化学发光免疫测定技术在甲状腺肿瘤检验中的价值探讨

文/陈茜璐，陈玥，苏风雪

甲状腺肿瘤是起源于甲状腺滤泡细胞的肿瘤，也是人类头颈部最常见的肿瘤疾病之一，分为良性、恶性两种[1]。其中，前者以甲状腺腺瘤为主，后者即为人们熟知的甲状腺癌。临床资料显示，本病多发生于40岁以下的女性患者，临床主要表现为甲状腺孤立性或多发性结节，并可随着吞咽上下移动。甲状腺瘤的病因及发病机制极其复杂，至今尚未完全探明。因此，不同类型甲状腺瘤的病因是不同的，即使在同一类型中，也可能存在异质性。总体而言，临床目前尚缺乏基于病因治疗本病的有效方式，主要遵循早期及长期、积极而理性、综合治疗等原则治疗。甲状腺瘤是可以治愈的，良性肿瘤的治疗周期约为3～6个月；恶性肿瘤则需长期治疗。为尽早确认甲状腺瘤患者的疾病类型，并及时给予针对性治疗，要求临床诊断的精确程度必须尽可能地提高。化学发光免疫测定技术（chemiluminescence immunoassay，CLIA），又称为化学发光标记免疫测定，是指用化学发光剂对抗原或抗体进行直接标记，并与待测标本中相应的抗体、抗原等进行反应，在磁场的作用下，将处于结合状态（沉淀部分）和游离状态的化学发光剂标记物分离开来，之后加入发光促进剂进行光反应，通过监测发光强度，对标本中的某种物质进行定量、定性检测的方法。为探究CLIA应用于甲状腺肿瘤疾病时的效果，特开展本研究，现梳理研究过程，作如下报告。

1 资料与方法

1.1 一般资料综述

科室界定：长江航运总医院内分泌科；时间限定：2020年3月—2021年3月；分析对象选定：80例甲状腺肿瘤疾病患者。

纳入标准：（1）出现甲状腺结节、颈淋巴结肿大、心悸等症状，经血清、超声、同位素扫描、甲状腺淋巴造影、颈部X线等检测，怀疑为甲状腺瘤者；（2）思维意识清晰，能够与长江航运总医院医护人员正常交流；（3）具备基础的医学常识，听从医护人员指引并积极配合；（4）自愿签署知情同意书的患者；（5）长江航运总医院医伦理委员会对本研究进行多次审核，认定不违反伦理道德，予以批准。

排除标准：（1）脖颈、下颌等处存在严重皮肤病、灼伤，或是受到严重机械性损伤的患者；（2）思维意识缺失，无法与长江航运总医院医护人员有效交流的患者；（3）合并其他肿瘤疾病的患者；（4）病历资料完善程度不符合本研究要求的患者。

80例患者的一般资料如下：男性女性分别为比33∶47例，年龄26～55岁，平均（41.34±4.65）岁。

1.2 研究方法简析

采集所有患者的静脉血，行化学发光免疫检测。具体流程：

（1）化学发光免疫检测。①静脉血标本采集。叮嘱患者在采血日前日全天禁止食用高油腻、高蛋白食物，且不应饮酒；夜晚20：00后禁食，可适量饮用清水（饮水量控制在200～300mL之间）；采血日清晨7:30左右前来医院，在空腹状态下抽取约5mL的静脉血。将血液标本放置于离心设备中，调整转数参数为每分钟4000转，进行持续10min的离心处理。之后收取上层血清待检（若无法即时检测，应放置于4℃的冰箱中冷藏保管，且最大持续时间不得超过24h）。②化学发光免疫测定设备选择：雅培全自动免疫分析仪architect2000sr，特点为：①条码阅读器：试剂转盘，样品放置轨道和样品运行轨道；②上机数据保存在硬盘中；③操作模式分为随机和连续模式，可进行优先放置；④分样能力；机械精密度并可探测凝块；⑤质量控制：levy-Jennings图和Westgard规则；⑥检测原理：化学发光微粒子免疫分析技术（CMIA）；⑦测试速度：200测试/h，无前处理时，29min得到第1个结果；有前处理时，36～43min出第1个结果。

（2）“金标准”为病理检测结果，在研究组成员收集的临床病历数据中均有清晰记录。

1.3 观察指标界定

（1）比对两种检测方式下，甲状腺肿瘤疾病的阳性检出情况（甲状腺球蛋白含量＞40μg/L）；

（2）比对两种检测对甲状腺肿瘤疾病的诊断效能。主要指标包含特异度（真阴性/[假阳性+真阴性]、敏感度[真阳性/（真阳性+假阴性]、准确度[(真阳性+真阴性）/总数]、约登指数（敏感度与特异度之和，在此基础上减固定参数“1”）。

1.4 统计学分析

所有数据均纳入SPSS23.0统计学软件进行分析。其中，针对计量资料行“t”检验，所有结果均以“±s”的形式予以呈现；针对计数资料行“x2”检验，相关结果以“n（%）”的形式呈现；当P＜0.05时，表明比对项差异具有统计学意义[2]。

2 结果

2.1 两种检测方式下甲状腺肿瘤疾病阳性检出情况对比

临床病历数据显示，80例患者甲状腺瘤阳性检出率为46.25%，尽管高于化学发光免疫检测的38.75%（假阴性、假阳性例数均为2例，分别占比2.50%），但两种检测方式的差异并不明显，P＞0.05。见表1。

表1 两种检测方式甲状腺瘤疾病阳性检出情况对比（例）

2.2 化学发光检测方式下甲状腺肿瘤疾病诊断效能结果

化学发光免疫检测下，特异度为45/（2+45）=95.74%；敏感度为31/（31+2）=93.94%；准确度为（31+45）/80=95.00%；约登指数为95.74%+93.94%-100%=89.68%。

3 综合讨论

病理检测是检查机体器官、组织、细胞中病理改变的病理形态学方法，主要围绕所发生的病变，探讨其产生原因、发病机理、病变的发生及发展过程，最后做出病理诊断。将此种检测方法应用于甲状腺肿瘤等疾病的诊断时，能够精确判定肿瘤细胞的类型、组织来源、性质、范围等，准确率几乎达到100%，故可为临床诊断和治疗提供极其精确的依据。因此，此种检测方法被视为临床检测的“金标准（当前临床医学界公认的诊断疾病最可靠的方法）”。本研究收集的临床病历数据均为病理检测结果。

化学发光免疫测定技术是一种将具有高灵敏度的化学发光测定技术与具备高特异性的免疫反应检测技术相结合后，以各类抗原、半抗原、抗体、激素、酶、脂肪酸、维生素、药物成分作为检测对象的一种新型免疫测定分析技术[3]。该技术的原理为：分为免疫反应系统和化学发光分析系统两大部分。其中，前者是指将发光物质（通常指在反应剂的激发下，能够生成“激发态”的中间体）直接标记在相应的抗原、抗体之上，作用于发光底物。后者是指利用化学发光物质，在催化剂的催化和氧化作用下，形成一个激发态的中间体。当该中间体从激发态逐渐回归到稳定的基态状态时，会发射出光子（同时带有光信号）[4]。通过特定的发光信号测量仪器，对此类光信号进行收集及测量、计算，最后可得出与目标检测物的含量。但化学发光免疫测定技术的先天劣势在于，基于此种检测方式得出的检测结果只具备辅助诊断价值，不能作为唯一的疾病诊断凭据。原因在于：使用化学发光免疫测定技术诊断患者是否患有某种疾病时，必须选定几种目标抗体、抗原、酶等物质，通过测量这些物质的含量，与标准值（正常人人体内的含量）进行对比，进而判定“可能”为何种疾病。如本研究开展期间选择的甲状腺球蛋白，正常值应＜40μg/L，如果检测结果显示甲状腺球蛋白含量高于40μg/L，可确定患者患有甲状腺疾病，但具体的种类则无法判定（如甲状腺功能亢进、毒性结节性甲状腺肿、亚急性甲状腺炎、慢性淋巴细胞性甲状腺炎等均会导致甲状腺球蛋白含量超过正常值）。由此可见，基于化学发光免疫测定技术的检测方式尽管在诊断准确率方面正日渐提升，但依然存在误诊、漏诊的可能性。本研究结果显示，80例患者甲状腺瘤阳性检出率为46.25%，尽管高于化学发光免疫检测的38.75%。从该结果可以看出，两种检测结果存在一定的差异（但并不明显，P＞0.05）。而在特异度、敏感度、准确度、约登指数等方面，化学发光免疫检测的相关水平均不低。总之，此种检测方式可作为临床诊断甲状腺肿瘤疾病的一种常用方法，但却不能作为唯一的方法。至少在现阶段，只能作为一种快速检测方法，最终结果还需取决于临床病历数据（病理检测结果）。