沙门菌临床检验中的全面生化反应和血清学检验的应用价值及准确性分析＊

2021-06-02李惠芳王红梅

保健文汇 2021年9期

文/李惠芳，王红梅

沙门菌又名沙门氏杆菌，是一种对外界环境有着较强适应性的细菌，其通常在人和动物的肠道中寄生，若是经食物进入人体，很快（一般在4~24分钟左右）便会引起恶心呕吐、腹痛腹泻等症状，随着病情的发展，患者还会出现发热、脱水、休克等表现，临床若不及时治疗，甚至可能危及患者生命[1]。为了控制患者的病情，减轻沙门菌带来的影响，临床需要加强对沙门菌感染的诊断。常规检验过于简单，对沙门菌的检验缺乏足够的特异性、敏感性和准确性，相比之下，特异性、敏感性和准确性更高的全面生化反应及血清学检验在沙门菌感染的诊治上具有更高的价值[2]。本文选择2020年3月~2021年3月期间收治的70例肠热症患者，试观察常规检验、全面生化反应及血清学检验在沙门菌临床检验中的应用效果。

1 方法及资料

1.1 研究对象

选择2020年3月~2021年3月期间收治的70例肠热症患者，以便利抽样法分组，对照组35例，研究组35例。研究组：男24例，女11例；年龄29岁~69岁，平均（49.17±11.27）岁。对照组：男23例，女12例；年龄28岁~70岁，平均（49.21±11.19）岁。将平均年龄和男女性例数等纳入组间对比，P＞0.05，两组之间可采取统计学对比。

入选标准：（1）符合肠热症的诊断标准：①有恶心呕吐、水样腹泻等症状表现，发作频率为每日3~5次；②局灶性病变的白细胞计数可达（20~30）*109/L；③排泄物中可见黏液与血液，显微镜下可见白细胞计数明显增加[3]。（2）临床资料完整；（3）近期未接受过治疗；（4）均为疑似沙门菌所致感染；（5）患者对研究内容知情，且签署自愿协议。

1.2 方法

对照组给予常规检验，检测试剂选择超氧化物歧化酶、过氧化氢酶2种。研究组给予全面生化反应及血清学检验，具体操作流程为：第一步，准备好检验的设备（天平、灭菌平皿、温箱、显微镜及均质器等）和材料（由HE琼脂和亚硫酸铋琼脂等琼脂制备成的培养基、由镁C12孔雀绿增菌液和四硫酸钠增菌液等增菌液制备成的试剂、接种棒、酒精灯、玻璃棒、镍络丝等）。第二步，根据患者的病情需要，为患者采集血液、骨髓液、尿液、呕吐物、粪便等作为标本，其中血液的采集时间应为患者入院1周后，尿液和粪便的采集时间应为患者入院2周后，骨髓液的采集时间应为患者入院3周后，若患者出于急性发作期，为避免用药影响检验结果的准确性，应在患者用药前采集尿液和粪便，且尿液需经每分钟3000转的速率进行离心处理，待沉淀后作为标本接受检验。若患者疑似为沙门菌导致的食物中毒，则应采集其进食的食物来进行检验。第三步，进行鉴定，沙门氏菌大多属于A~F群，可使用A~F多价O血清进行凝集，待凝集工作全部完毕后进行血清学检验。凝集的过程中，先以A~F多价O血清凝集，并定群血清因子（即定群6个O群因子血清），再给予H因子血清相凝集，使第一相和第二相凝集，并将凝集结果作为判定血清型的标准。在全面生化反应实验中，应将可疑群落先挑出来，接种到三糖铁琼脂中，并观察琼脂中发生的反应。若琼脂出现斜面产酸，且同时存在硫化氢阴性菌株，则将其排除。需要注意的是，接种到三糖铁琼脂中时，应选取蛋白陈水，并将其接种到尿素琼脂上，辅以拉氨酸脱羧酶等物质进行细菌培养，使周围温度在35℃～37℃之间，给予至少24小时的培养。

1.3 观察指标

对比研究组（全面生化反应及血清学检验）和对照组（常规检验）的阳性检出率。全面生化反应的实验结果判定标准为：（1）阳性：液面试剂呈红色；（2）阴性：液面试剂呈黄色[4]。血清学检验的结果判定标准为：（1）阳性：副伤寒沙门菌H凝集效价和伤寒沙门菌O凝集效价均不低于1:80，而H凝集效价不低于1:160；（2）阴性：未达到阳性标准[5]。

1.4 数据分析方法

数据资料的处理均使用软件SPSS-19.0，数据类型分为计数资料、计量资料两类，表现形式分别为n(%)和（±s），检验分别使用卡方值（x2）和t值。若P值在统计学计算后为＜0.05，则组间对比有显著性差异。

2 结果

研究组的阳性检出率为97.14%，高于对照组71.43%的阳性检出率，统计学对比有明显差异（P＜0.05）。见表1。

表1 检验结果的组间对比（n，%）

3 讨论

沙门菌是非常具有代表性的肠道致病菌，其在抗原的构造与生化反应上与革兰氏阴性杆菌有着很高的相似度，是导致食物中毒的主要原因，人体在摄入存在沙门菌的食物后将会在短时间内出现一系列明显的症状表现，患者轻则呕吐、腹泻，重则脱水、休克，面临生命危险[6]。但是，以上症状并非是食物中毒所特有的表现，且导致食物中毒的原因并非只有沙门菌感染，不同病因意味着治疗方案存在很大的差异，故临床需要明确患者的发病原因，而要实现对沙门菌感染的准确诊断，则需要为其采取科学的检验方法。沙门菌有多种类型，其中与人体疾病关系最为密切的类型是伤寒沙门菌，其余类型的沙门菌多与动物经有关，原因是伤寒沙门菌的生存环境温度在35~37℃左右，与人体温度相近，因此在摄入含有伤寒沙门菌的食物后非常容易发严重食物中毒，故临床检验的沙门菌主要指伤寒沙门菌[7]。伤寒沙门菌所引起的疾病主要是肠热症，本文以肠热症患者作为研究对象，为其进行了沙门菌检验。而从结果可知，采取全面生化反应及血清学检验的研究组其沙门菌阳性检出率（97.14%）高于采取常规检验的对照组（71.43%），可见全面生化反应及血清学检验对沙门菌有非常高的诊断准确性。而全面生化反应及血清学检验之所以有如此显著的应用效果，原因主要是：沙门菌虽然是兼性厌氧菌，但也可在有氧和缺氧的环境中生存，当其侵入到肠道后会在其中大量繁殖，于缺氧或有氧状态下释放出大量的毒素，诱导外膜蛋白、过氧化氢酶与超氧化物歧化酶等抗氧化酶过量表达（缺氧状态下伤寒沙门菌的毒性要高于有氧状态下），临床可以通过常规检验来测定超氧化物歧化酶、过氧化氢酶含量，进而判断患者是否发生沙门菌感染，但需要注意的是，常规检验虽能检验一定比例的沙门菌，但该方法易受到外界因素的影响，因此准确性较为一般[8]。而全面生化反应及血清学检验中的全面生化反应试验主要是培养可疑的菌落再观察液面颜色，血清学检验则是凝集可疑菌落和抗体并观察是否有颗粒沉淀，二者联合不仅可以减少外界因素带来的干扰，还可以显著提高对沙门菌感染的阳性检出率，因此在沙门菌临床检验中有比常规检验显著得多的诊断准确性；并且，全面生化反应及血清学检验操作简单、经济性高，这一点也提高了该方法在沙门菌检验中的应用价值[9]。将本文中采取全面生化反应与血清学检验的研究组97.14%的阳性检出率与姜少霞[10]研究报告《全面生化反应与血清学检验在沙门菌临床检验中的作用分析》中同样采取全面生化反应与血清学检验的研究组91.67%的阳性率进行对比，二者较为相近，可见本研究结果结论真实可靠。

最后，沙门菌检验需要注意如下几点：（1）生化反应主要检验纯培养物，若血清学检验结果呈阳性但生化试验结果为阴性，则要纯化接种物再进行检验；（2）无论采取哪种检验方法，沙门菌的分离菌与阳性对照菌均有可能对周围环境造成一定污染，在进行菌株分离、增菌和血清凝集的过程中，必须要做好器具的清洗和消毒工作、对检验人员的保护工作，以免病菌扩散，引发感染。