结肠癌患者腹腔镜手术术后肠道菌群状况及双歧杆菌 活菌治疗研究

李宇栋，吴承东，李海松

（1.首都医科大学附属北京中医医院肛肠科，北京 100010；2．北京中医药大学东直门医院男科，北京 100700）

近年来，受环境因素以及生活习惯变化的影响，结肠癌的发病率呈现逐渐上升趋势［1］。结肠癌属常见的消化系统类恶性肿瘤，初期临床表现通常不具特异性，中晚期则表现为腹泻、腹痛、消化不良及便血等症状。临床上，手术是治疗结肠癌的首选方式，随着腹腔镜技术的应用推广，手术的安全性及疗效均得到了提升［2］。在正常生理状态下，人体肠道菌群保持相对平衡的状态，进而建立肠道屏障功能，发挥免疫和清除作用，有效阻止细菌侵染。术后肠道菌群失衡是结肠癌手术后最为普遍的并发症，会导致患者肠道屏障功能减弱，进而出现腹痛、腹泻等症状，引发其他更为严重的并发症，影响患者预后［3］。多项研究显示，患者结肠癌术后普遍性出现了肠道菌群失衡的情况，但通过相应的双歧杆菌治疗干预，均取得了有效改善［4］。因此，本研究以180 例结肠癌腹腔镜手术患者为研究对象，探讨结肠癌患者腹腔镜手术术后肠道菌群状况以及双歧杆菌活菌对于肠道菌群失衡的治疗效果，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2013 年1 月～2018 年12 月，首都医科大学附属北京中医医院接收的180 例结肠癌腹腔镜手术患者作为研究对象。纳入标准［5］：①确诊为结肠癌且符合腹腔镜手术条件的患者；②术前一个月未进行抗生素、益生菌类药物治疗；③患者知悉本研究，并签订同意书。排除标准［6］：①心脏、肾脏等重要脏器功能不全者；②患有肠道炎症、肠梗阻、肠穿孔者；③患有血液、过敏性等全身性疾病者；④伴有精神障碍，无法配合治疗者。按照随机数字表法，将120 例结肠癌腹腔镜患者随机均分为对照组和观察组，对照组（n=90）：男37 例，女23 例，年龄32～68 岁，平均（46±11.12）岁；观察组（n=90）：男35 例，女25 例，年领35～72 岁，平均（47±10.75）岁。两组患者性别、年领等一般资料无明显差异（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法 对照组采取常规术后处理，由医护人员监测患者各项生命体征，遵医嘱进行抗菌药物治疗，进行术后服药指导、心理干预及饮食护理。

观察组采用双歧杆菌活菌治疗，即在术后常规处理的基础上，在患者肛门排气后进食流食，同时开始服用双歧杆菌三联活菌胶囊（国药准字S10950032：上海信谊药厂有限公司，0.21g/片），0.63g/次，2 次/d，早晚服用，连续10d。

1.3 观察指标 患者肠道菌群双歧杆菌、乳酸杆菌、大肠杆菌、粪肠球菌以及B/E 水平分析：取患者术前、术后10d 及术后60d 自然排便的中段新鲜粪便0.5g，保存至样本袋以备检验。以中国科学院微生物研究所生产的双歧杆菌、乳酸杆菌、大肠杆菌及粪肠球菌作为标准菌株，溶解后提取DNA，利用紫外可见光分光光度计确定定量，通过系统软件确定循环阈值（CT）及标准曲线，同时统计出标准菌株PCR 片段拷贝值［7］。粪便样本化冻，取其中0.2g，使用磷酸盐缓冲液处理，10 分钟1000r/min 离心后取其上清200L，提取DNA，进行PCR反应，得出CT 值，最终计算出双歧杆菌、乳酸杆菌、大肠杆菌、粪肠球菌以及B/E 水平［8］。

患者肠道屏障功能分析：分别取患者术前、术后10d 清晨空腹静脉血5mL，利用酶学分光光度法检测血浆D—乳糖、DAO，利用偶氮显色鲎试验定量检测内毒素水平；分别取患者术前、术后清晨中段尿，利用高效液相色谱法检测L/M 水平［9］。

两组患者吻合口漏、感染、术后出血等不良反应发生率的对比分析。

两组患者满意度对比分析，采用调查表的方式，共有10 项调查内容，每项10 分，共计100 分［10］。非常满意，为总得分≥85 分时；满意，总得分在60～85 分之间；不满意，为总得分＜60 分。总满意度=非常满意+满意。

1.4 统计学分析 选择SPSS 20.0 统计工具进行数据分析对比，以mean±SD 表示计量数据，比较采用t 检验，以［n（%）］表示计数资料，比较采用χ2检验，等级资料的比较采用秩和检验，当P＜0.05 时，表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者术前术后肠道菌群状况比较分析 术前两组患者双歧杆菌、乳酸杆菌、大肠杆菌、粪肠球菌以及B/E 水平均无明显差异（P＞0.05）；术后10d，两组患者双歧杆菌、乳酸杆菌及B/E 水平均有下降，且观察组下降幅度显著小于对照组，两组患者大肠杆菌、粪肠球菌明显上升，且观察组上升幅度显著小于对照组（P＜0.05）；术后60d，两组患者双歧杆菌、乳酸杆菌、大肠杆菌、粪肠球菌以及B/E 水平较术后10d 均有所缓解，观察组各项指标基本恢复至术前水平，而对照组仍明显差于术前水平（P＜0.05），详细数据见表1。

2.2 两组患者术前术后肠道屏障功能比较分析 术前两组患者D-乳酸、血清二胺氧化酶（DAO）、尿乳果/甘露醇（L/M）及内毒素水平均无明显差异（P＞0.05）；术后两组患者各项指标均有所上升，而观察组上升幅度明显小于对照组（P＜0.05），详细数据见表2。

2.3 两组患者不良反应发生率比较分析 观察组患者吻合口漏、感染、术后出血等不良反应的发生率均显著低于对照组（P＜0.05），详细数据见表3。

表3 两组患者不良反应发生率比较分析［n（%）］

2.4 两组患者满意度比较分析 观察组患者的满意度明显高于对照组，差异具有统计学意义（P＜0.05），详细数据见表4。

表4 两组患者满意度比较分析［n（%）］

3 讨论

在成人正常生理状态下，肠道内细菌数量可多达1014个，诸多的细菌即构成了人体肠道菌群［11］。肠道菌群与人体健康有着密切的关系，它具有合成并供给人体所需多种维生素、参与新陈代谢、促进人体吸收、抵抗外部感染以及免疫疾病等重要作用［12］。临床研究发现，肠道菌群具有独特的结构性，并保持着生态平衡状态［13］。肠道菌群可分为益生菌、致病菌和中性菌三种，其中数量最多的为益生菌，占据肠道细菌总量的99%，益生菌一般属于厌氧菌，如双歧杆菌、乳酸杆菌［14］。临床上通常用双歧杆菌/大肠杆菌（B/E）来表示厌氧菌与需氧菌的关系，作为评价肠道菌群平衡状态的主要指标之一［15］。

结肠癌患者腹腔镜手术后，受其自身免疫水平及手术应激创伤的影响，肠道双歧杆菌、乳酸杆菌数量下降，致使肠道生物屏障及菌膜结构受损，大肠杆菌及粪肠球菌得以大量繁殖，B/E 水平下降，出现倒置，肠道菌群结构失衡［16］。在本研究中，所有患者术前肠道菌群状况无明显差距；在术后10d，所有患者双歧杆菌、乳酸杆菌、B/E 水平均有下降，大肠杆菌、粪肠球菌均有所升高，而双歧杆菌活菌治疗的患者肠道菌群变化幅度明显小于常规术后处理；在术后60d，双歧杆菌活菌治疗的患者肠道菌群状况基本恢复到术前状况，而常规术后处理的患者仍差别于术前水平。所有患者术前肠道屏障功能无明显差异，但术后双歧杆菌活菌治疗的患者D-乳酸、DAO、L/M 及内毒素上升幅度明显小于常规术后处理。有研究显示，双歧杆菌活菌制剂对于结肠癌患者术后肠道菌群水平及肠道粘膜屏障功能的改善作用显著优于常规术后处理，与本研究结论一致［117］。

双歧杆菌活菌，能够供给人体肠道有益菌，术后服用能够促进双歧杆菌、乳酸杆菌水平的恢复，改善肠道屏障功能，有效抑制需氧菌的大量繁殖，从而提升肠道菌群平衡水平，进而促使双歧杆菌、乳酸杆菌同肠粘膜特异性受体结合，恢复并生成肠道屏障功能，从而有效防止致病菌的侵染，避免疾病发生［18］。

在本研究中，双歧杆菌活菌治疗的患者术后不良反应发生率明显低于常规术后处理，患者满意度明显高于常规术后处理。患者术后双歧杆菌、乳酸杆菌水平恢复，能够有效清除大肠杆菌，从而减少了感染以及内毒素转移，减少了不良反应的发生，同时提升了患者满意度［19］。有研究显示，服用双歧杆菌活菌制剂患者不良反应发生率远远小于常规术后处理，与本文结论相一致［20］。

综上，腹腔镜手术后，结肠癌患者的双歧杆菌、乳酸杆菌明显减少，大肠杆菌、粪肠球菌明显增多，B/E 水平下降，肠道菌群状况失衡，肠道屏障功能被破坏。而双歧杆菌活菌能够有效改善肠道菌群状况，重建肠道屏障功能，减少患者术后不良反应，提升患者满意度，具有较高临床推广价值。