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宜春市2194 例妇女人乳头瘤病毒感染情况分析

2021-05-19朱小燕刘梦姮徐文群

实验与检验医学 2021年2期
关键词:危型亚型感染率

朱小燕,刘梦姮,徐文群

(宜春市妇幼保健院检验科,江西 宜春 336000)

宫颈癌位于女性恶性肿瘤发病和死亡率的第二位,每年大约有50 多万的新发癌症患者,死亡数高达266000 例,且有年轻化趋势,严重威胁女性健康受到广泛的关注。大量研究证明人乳头瘤病毒(HPV)的持续感染是引起女性宫颈癌的主要诱因[1,2],目前分离鉴定的HPV-DNA 有100 多种,能感染女性生殖道的有40 多种。由于宗教信仰、风俗文化、职业分布、人群自身免疫力等原因致使HPV 的流行在各地有所差别,感染率也有差异[3,4]。因此了解本地的HPV 流行现状, 分析其型别特征及年龄分布特点,对于降低本地区宫颈癌的发病率及对HPV 感染预防; 疫苗研发临床指导有重要意义。

1 对象与方法

1.1 研究对象 收集 2017 年 11 月-2019 年 3 月在宜春市妇幼保健院妇科就诊和常规体检的共计2194 例女性宫颈脱落细胞标本进行基因分型检测。年龄 17~76 岁,平均年龄 38±2.52 岁。取样前要求条件:⑴检查前3d 不做阴道冲洗,不要用避孕药膏等阴道内用药物: ⑵检查前24h 内不应有性行为:⑶检查前不进行醋酸或碘液涂抹。

1.2 方法

1.2.1 标本采集 以专用宫颈脱落细胞采集器进行采样,医护人员先以窥阴器暴露宫颈,用棉拭子将宫颈过多的分泌物擦去,取出宫颈刷置于宫颈口,单方向旋转4~5 周以获得足量的上皮细胞样本,然后将宫颈刷头部放入洗脱管中,沿刷柄折痕处将宫颈刷柄折断,旋紧洗脱管盖,做好样本标识,并保持洗脱管直立放置,尽快送检。

1.2.2 检测方法 采用北京博晖新生物技术股份有限公司的人乳头瘤病毒核酸检测试剂盒 (生物芯片法)和博晖BHF-VI 核酸芯片检测仪,严格按照试剂盒说明书的操作步骤提取DNA,针对目的的DNA 进行PCR 扩增和反向斑点杂交,根据HPV 特定基因设计的特异性引物,可以扩增出24 种HPV基因型的目的片段,分为18 种高危型和6 种低危型。高危型包括 HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、82、83: 低 危 型 包 括HPV6、11、42、43、44、81。仪器将扩增产物转移到芯片的检测区。在检测区杂交膜上包被有HPV24 种亚型的检测探针。如果扩增产物中含有目的基因则能够被芯片上的探针捕获,再加入酶液和显色液后在杂交膜的特定位置出现蓝色的斑点,可判断出感染人乳头瘤病毒核酸及感染的亚型。如果不含目的基因,则在特定的位置不会出现蓝色斑点。

1.3 统计学分析 采用SPSS22.0 软件进行数据分析,计数资料采用 χ2检验,检验水准 α=0.05,P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 HPV 感染基因型分布情况 2194 例女性共检出HPV 感染者621 例,感染率为 28.30%,各 HPV亚型之间差异有统计学意义(χ2=600.000,P<0.05 )。单一感染、 双重感染和多重感染分别占72.30%(449/621)、20.45%(127/621)和 7.25%(45/621),各种感染型别之间有统计学意义(χ2=486.521,P<0.05),HPV 单一感染共 449 例,以高危亚型为主,占80.85%(363/449),感染率最高的 3 种亚型分别是52 型(25.60%)、16 型(16.43%)和 58 型(10.95%),见表1 和表2。

表1 HPV感染的各型别分布占比

2.2 不同年龄阶段HPV 阳性感染率比较 2194 例女性的年龄范围在17~76 岁,年龄区间分为≤20岁、21~30 岁、31~40 岁、41~50 岁、50~60 岁和≥61岁年龄组,例数分别是 43、528、787、579、208 和 49例。HPV 阳性率分别为 34.88%、30.87%、27.95%、24.01%、28.85%和48.98 %。各年龄组间感染率差异有统计学意义(χ2=18.300,P<0.05)。感染率最高的是≥61 岁年龄段,其次为≤20 岁年龄段,分别为48.98%和34.88%。各年龄组之间感染高危型、低危型和混合感染之间无统计学意义 (χ2=7.090,P=0.717,P>0.05)。见表3。

表2 HPV感染类型和阳性构成比

2.3 不同年龄段 HPV 基因型 52、16 和 58 的检出情况,≤20 岁年龄段以16 型为主,感染率为11.63%,其他年龄段以52 型为主,感染率依次为8.52%、6.48%、5.70%、9.13%、14.29%,不同年龄组感染52、16 和 58 亚型之间无统计学意义 (χ2=8.188,P=0.610,P>0.05 )。见表4。

表3 HPV感染各年龄组分布情况(n=2194)

表4 不同年龄组HPV基因型52,16 和58 的检出情况

3 讨论

HPV 是一种嗜上皮性DNA 病毒,主要感染区域有人类表皮的粘膜鳞状上皮,该病毒只侵犯人类,对其他动物无致病性。HPV 以通过性活动传播为主[5]。在全球性病传播疾病中,HPV 的感染占15%~20%,75%的性活跃成人一生中皆感染过此病毒[6]。HPV 感染可引起人类恶性肿瘤和疣,生长在生殖器官附近皮肤和黏膜上的寻常疣、 尖锐湿疣及生长在黏膜上的乳头状瘤,并可发展为癌前病变及浸润性癌。

HPV 感染具有很强的地域性,我国地域辽阔,而各地经济发展水平和文化等各方面差异显著。HPV 感染情况也不尽相同,据报道,我国女性人群宫颈HPV 感染率为25.0%, 不同地理区域的感染率差异较大(20%~34.6%),其中华东地区为25.2%[7]。本研究中,江西省宜春市妇女HPV 感染率为28.3%,略高于华东地区的平均水平,接近于孔令和等[8]报告的九江地区HPV 感染率为29.4%,明显高于曾选[9]报告的南昌地区的20.94%。

本次调查结果显示, 宜春地区HPV 感染以单一感染为主,占72.30%,排前三名的是52 型、16 型、58 型,与曾选[9]报导的南昌地区HPV 感染前三亚型一样,以单一高危型感染为主。但与有些报道的结论以16 型感染为最常见的感染类型[10]不一致,但与报道中52 型、58 型近年来有上升趋势[11]的情况一致。因此可以认为52 型成为本地最新的流行亚型。说明不同地区HPV 亚型的流行性存在一定的差异,可为流行病学研究提供基础资料,也可根据地区差异,研发和选择性的接种疫苗,降低宫颈癌的发病率。

本次研究HPV 感染各年龄段分布与大多数报道相似[12,13],呈“U”型分布,主要表现为 20 岁以下和61 岁以上两个年龄段女性相较于其他年龄段感染率较高,感染率最高的是≥61 岁,感染率为48.98%。≥61 岁年龄段患者由于机体免疫系统功能和体内激素水平降低,阴道微环境的改变导致清洁能力下降,使病毒不利于自然清除[14],还可能就是因为本年龄段患者大多出现临床症状,进行针对性检测,致使感染率偏高。笔者认为年龄小而感染率高的可能原因是:性生活过早、过频增加了女性生殖道黏膜机械性损伤和接触HPV 的机会,为感染创造条件。

目前我国上市的HPV 疫苗有三种,分别为二价、四价和九价,分别对不同型别起到预防。二价疫苗预防HPV16、18 型感染;四价在二价的基础上增加了HPV6、11 型抗原; 而九价在四价的基础上增加了 HPV31、33、45、52、58 型抗原。我国高危型HPV 流行比较广泛,据报道主要包括HPV16、58、52、18、33 几种型别[15],但本研究显示,宜春地区高危型 HPV 感染前 6 位分别为 HPV52、HPV16、HPV58、HPV51、HPV53 和 HPV39,因此选择九价疫苗对宫颈癌的一级预防较好,但九价疫苗也没有包含本地区高感染率亚型前几位,因此,对于HPV疫苗接种者依然推荐定期进行宫颈癌筛查。

HPV 感染最常见的的结局是没有明显的临床表现,绝大部分会被机体免疫力自动清除。一般平均8~24 月可发生轻度、中度和重度的宫颈癌前病变,再平均5~10 年才可发生浸润癌,只有早查早治,是完全可以避免死于宫颈癌的。因此,对区域性HPV 分型和感染情况进行统计分析,明确地区性HPV 亚型分布特点,有利于制定具有针对性的筛查和防治措施,有利于推进适用HPV 疫苗的研发和应用,对预防和控制HPV 感染和宫颈癌的发生具有重要的指导意义。

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