BS-100冰点渗透压测定仪的性能验证

周杰，冼炜瑩

(深圳大学总医院，广东 深圳 518055)

0 引言

尿渗透压是评价肾脏浓缩稀释功能的常见指标，在肾脏疾病的诊断和鉴别诊断中具有重要作用。溶液的渗透压与溶液的冰点下降值成比例关系，BS-100冰点渗透压测定仪是通过测量溶液的冰点来计算溶液的渗透压，用来测定各种溶液渗透压的仪器。既往研究中多是讨论渗透压与肾脏疾病关系[1]，但是渗透压测定仪性能验证的讨论还罕见报道，本研究旨在对BS-100冰点渗透压仪的性能问题进行探讨，验证其精密度、正确度、参考范围是否能满足临床在尿渗透压方面的需求。

1 材料与方法

1.1 仪器

BS-100冰点渗透压测定仪。

1.2 试剂

1.2.1 校准品

BS-100冰点渗透压测定仪低值定标品300mOsm/L(批号202050801)、高值定标品900mOsm/L(批号2020050802)。

1.2.2 质控品

BS-100冰点渗透压测定仪提供的两水平质控品，批号分别为46377、46388。

1.3 验证实验方法

1.3.1 精密度验证

依据国家卫生和计划生育委员会发布的卫生行业标准WS/T492-2016文件《临床检验定量测定项目精密度与正确度性能验证》[2]进行精密度验证。选择两个不同浓度的质控品，连续测定五天，每天一个分析批，每批两个浓度水平，每一个浓度水平同一样品重复测定三次。如果因为质量控制程序或操作问题判断一批为失控，应剔除数据，并增加执行一个分析批。根据上述检测结果进行统计分析，分别计算总均值、批内标准差、批间方差、批间标准差、批间变异系数(CV)，并与厂家声明的允许误差进行比较。

1.3.2 正确度验证

依据WS/T 492-2016文件《临床检验定量测定项目精密度与正确度性能验证》[2]进行正确度验证。选择两个浓度水平的定标品，连续测定五天，每天一个分析批，每批两个浓度水平，每一个浓度水平同一样品重复测定两次。计算均值、标准差以及置信区间，验证靶值是否在置信区间。

1.3.3 参考区间验证

依据WS/T402-2012文件《临床实验室检验项目参考区间的制定》[3]进行参考区间小样本验证，筛选参考个体20人，采样并测定，测定值剔除离群值后若不满20例需补足。将这20个测定值与需验证的参考区间比较，若落在参考限外的测定值不超过两个，则该参考区间可直接使用。若超过2个以上测定值超出，则需重新筛选20人，重复上述操作，若还是不能通过，则实验室应重新检查所用的分析程序，考虑是否有人群差异，考虑是否需要自己建立参考区间。根据《全国临床检验操作规程》第4版[4]，正常人禁饮12小时后尿渗透压的参考区间大于800mOsm/(kg·H2O)[4]，本次参考个体留样要求也是严格遵循禁饮12小时后留取尿液样本后检测。

2 结果

2.1 精密度验证结果

根据表1，低浓度水平、高浓度水平质控品的批内CV分别为0.34%和0.12%，批间CV分别为0.16%和0.09%。CLIA'88允许误差为20%，批内CV均小于CLIA'88的1/4允许误差；批间CV均小于CLIA'88的1/3允许误差。同时与厂家声明的浓度≤300mOsm/(kg·H2O)时，基本允许误差是±4 mOsm/(kg·H2O)；浓度＞300mOsm/(kg·H2O)时，基本允许误差是该浓度的±1%，重复误差CV≤1.5%相符合。

表1 精密度验证的原始数据计算结果

2.2 正确度验证结果

根据表2，低浓度校准品共检测5批次，均值为301.16mOsm/(kg·H2O)，标准差为1.49，上置信限为302.69mOsm/(kg·H2O)，下置信限为299.63mOsm/(kg·H2O)。该校准品靶值为300mOsm/(kg·H2O)，95%置信区间包括靶值。

表2 低浓度校准品正确度验证原始数据

根据表3，高浓度该校准品共检测5批次，均值为900.09mOsm/(kg·H2O)，标准差为2.43，上置信限为902.59mOsm/(kg·H2O)，下置信限为897.59mOsm/(kg·H2O)。该校准品靶值为900mOsm/(kg·H2O)，95%置信区间包括靶值。

表3 高浓度校准品正确度验证原始数据

2.3 参考区间验证结果

根据20份参考个体的结果，验证参考范围为9012.51-1287.9mOsm/(kg·H2O)。现行禁饮12小时后尿的参考范围为＞800mOsm/(kg·H2O)，20例参考个体的结果均在现行参考区间内，因此可判定现行参考范围有效。

3 讨论

渗透压指的是溶质分子通过半透膜的一种吸水力量，其大小而与溶质的分子量、半径等特性无关，由溶质颗粒数目的多少来决定。近年来尿渗透压的临床应用越来越广泛，对多种疾病的诊断治疗和预后具有重要的意义。尿渗透压又称尿渗透量、尿渗量，是指肾脏排泄尿内全部溶质的微粒总数量，如电解质、尿素、糖类、蛋白质等。尿渗透压浓度反映肾脏对溶质和水相对排泄速度，不受溶质颗粒大小和性质的影响，只与溶质微粒的数量有关。正常人尿液渗透 压 约 为600～1000mOsm/(kg·H2O)，最 大 范 围 为40～1400 mOsm/(kg·H2O)，正常人禁饮12小时后尿渗透压的参考范围大于800mOsm/(kg·H2O)[4]。肾脏是通过对尿液浓缩或稀释作用来达到调节体液渗透量的平衡，测定禁饮12小时后尿渗透压能更确切地反映肾脏的浓缩和稀释功能。目前常用的尿渗透压测定的方法为冰点下降法，溶液的冰点下降值与溶质渗透压的摩尔浓度成比例关系，仪器可通过测定溶液的冰点下降值来计算溶液的渗透压。

为提高医学实验室质量和能力，中国合格评定国家认可委员会在CNAS-CL2012《医学实验室质量和能力认可准则》[5]中要求申请认可的实验室，要对检验的设备检验方法等的主要分析性能进行验证，以保证其达到临床的要求。在临床工作中一台良好性能的冰点渗透压测定仪是正确检测溶液渗透压的重要保障，也是确保渗透压的分析质量的重要前提。本次性能验证中只做了最基本的精密度、正确度和参考范围三大内容。

关于精密度方面，本次验证过程体现出该仪器优良的精密度，两个浓度质控品的批内CV能做到0.34%和0.12%，结果的重复性和再现性非常好。关于正确度方面，常用的方法有两种，一是分析具有定值的参考物质，二是使用患者样品来验证，但是方式二要求有试验方法和比较方法，受限于参考方法的可获得性，所以本次方案采取了方式一用厂家提供的定标品来做验证，试验结果也非常理想，经过计算95%的置信区间均包括两个水平校准品的靶值浓度。

关于参考范围方面，其涉及到临床的诊疗方案显得格外重要。由于厂家没有提供相关参考范围的数据，且渗透压会受到饮食饮水的影响，我们实验室经过多次与临床科室的沟通，确立以《全国临床检验操作规程》第4版[4]中提供的资料为标准，确立我们实验室的检测方案为只测定尿标本，以禁饮12小时后留尿检测的渗透压＞800mOsm/(kg·H2O)作为参考范围。在本次参考范围验证中，20例参考个体的结果均在现行参考范围内，可判定现行参考范围有效。

综上所述，本研究经过对BS-100冰点渗透压测定仪的验证发现，该仪器的精密度好，正确度高，参考范围有效，可以判定BS-100冰点渗透压仪该仪器能基本满足临床检验的要求。但本研究也存在一些不足的地方，性能验证的指标还不够全面，只是做了最基本的精确度、正确度和参考范围的验证，需要后续进一步的补充研究。