎脓毒症的诊断价值

ROC 曲线结果显示，血清UCP2、TSLP 诊断肺炎脓毒症的曲线下面积（area under the curve,AUC）分别为0.861（95% CI：0.809，0.912）和0.846（95% CI：0.792，0.901），截断值分别为399.47 ng/ml和249.11 pg/ml，此时对应的敏感性分别为71.8%（95% CI：64.20，82.00）和77.7%（95% CI：81.7，94.5），特异性分别为91.0%（95%CI：75.30，90.60）和81.0%（95% CI：78.8，92.9）；血清UCP2、TSLP 联合诊断肺炎脓毒症的AUC 为0.914（95% CI：0.873，0.954），此时对应的敏感性为84.5%（95% CI：82.9，95.2），特异性为88.0%（95% CI：84.8，96.5）。见图3。

图3 血清UCP2、TSLP诊断肺炎脓毒症的ROC曲线

2.5 血清UCP2、TSLP 水平与肺炎脓毒症患者预后的关系

死亡组与生存组患者血清UCP2、TSLP 水平比较，经t检验，差异有统计学意义（P＜0.05），死亡组高于生存组。见表3。

表3 死亡组与生存组患者血清UCP2、TSLP水平比较（±s）

表3 死亡组与生存组患者血清UCP2、TSLP水平比较（±s）

组别n UCP2/（ng/ml）TSLP/（pg/ml）生存组死亡组t 值P 值76 27 438.57±67.02 534.02±61.19 6.498 0.000 256.99±29.51 357.66±37.28 14.178 0.000

2.6 影响肺炎脓毒症患者预后生存状况的危险因素

以肺炎脓毒症患者预后生存状况作为因变量，以性别、年龄、BMI、APACHE Ⅱ评分、UCP2、TSLP 为自变量，进行单因素Cox 回归分析。将男性、年龄＜70 岁、BMI＜24 kg/m2、APACHEⅡ评分＜17 分、UCP2 低水平、TSLP 低水平均赋值为0，将女性、年龄≥70 岁、BMI≥24 kg/m2、APACHE Ⅱ评分≥17 分、UCP2 高水平、TSLP 高水平均赋值为1。单因素Cox 回归分析结果显示，年龄、APACHE Ⅱ评分、UCP2、TSLP 是影响肺炎脓毒症患者预后生存状况的危险因素（P＜0.05）。见表4。

表4 影响肺炎脓毒症患者预后生存状况的单因素Cox回归分析参数

以肺炎脓毒症患者预后生存状况作为因变量，以年龄、APACHE Ⅱ评分、UCP2、TSLP 为自变量进行逐步回归分析，引入水准为0.05，排除水准为0.10。多因素Cox 回归分析结果显示，年龄≥70 岁、APACHE Ⅱ评分≥17 分、UCP2高水平、TSLP 高水平是影响肺炎脓毒症患者预后生存状况的独立危险因素（P＜0.05）。见表5。

表5 影响肺炎脓毒症患者预后生存状况的多因素Cox回归分析参数

3 讨论

脓毒症是一种全身性炎症反应综合征，起病急，病情变化快，是导致急危重病患者死亡的主要原因之一，近年来发病率呈上升趋势。老年患者免疫力低，更易发生不良预后，早期诊断脓毒症有利于及时进行临床干预，可提高患者预后生存率。

线粒体是真核细胞重要的能量供应细胞器，可生成能量并产生大量氧自由基，氧自由基蓄积可导致线粒体凋亡蛋白活化、细胞色素C 释放增加，最终引起急性损伤，损伤又进一步促进氧自由基的生成，加重损伤，形成恶性循环。UCP2编码基因定位于人11 号染色体，在物种间呈高度保守性。UCP2 是一种质子转运蛋白，定位于线粒体内膜上，UCP2 被激活时，可产生质子渗漏，使线粒体膜电位降低，进而使氧化磷酸化过程解偶联，减少ATP 合成，最终导致能量以热能形式释放，同时降低活性氧的生成，起着维持线粒体稳定性及功能的作用[8]。有研究发现，慢性肾衰竭大鼠肾脏组织中UCP2 高表达，其水平升高可能是对肾脏氧化应激状态的一种代偿机制，起到减弱氧化应激反应，从而减缓慢性肾衰竭病情演变的作用[9-10]。UCP2 与脓毒症的关系引起研究者的关注，有研究发现UCP2 过表达可逆转或减轻脓毒症所致大鼠心肌细胞线粒体形态及功能产生的损害，改善脓毒症大鼠心肌收缩功能[3，11]。本研究发现，与单纯肺炎组相比，肺炎脓毒症组APACHE Ⅱ评分、血清UCP2 水平较高，且其水平与APACHE Ⅱ评分呈正相关，提示UCP2 或可用于评估肺炎脓毒症患者病情严重程度。分析其原因为UCP2 通过解偶联作用调控线粒体膜电位，影响活性氧及ATP 的合成，从而参与肺炎脓毒症的病理演变进程。ROC 曲线结果显示，血清UCP2 诊断肺炎脓毒症AUC 为0.861，截断值为399.47 ng/ml，对应的敏感性为71.8%，特异性为91.0%，对肺炎脓毒症有一定诊断价值。UCP2 与肺炎脓毒症患者预后相关，本研究结果显示，与生存组比较，死亡组血清UCP2 水平较高，UCP2 高水平是影响肺炎脓毒症患者预后生存状况的独立危险因素，提示UCP2 或可用于评估患者预后生存状况。

TSLP 是白细胞介素-2 家族成员之一，可促进未成熟B 细胞的增殖及发育，在诱导Th2 型细胞分化中起到极其重要的作用[12]。TSLP 参与多种炎症性疾病的发生及演变。有研究发现，哮喘患者血清TSLP 表达较高，且与病情严重程度成正相关，TSLP可能通过促进Th2 型细胞因子的产生，从而增强Th2 型免疫应答，参与哮喘的发生、发展[13-14]。另有研究发现，TSLP 可能通过介导慢性炎症反应，参与稳定性心绞痛的发生及演变过程[4]。有报道称，TSLP 与脓毒症患者预后呈负相关，是患者预后不良的独立危险因素[15]。本研究发现，与单纯肺炎组比较，肺炎脓毒症组血清TSLP 水平较高，且与APACHE Ⅱ评分呈正相关，TSLP 可能参与肺炎脓毒症的病情演变。ROC 曲线结果显示，血清TSLP 诊断肺炎脓毒症的AUC 为0.846，截断值为249.11 pg/ml，此时对应的敏感性为77.7%，特异性为81.0%；UCP2联合TSLP 诊断肺炎脓毒症的AUC 为0.914，对应的敏感性为84.5%，特异性为88.0%，联合检测具有较好的诊断价值。进一步研究显示，与生存组比较，死亡组血清TSLP 水平较高，提示TSLP 与患者预后有关。Cox回归分析结果显示，年龄≥70岁、APACHE Ⅱ评分≥17 分、UCP2 高水平、TSLP 高水平是影响肺炎脓毒症患者预后生存状况的独立危险因素，提示临床对合并预后危险因素的患者应重点监测病情，并及时进行干预，或可降低患者病死率。

综上所述，肺炎脓毒症患者血清UCP2、TSLP水平较高，其与患者病情严重程度相关，并对肺炎脓毒症有一定诊断价值，是影响患者预后的独立危险因素，可能成为肺炎脓毒症的早期诊断及预后评估指标。本研究也存在一定不足之处，仅分析了肺炎脓毒症患者血清UCP2、TSLP 表达水平，未进行动态监测，另外未对其具体作用机制进行深入分析，今后将以此作为工作重点展开研究。