帕金森患者血清MCP-1、CCR2水平与病情严重程度的关系

尤雪梅，种亚楠，狄海莉，孟军鹏，沈小燕，吴文婷

陕西省第四人民医院神经内科，陕西 西安 710043

帕金森是临床常见神经系统退行性疾病，随着我国人口老龄化进程，其发生率呈逐渐增加趋势，早期表现为震颤、运动迟缓、肌肉强直等运动症状，随病程发展，抑郁、认知等非运动症状加重，对患者生活质量造成严重影响[1-2]。近年来研究显示，帕金森病情演变过程中通常存在免疫炎症反应[3]。单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1，MCP-1)又称CC趋化因子配体2(CC chemokine ligand 2，CCL2)，是CC趋化因子家族的一员，对单核细胞、巨噬细胞具有强趋化作用，其存在多种受体，其首选受体是CC趋化因子受体2(CC chemokine receptor-2，CCR-2)，在炎性反应中，MCP-1/CCR2信号通路可招募、激活单核细胞，进而发挥调节免疫反应的作用[4-5]，且MCP-1/CCR2结合位点在海马、丘脑、杏仁核复合物等与边缘系统有关脑区中均存在，MCP-1/CCR2与认知功能的关系已引起诸多研究者的兴趣[6]。但是目前关于MCP-1、CCR2与帕金森病情严重程度的关系的报道较少，本文就此展开研究，现将结果报道如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2017年5月至2020年5月陕西省第四人民医院神经内科收治的265例帕金森患者作为观察组，年龄40~85岁，病程2~12年。纳入标准：(1)符合中国帕金森病治疗指南(第三版)中诊断标准[7]；(2)临床资料完整。排除标准：(1)肿瘤性、中毒性、外伤性、血管性等继发性帕金森者；(2)存在脑外伤、卒中或脑部手术史者；(3)合并血液系统疾病者；(4)自身免疫性疾病者；(5)合并恶性肿瘤者；(6)合并心、肝、肺、肾等脏器严重功能障碍者。另选取270例同期健康体检者作为对照组，年龄40~85岁。两组受检者除蒙特利尔认知评估量表(Montreal Cognitive Assessment，MoCA)评分比较差异有统计学意义(P<0.05)外，性别、年龄、身体质量指数(BMI)、吸烟、饮酒、高血压、糖尿病、高血脂等一般资料比较差异均无统计学意义(P>0.05)，见表1。本研究经医院伦理委员会批准，患者及家属知情同意。

表1 两组受检者的基线资料比较[(±s)，例(%)]

表1 两组受检者的基线资料比较[(±s)，例(%)]

项目 对照组(n=270)观察组(n=265)t/χ2值P值男性151(55.93)153(57.74)0.1790.673年龄(岁)64.56±10.3964.97±11.210.4390.661 BMI(kg/m2)24.12±2.5724.43±2.691.3630.173病程(年)-6.71±2.15--H-Y分期(期)-2.42±0.54--吸烟36(13.33)43(16.23)0.8890.346饮酒18(6.67)23(8.68)0.7660.382高血压93(34.44)101(38.11)0.7790.377糖尿病22(8.15)19(7.17)0.1810.671高血脂32(11.85)37(13.96)0.5300.467 MoCA评分(分)27.93±2.9415.42±2.6751.4940.000

1.2 方法

1.2.1 血清MCP-1、CCR2表达水平检测 两组受检者均采集5 mL空腹肘静脉血，3 000 r/min离心10 min，将分离的血清置于-80℃条件下保存。检测时，提前取出血清标本并放至室温，采用酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)检测血清MCP-1、CCR2表达水平，MCP-1试剂盒购于武汉博士德生物工程有限公司(货号为EK0441)，CCR2试剂盒购于武汉华美生物工程有限公司(货号为CSB-E14200h)，试验操作严格遵循试剂盒说明书。将血清MCP-1、CCR2表达水平以平均数区分高、低表达。

1.2.2 帕金森患者运动功能评估 采用改良Hoehn-Yahr(H-Y)分期量表评估帕金森患者运动功能，0期：无症状；1期：单侧肢体受累；1.5期：单侧肢体受累，合并躯干(轴)受影响；2期：双侧肢体受累，平衡未受影响；2.5期：轻度双侧肢体受累，可借助后拉试验自行恢复平衡；3期：轻至中度双侧肢体受累，平衡受影响，且无法借助后拉试验恢复；4期：重度病残，不借助帮助仍能走路、站立；5期：无协助下只能卧床或坐轮椅。H-Y分期越高说明运动功能受损越严重。

1.2.3 蒙特利尔认知评估量表(Montreal Cognitive Assessment，MoCA)测试 采用MoCA量表评估两组受检者认知功能，所有受试者均在安静环境下开始测试，且全程以标准化用语进行。MoCA量表包括记忆、语言能力、视空间与执行功能、注意力等项目，总分30分，答对一个单项计1分，回答错误或回答不知道或不回答计0分，MoCA评分≥26分则为认知功能正常，MoCA评分<26分提示认知功能障碍，受教育年限≤12年者应在总得分基础上加1分，以作校正，Mo-CA评分越低，则认知功能受损越严重。

1.3 统计学方法 采用S-PSS25.0软件处理数据。计量资料以均数±标准差(±s)表示，组间比较采用t检验；计数资料以例(n)或百分率(%)表示，采用χ2检验；采用Spearman分析帕金森患者血清MCP-1、CCR2表达水平与H-Y分期、MoCA评分的相关性；绘制受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve，ROC曲线)评估血清MCP-1、CCR2对帕金森的诊断价值。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组受检者的血清MCP-1、CCR2水平比较 观察组患者的血清MCP-1、CCR2表达水平明显高于对照组，差异均有显著统计学意义(P<0.01)，见表2。

表2 两组受检者的血清MCP-1、CCR2水平比较(±s)

表2 两组受检者的血清MCP-1、CCR2水平比较(±s)

组别 例数MCP-1(pg/mL)CCR2(ng/mL)对照组27017.32±5.1622.38±6.56观察组26526.67±8.6031.71±9.67 t值15.28113.081 P值0.0010.001

2.2 帕金森患者血清MCPP-1、CCR2表达水平与H-Y分期、MoCA评分的相关性 Spearman相关分析结果显示，帕金森患者血清MCP-1、CCR2表达水平与H-Y分期呈正相关(P<0.05)，与MoCA评分呈负相关(P<0.05)，见表3。

表3 帕金森患者血清MCP-1、CCR2表达水平与H-Y分期、MoCA评分的相关性

2.3 血清MCPP1、CCR2对帕金森的诊断价值 血清MCP-1、CCR2单独诊断帕金森患者的曲线下面积(area under the curve，AUC)分别为0.817(95%CI：0.780~0.855)、0.781(95%CI：0.741~0.821)，截 断 值 分 别 为20.57 pg/mL、26.74 ng/mL，此时对应的敏感度分别为77.00%、74.00%，特异性分别为81.50%、78.90%；两者联合诊断帕金森的AUC为0.853(95%CI：0.820~0.886)，敏感度为85.70%，特异性为74.80%，且与单独诊断相比，两者联合诊断敏感度较高，见图1。

图1 血清MCP-1、CCR2诊断帕金森患者的ROC曲线

3 讨论

帕金森是一种慢性进行性神经变性疾病，主要病理改变是多巴胺能神经元缺失，其发生机制复杂，与遗传、环境、氧化应激及炎症反应均有关，但具体机制尚未明确阐述。因临床应用H-Y分期量表存在迟滞性，患者多在缺失30%~50%以上多巴胺神经元时，临床症状才较为明显，可能使漏诊患者错失最佳治疗时机[8-9]。

炎性反应已被证明是包括帕金森在内的多种神经退行性疾病的主要因素[10]。MCP-1是调控单核细胞、小胶质细胞募集及活化的重要趋化因子，其与受体CCR2在多种神经炎症性疾病中发挥重要作用[6,11-12]。MCP-1多由神经元及神经胶质细胞产生，能增加纹状体神经细胞趋化作用，与帕金森神经炎症关系密切，可能在炎症反应起始阶段发挥关键作用[13]。MCP-1/CCR2通路能够诱导白细胞在神经损伤部位聚集，促使炎症因子及其他趋化因子的释放，进而引起神经炎症[14-15]。研究发现，大鼠脊髓损伤后发生运动、感觉功能障碍，同时脊髓中MCP-1、CCR2表达量增加，可能影响大鼠运动及感觉功能，有望将其用于靶向治疗，推测与MCP-1、CCR2介导脊髓损伤后发生继发性炎性反应有关[16]。

本研究发现，与对照组相比，观察组患者血清MCP-1、CCR2表达水平较高，提示MCP-1、CCR2与帕金森的发生有关，分析原因是，炎性反应过度激活是帕金森病变的重要病理环节，MCP-1具趋化活性，促进炎性细胞向损伤部位趋化移动，增强炎性细胞在中枢神经浸润，发挥促炎作用，最终引发神经退行性病变[3，17]。进一步研究显示，帕金森患者血清MCP-1、CCR2表达水平与H-Y分期呈正相关，与MoCA评分呈负相关，提示MCP-1、CCR2与帕金森患者运动功能、认知功能损伤程度有关，两者可能在帕金森的病情演变中发挥重要作用，

对患者进行早期诊断并及时干预，对提高预后意义重大。本研究还显示，血清MCP-1、CCR2单独诊断帕金森的AUC分别为0.817、0.781，截断值分别为20.57 pg/mL、26.74 ng/mL，而两者联合诊断帕金森的AUC为0.853，其敏感度、特异性可分别高达85.70%、74.80%，可见两者联合诊断较单独诊断价值提高，提示MCP-1、CCR2可能成为帕金森早期诊断的客观生物标记物。

综上所述，帕金森患者血清MCP-1、CCR2为高表达，且与H-Y分期、MoCA评分有关，可能用于监测患者病情严重程度，且对帕金森有一定诊断价值，可能成为帕金森早期诊断血清标记物，以便及时进行干预，延缓疾病进展，但本研究也有一定局限性，后续将增加纵向研究以佐证结果。