外周血LTB4、IL-21、NLR在诊断小儿过敏性紫癜中的应用

付晓梅，张宏，张国伟，吕民英，况琦

（河南大学第一附属医院儿科，河南 开封 475001）

小儿过敏性紫癜 （Henoch-Schnlein Purpura，HSP）为最常见的毛细血管变态反应性疾病，以广泛的小血管炎症为病理基础,患儿多表现为皮肤紫癜、肾炎等[1]。HSP 的发病机制较为复杂，目前多认为与过敏原引起的变态免疫反应有关,机体发生变态反应后会产生自身抗原,刺激机体产生相应抗体后形成抗原抗体复合物,积聚于小血管壁而引发血管炎，进而导致患儿出现皮肤紫癜等症状[2]。中性粒细胞、淋巴细胞是常见的免疫细胞，与机体免疫功能密切相关, 中性粒细胞/淋巴细胞比值（Neutrophil/Lymphocyte ratio，NLR） 常用于反映机体感染水平[3]；白三烯 B4（Leukotriene B4，LTB4）、白介素-21（Interleukin-21，IL-21）是常见的细胞因子，LTB4 为作用最强的粒细胞趋化因子, 可通过激活和趋化炎性细胞，引起气道炎症的形成[4]，但目前有关其对HSP 的诊断价值尚存在争议。故本研究通过分析 HSP 患儿外周血 LTB4、IL-21、NLR 变化情况,旨在探究各指标单独检测及联合检测对HSP的诊断价值。

1 资料与方法

1.1 临床资料 以 2019 年 1 月-2020 年 1 月 115例HSP 患者为HSP 组，并以同期健康体检儿童68例为对照组。HSP 组中男 63 例，女 52 例；年龄 4～14 岁，平均 7.95±2.61 岁；疾病类型：纯皮肤型 56例、关节型21 例、腹型17 例、肾型13 例及混合型8 例。对照组中男 37 例，女 31 例；年龄 6～14 岁，平均8.13±2.57 岁。两组在性别、年龄方面对比差异无统计学意义（P＞0.05）。

1.2 HSP 组纳入标准 ⑴根据《小儿过敏性紫癜诊疗指南》[5]中的诊断标准，确诊为HSP；⑵患儿家属知情本研究的内容及目的,自愿参与本研究且已签署同意书；⑶年龄≤14 岁。

1.3 HSP 组排除标准 ⑴严重肝肾功能异常者；⑵入组前已使用激素类及免疫介导类药物治疗者；⑶合并其他过敏性疾病患儿； ⑷严重免疫功能异常患儿；⑸恶性肿瘤患儿；⑹入组前1 个月内患有感染疾病患儿。

1.4 方法 外周血 LTB4、IL-21、NLR 水平测定：分别于患儿入院24h 内及受试者体检当天采集其空腹外周血4ml,其中1.6ml 加入抗凝管为抗凝血，剩余一管经离心后分离血清:采用双抗夹心酶联免疫吸附法检测血清IL-21 水平 （武汉优尔生Usen 公司试剂盒）； 应用抗人酶联免疫法检测血清LTB4（美国Termo 公司试剂盒）,严格按试剂盒说明书要求检测受试者LTB4 水平； 采用日本Sysmex XS-1000i 型血液分析仪检测抗凝全血中性粒细胞/淋巴细胞，并计算中性粒细胞/淋巴细胞比值（NLR）。

随访： 采用电话随访或门诊复诊的方式对患者肾脏病变或病情复发情况进行随访，随访时间为就诊后三个月。

1.5 观察指标 ⑴比较HSP 组及对照组外周血LTB4、IL-21 水平及 NLR 值。⑵分析患儿外周血LTB4、IL-21、NLR 间的相关性。⑶采用 ROC 曲线分析外周血LTB4、IL-21、NLR 水平及联合检测对HSP 的诊断价值。⑷比较外周血 LTB4、IL-21、NLR水平及联合检测对HSP 的诊断效能。⑸根据患儿病初三个月内肾脏病变或病情复发情况将其分为预后较好组（无肾脏病变且未出现复发）及预后不良组 （出现肾脏病变或复发）, 比较两组外周血LTB4、IL-21、NLR 水平，并采用 ROC 曲线分析单独指标检测及联合检测对预后的预测价值。

1.6 统计学处理 数据均用SPSS17 软件进行处理,计数资料以%表示，采用χ2检验比较组间差异；计量资料经正态检验后用(±s)表示，用t 检验比较组间差异; 采用pearson 检验分析患儿外周血LTB4、IL-21、NLR 水平的相关性；采用ROC 曲线分析外周血 LTB4、IL-21、NLR 水平对 HSP 的诊断价值及对预后的预测价值。P＜0.05 即差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 HSP 组及对照组外周血 LTB4、IL-21、NLR 水平比较 HSP 组外周血LTB4、IL-21 水平高于对照组，NLR 值大于对照组（P＜0.05），见表1。

表1 HSP组及对照组外周血LTB4、IL-21、NLR水平比较

2.2 患儿外周血 LTB4、IL-21、NLR 水平的相关性分析 患儿外周血LTB4 水平与 IL-21、NLR 水平呈正相关,IL-21 水平与 NLR 值呈正相关（P＜0.05）,见表2。

2.3 外周血 LTB4、IL-21、NLR 水平及联合检测对HSP 的诊断价值分析 外周血 LTB4、IL-21、NLR水平联合检测诊断HSP 的AUC 大于各指标单独检测（P＜0.05），见表3、图1。

表2 患儿外周血LTB4、IL-21、NLR水平的相关性分析

表3 外周血 LTB4、IL-21、NLR水平及联合检测对HSP的诊断价值分析

图1 外周血LTB4、IL-21、NLR水平及联合检测诊断HSP的ROC曲线分析

2.4 外周血 LTB4、IL-21、NLR 水平及联合检测对HSP 的诊断效能比较 联合检测诊断HSP 的灵敏度高于 IL-21、NLR，准确度高于 IL-21（P＜0.05），见表4。

表4 外周血LTB4、IL-21、NLR水平及联合检测对HSP的诊断效能比较（例，%）

2.5 预后较好组及预后不良组外周血LTB4、IL-21、NLR 水平比较 预后不良组外周血 LTB4、IL-21 水平高于预后较好组，NLR 值大于预后较好组（P＜0.05），见表5。

2.6 外周血 LTB4、IL-21、NLR 水平及联合检测对预后的预测价值分析 外周血LTB4、IL-21、NLR水平预测不良预后的AUC 大于各指标单独检测（P＜0.05），见表6、图2。

表5 预后较好组及预后不良组外周血LTB4、IL-21、NLR水平比较

表6 外周血LTB4、IL-21、NLR水平及联合检测对预后的预测价值分析

图2 外周血LTB4、IL-21、NLR水平及联合检测预测不良预后的ROC曲线分析

3 讨论

LTB4 是一种与炎症反应有关的白三烯类物质,可促进活性氧类和溶酶体中酶的释放；IL-21 主要由活化的CD4+T 细胞产生，参与B 淋巴细胞的增值过程，可调节机体免疫应答[6]。HSP 属于自身免疫性疾病，患者多存在免疫失衡的现象。本研究发现，HSP 组外周血 LTB4、IL-21 水平高于对照组，说明HSP 患者存在外周血LTB4、IL-21 水平表达异常的现象，或与体内炎症介质释放与分泌有关。

本研究结果显示，HSP 组NLR 值大于对照组，说明HSP 患者存在NLR 值异常的现象，这主要是因为HSP 患儿多存在细胞免疫异常的现象，细胞免疫通过诱导内皮细胞趋化因子的产生而引起多核中性粒细胞聚集,使外周血多核中性粒细胞水平升高，进而导致NLR 值上升[7,8]。另外，本研究结果显示,患儿外周血LTB4 水平与IL-21、NLR 水平呈正相关，IL-21 水平与NLR 值呈正相关，这主要是因为LTB4、IL-21、NLR 表达情况均与机体免疫调节功能有关，LTB4 能促进Th2 类细胞因子释放，IL-21 可加速Th2 型免疫应答，两者异常表达时可导致机体免疫失衡，使患者体液免疫处于高反应状态。

HSP 的预后主要取决于肾损伤程度,目前HSP患儿出现肾功能损伤的概率超过20%[9,10]，但导致其出现肾损害的原因目前尚不可知。本研究通过以往临床经验分析指出,患者出现肾损害可能与免疫紊乱有关。通过进一步研究发现，预后不良组外周血LTB4、IL-21 水平高于预后较好组，NLR 值大于预后较好组，这主要是因为HSP 患儿受到特异性抗原刺激后,机体B 淋巴细胞会产生大量IgA 和IgE, 且T 淋巴细胞过表达会使纤维蛋白等免疫复合物沉积于肾小球系膜，进而导致肾小球损伤[11,12],表明出现近期复发及肾功能损伤患儿的免疫紊乱程度较为严重，提示或可通过检测患儿外周血LTB4、IL-21 水平及NLR 值来对患儿预后进行诊断。但目前有关其对HSP 的诊断价值尚存在争议，另有报道指出,单指标检测多存在灵敏度及特异度低的现象，会影响诊断结果[13-15]。故本研究采用多指标联合检测诊断HSP，经ROC 曲线分析发现，外周血 LTB4、IL-21、NLR 水平联合检测诊断 HSP 及预测不良预后的AUC 均大于各指标单独检测，说明联合检测对HSP 具有辅助诊断价值, 对患儿预后具有预测价值, 表明可通过检测患儿外周血LTB4、IL-21 水平及NLR 值来判断其出现肾功能损伤的概率。

本研究不足之处在于纳入病例较少,且未研究不同疾病时期患者外周血LTB4、IL-21 水平及NLR 值变化情况,患者不同发病时期的免疫功能可能存在差异，或会导致研究结果存在误差，故后期需进行进一步研究以证实该免疫学指标在HSP 诊断中的应用价值。

综上所述,患儿外周血 LTB4、IL-21、NLR 水平联合检测对HSP 具有辅助诊断价值, 并对患儿现近期复发及肾功能损伤等现象具有预测价值。故可通过早期检测患者外周血LTB4、IL-21、NLR 水平来对预测预后情况。