孕妇血清SAA、IL-6、PCT水平对胎膜早破的诊断及预后价值

贺小红，王莉敏，乔晓亮，翟晶晶

(郑州市妇幼保健院检验科，郑州 450003)

未足月胎膜早破(preterm premature rupture of membranes，PPROM)指孕周<37周的孕妇胎膜破裂，属于临床常见产科并发症[1]，易引起孕妇羊膜腔感染[2]、胎儿宫内窘迫、早产、新生儿感染[3]等不良后果。PPROM早期症状往往不明显，在胎膜早破之前一般会发生绒毛膜羊膜炎[4]，因此可从检测绒毛膜羊膜炎着手观测，尽早发现，从而降低胎儿及孕妇并发症[5]。目前临床研究[6]表明，PPROM的发生除与细菌感染密切相关，还与炎症反应有关。机体炎症可使产妇血清中淀粉样蛋白A(serum amyloid A，SAA)水平迅速升高；正常情况下孕妇体内血清降钙素原(procalcitonin，PCT)表达水平非常低，当发生严重感染时其水平大幅度升高；孕妇白细胞介素-6(IL-6)水平升高[7]，可破坏羊膜，激活孕妇体内的溶酶体酶，导致胎膜早破[8]。本研究通过分析孕妇SAA、IL-6、PCT等感染指标的表达水平与胎膜早破、新生儿Apgar评分的关系，以期为临床提供参考，报道如下。

1 对象与方法

1.1 对象 选取2017年7月—2019年7月郑州市妇幼保健院妇产科PPROM孕妇和同期住院的正常孕妇，随机分为观察组和对照组，各30例。本研究经院伦理委员会批准，孕妇或家属知情并签署知情同意书。纳入标准：①符合《妇产科学》[1]有关胎膜早破的诊断标准：阴道后穹窿液涂片检查可见胎脂、胎毛或者胎儿上皮细胞；阴道宫颈消毒之后，在窥器直视下用手触摸宫底见有羊水流出； pH值试验呈碱性。②均为单胎妊娠。③入院前体温正常。④无前置胎盘、妊娠高血压、胎盘早剥、妊娠糖尿病等严重并发症或并发症。⑤临床资料完整者。排除标准：①患有乳腺癌、宫颈癌等恶性肿瘤以及肝肾功能严重异常者。②合并其他妊娠并发症。③无法配合研究者。2组孕妇年龄、孕周、产妇类型、产次、体质量指数(BMI)比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。见表1。

表1 2组孕妇一般资料比较

1.2 方法

1.2.1 检测方法 绒毛膜羊膜组织采集：在孕妇分娩时，用棉棒擦取靠近宫颈口的胎盘胎膜组织，之后用体积4%甲醛固定，送至院病理科进行组织学检查。(1)绒毛膜羊膜炎诊断标准：①经EM-30AX高倍电子显微镜(库赛姆科技有限公司)观测视野中有5～10个中性粒细胞，而白细胞呈极性分布。②胎盘绒毛膜板和羊膜上出现白细胞弥散性聚集。③绒毛膜羊膜炎诊断可以根据中性白细胞计数多少分为3级。Ⅰ级：5<中性白细胞计数<10个/高倍视野(HP)；Ⅱ级：11<中性白细胞计数<30个/HP；Ⅲ级：中性白细胞计数≥30个/HP。(2)感染指标检测：2组孕妇在清晨空腹状态或禁食8 h下采集外周静脉血3 mL，置于离心管中，设置3 000 r·min-1后离心10 min，取上清液于-80 ℃冰箱冻存备用。SAA测定采用胶体金法，金标数码定量读取仪(上海奥普生物医药有限公司)，试剂盒(上海奥普生物医药有限公司，规格：96T)，阳性诊断阈值为≥10 mg·L-1。采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测IL-6，人IL-6(ELISA)试剂盒(杭州MultiSciences公司,货号70-EK106/2-96)，检测范围1.56～100.00 ng·L-1，灵敏度0.37 ng·L-1。PCT采用酶标仪(英国安图斯，ANTHOS2010)测定，试剂盒(美国RDE公司，货号DRE-L20243200CY)，PCT≥0.5 μg·L-1为阳性标准。所有操作均严格按照试剂盒要求进行。

1.2.2 观察指标 比较2组孕妇破膜时间(≥24 h或<24 h)、新生儿Apgar评分、孕妇绒毛膜羊膜炎发生率对血清SAA、IL-6、PCT水平的影响。

2 结果

2.1 2组孕妇破膜时间≥24 h与破膜时间<24 h血清SAA、IL-6、PCT水平比较 2组孕妇破膜时间≥24 h与破膜时间<24 h时，观察组血清SAA、IL-6、PCT水平均高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。2组孕妇破膜时间≥24 h的血清SAA、IL-6、PCT水平均高于破膜时间<24 h时的水平，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 2组孕妇破膜时间≥24 h与破膜时间<24 h血清SAA、IL-6、PCT水平比较

2.2 2组新生儿不同Apgar评分时血清SAA、IL-6、PCT水平比较 2组新生儿Apgar评分≥8与Apgar评分<7时，观察组血清SAA、IL-6、PCT水平均高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。2组新生儿Apgar评分≥8时血清SAA、IL-6、PCT水平均低于Apgar评分<7时的水平，差异有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表3 2组新生儿不同Apgar评分时血清SAA、IL-6、PCT水平比较

2.3 2组孕妇绒毛膜羊膜炎发生率比较 观察组孕妇绒毛膜羊膜炎发生率高于对照组，差异有统计学意义(t=6.12，P=0.023)。见表4。

表4 2组孕妇绒毛膜羊膜炎发生率比较[n=30,n(%)]

3 讨论

胎膜完整是正常妊娠的必要条件[9]。目前多数学者[10]认为，妊娠未足月时胎膜破裂可导致羊水外流、胎儿发育受限、发育空间缩小[11]，甚至引起生殖道逆行性感染，导致宫内壁受压不均，诱使胎膜早破[12]，引发绒毛膜羊膜炎。国外已有研究[5]表明，绒毛膜羊膜炎是胎膜破裂的主要诱因，是对于孕妇危害极大的并发症，因此，研究PPROM指标从检测绒毛膜羊膜炎入手。目前临床对于胎膜破裂没有较好的检测评估指标，考虑血清SAA、IL-6、PCT与机体内感染有关。

吴红莲等[13]研究表明，破膜时间越久，血清IL-6水平表达越高。王连云等[14]研究表明，当胎膜早破时，肝脏产生大量SAA、PCT进入血液系统，并随着破膜时间的持续保持较高的浓度。本研究结果显示，在2组孕妇中，观察组血清SAA、IL-6、PCT水平均高于对照组。2组新生儿Apgar评分≥8与Apgar评分<7比较，观察组新生儿血清SAA、IL-6、PCT水平均高于对照组，差异有统计学意义。2组新生儿Apgar评分≥8时血清SAA、IL-6、PCT水平均低于Apgar评分<7时的水平，差异有统计学意义，表明血清SAA、IL-6、PCT的表达对PPROM孕妇和新生儿均有影响。在胎膜早破发生时，病原菌上行感染，刺激胎膜和蜕膜产生大量IL-6，IL-6是由两种细胞共同产生的细胞因子，调节宿主防御感染，可全程参与妊娠过程，监测其水平对于预测胎膜早破有一定的作用[15]。随着炎症加重以及破膜时间延长，白细胞聚集增加，IL-6释放会进一步增加。SAA是由肝脏产生的多态性蛋白，与绒毛膜羊膜炎的发生有关[16]，PCT属于蛋白质，其水平高低反映全身炎症反应的活跃程度[17]，和SAA相似，当机体发生炎症反应时可在短时间内迅速升高，且随破膜时间延长，其含量也随之增加，表明其浓度与感染的严重程度相关。黄丽娇等[18]发现，PPROM孕妇逆行性宫内感染能诱导血清IL-6水平上升，一定程度上会促使炎症反应加重，故外周血IL-6对PPROM存在一定预测价值。冯冠男等[17]研究发现，PCT是评估胎儿和新生儿感染炎症的最佳指标。本研究结果显示，观察组血清SAA、IL-6、PCT水平均高于对照组，观察组绒毛膜羊膜炎发生率高于对照组，进一步证明血清SAA、IL-6、PCT水平对PPROM的影响。其原因可能是由于胎膜早破合并绒毛膜羊膜炎引起孕妇体内轻微的炎症反应，呈现出感染状态，孕妇体内血清SAA、IL-6、PCT均会快速产生。

综上所述，孕妇血清SAA、IL-6、PCT的表达水平受到PPROM的影响，与有其相关性，血清SAA、IL-6、PCT水平随着破膜时间的增加而增加、随着机体内炎症感染加重而增加，可对孕妇及新生儿产生不良影响，降低新生儿Apgar评分，同时可检测出绒毛膜羊膜炎的发生，所以可以作为监测PPROM的指标。但本研究采用的样本量偏少，今后应当加大样本量，进行多地域研究，以期为临床PPROM检测提供相关参考。