湿疹病情与患者血清Th1/Th2细胞因子的关系研究

王修勇 常 远 高 明 张 帆

郑州大学附属洛阳中心医院，河南省洛阳市 471000

湿疹是皮肤科常见的皮肤疾病之一，主要表现为强烈的皮肤瘙痒，其在老年人群中有较高的发病率。患者往往由于皮肤瘙痒反复搔抓而引起皮肤组织损伤，增加了细菌感染和各种并发症的发生风险。湿疹的病因复杂，目前还存在较大分歧。研究表明，辅助型T细胞1(Th1)/Th2失衡是导致皮肤出现湿疹类炎症反应的重要机制[1]，但目前有关Th1/Th2细胞因子分泌障碍与湿疹间的关系的报道较少。本文对86例湿疹患者进行Th1/Th2细胞因子水平进行检测，分析不同病情状态下Th1/Th2细胞因子水平的差异，以探讨湿疹病情与Th1/Th2细胞因子的关系。

1 资料和方法

1.1 一般资料 收集2016年12月—2018年12月在我院皮肤科门诊就诊的湿疹患者86例，纳入病例组，其中男44例，女42例；年龄34～82(42.7±5.8)岁，病程3～60(45.1±16.2)个月；急性期45例，慢性期41例；泛发性湿疹35例，局限性湿疹51例。选择标准：(1)符合《皮肤性病学》中的诊断标准[2]；(2)入组前4周内未曾用抗生素、糖皮质激素治疗者；(3)签署知情同意书者。排除标准：(1)合并感染患者；(2)合并风湿、类风湿性疾病的患者；(3)入组前4周内曾用抗生素、糖皮质激素治疗者。另外收集同期在我院门诊进行体格检查的志愿者50例作为对照组，其中男24例，女26例；年龄32～84(43.2±6.0)岁。两组性别、年龄对比差异无显著性(P>0.05)，符合科研的随机对照性原则。本研究经伦理委员会批准。

1.2 方法

1.2.1 样本采集：采集待测者晨起空腹肘部静脉血5ml，装入含肝素的抗凝管中，用即用型淋巴细胞分离液分离淋巴细胞，将获得的淋巴细胞清洗后，加入含胎牛血清的RPMI-1640液，使细胞密度调整为1×109/L，再加0.05g/L的刀豆球蛋白A诱导，置于75%CO2、37℃、饱和湿度的培养箱中孵育48h，取出细胞在离心机上以3 200r/min离心5min,分离上层清液置于-70℃低温冰箱中保存待用。

1.2.2 Th1/Th2细胞因子的检测：采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、肿瘤坏死因子-ɑ(TNF-α)及γ干扰素(IFN-γ)表达水平，IL-2、IL-4、IL-5、IL-6试剂盒均由上海博谷生物科技有限公司提供，TNF-α、IFN-γ试剂盒由上海康朗生物科技有限公司提供，操作均严格按试剂盒说明书进行。

1.3 观察指标 观察比较两组IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、TNF-α、IFN-γ水平。

2 结果

2.1 两组血清IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、TNF-α、IFN-γ含量对比 与对照组相比，病例组血清IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、TNF-α、IFN-γ含量均明显升高(P<0.05)，见表1。

表1 两组血清IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、TNF-α、IFN-γ含量对比

2.2 急性期与慢性期患者血清IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、TNF-α、IFN-γ含量对比 与慢性期患者相比，急性期患者血清IL-2、IL-4、IL-5、IFN-γ含量均明显升高(P<0.05)，急性期患者的IL-6、TNF-α含量与慢性期患者相近(P>0.05)，见表2。

表2 急性期与慢性期患者血清IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、TNF-α、IFN-γ含量对比

2.3 泛发性与局限性湿疹患者血清IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、TNF-α、IFN-γ含量对比 泛发性患者的血清IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、TNF-α、IFN-γ含量与局限性湿疹相近(P>0.05)，见表3。

表3 泛发性与局限性湿疹患者血清IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、TNF-α、IFN-γ含量对比

3 讨论

湿疹是临床常见的一种接触性皮肤过敏疾病，其发病可能是致敏性因素引起机体Th1/Th2功能失衡，导致相应的细胞因子分泌障碍所致。Th1细胞主要分泌IL-2、TNF-α、IFN-γ并形成细胞免疫系统；Th2细胞主要分泌IL-4、IL-5、IL-6而形成体液免疫系统[3]。本文中，病例组血清IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、TNF-α、IFN-γ含量较正常人群明显升高(P<0.05)，提示湿疹患者存在Th1/Th2细胞亚群活性升高及相关细胞因子过量分泌情况，这些细胞因子在皮肤炎症反应和损伤修复中发挥关键性作用。TNF-α、IFN-γ可上调表皮中的郎格罕细胞及角朊细胞的HLA-DR和黏附因子的表达[4]，使细胞免疫反应和体液反应的强度增加，进而调控T细胞的分化，使Th1向Th2偏移，导致Th2细胞分泌IL-4、IL-5、IL-6的量增多，而这些细胞因子会促进 Th1细胞成熟，促使Th1细胞分泌IL-2、TNF-α、IFN-γ[5]。本文中，急性期患者的IL-2、IL-4、IL-5、IFN-γ含量较慢性期患者明显升高(P<0.05)，提示湿疹急性期患者机体的细胞免疫和体液免疫均处于强烈的应激反应状态，致使Th1、Th2细胞分泌大量细胞因子来应对皮肤炎性反应，而慢性湿疹患者因病情缓和，从而使免疫应激反应较轻，致使相应的细胞因子分泌量相对较少，这也说明Th1/Th2失衡程度和细胞因子表达会随着湿疹病情加重而加剧。但本文发现，急性期患者IL-6、TNF-α含量与慢性期患者比较并无统计学差异(P>0.05)，提示湿疹引起的免疫反应激活的机制较为复杂，IL-6、TNF-α在诱导Th1细胞成熟过程中被消耗较多，致使其表达水平未因炎症加剧而明显升高，而且，本文所收集的很多患者病程较长，使其机体IL-6、TNF-α的表达量在疾病治疗后期或病情反复时由于其他类型相关细胞因子反调节作用而逐渐消耗，进而引起急性期、慢性期患者血清IL-6、TNF-α表达量无明显差异。本文发现泛发性和局限性湿疹患者血清细胞因子水平相近(P>0.05)，提示湿疹引起的免疫反应而导致细胞因子大量分泌有普遍性和全身性特点，故在各类皮肤湿疹患者中可通过检测血清细胞因子水平来评估患者病情及机体免疫应答状态。

总之，湿疹患者存在Th1/Th2细胞因子水平异常变化，这种变化与病情密切相关，因此可通过检测此类细胞因子水平来评估其病情，具有一定的临床参考价值。