青少年首发广泛性焦虑障碍血清BDNF与IL-6的关系研究*

常宪鲁 王华云 周 军 陶 晟

广泛性焦虑障碍(Generalized Anxiety Disorder, GAD)是一种常见的精神疾病，表现为长期的焦虑、紧张和自主神经系统过度活跃，通常发病于青春期，整个人群中5.7%的人在其一生中会受到焦虑症状的影响[1]，使其家庭、社会和工作方面受到相当程度的损害，甚至导致残疾[2]。研究认为血清脑源性神经营养因子(Brain-Derived Neurotrophic Factor，BDNF)与焦虑样行为的发生密切相关，机制可能是BDNF在焦虑样症状和海马突触可塑性中起关键作用[3]。Polacchini A等[4]认为白细胞介素-6(IL-6)是慢性心理生理应激的生物标志物之一，Vogelzangs N等[5]研究表明促炎介质如IL-6与GAD发生相关，说明BDNF和IL-6都介入了GAD的病理机制，但BDNF和IL-6在青少年首发GAD中的关系亦未见到相关报道，为了解BDNF和IL-6在青少年GAD中的关系，本研究做了一些相关探讨，现报告如下。

1 对象与方法

1.1 对象 选取2018年1～12月在镇江市精神卫生中心儿童及心理咨询门诊就诊的青少年首发GAD患者。入组标准：(1)符合国际疾病分类第10版(ICD-10)GAD诊断标准；(2)首次发病，年龄在16～18岁之间；(3)排除伴有严重器质性疾病如甲状腺功能亢进、肝肾功能异常等；(4)排除有其他精神疾病如抑郁症、精神分裂症、品行障碍、物质滥用等；(5)未服用过精神科药物。整群抽取普通高中三年级2个班100名学生作为对照组，入组标准：无严重躯体疾病及精神障碍、物质滥用等。研究组收集GAD患者52例，其中男20例，女32例；平均年龄(17.54±0.75)岁。对照组100名，因填写数据明显有误剔除3名，剩余97名，其中男41名，女56名；平均年龄(17.67±0.51)岁。两组在性别构成、年龄等方面比较差异不存在统计学意义(P>0.05)，具有可比性。研究通过医院伦理委员会审批，所有入组对象均被告知课题研究目的，并为自愿参加本研究，且取得监护人知情同意。

1.2 方法

1.2.1 评估工具

1.2.1.1 焦虑自评量表(Self-Rating Anxiety Scale, SAS) 测评焦虑情绪状况，包含15项正向评分，5项反向评分，每个项目得分为1～4分，总分乘以1.25后取整数得出标准分，总分值越高表示患者焦虑越严重[6]。

1.2.1.2 学生生活应激问卷 选取Gadzella BM编制的学生生活应激问卷(Student-Life Stress Inventory, SLSI)，由王欣修订成中文版，共51个陈述题，由被试根据自己近3个月的情况，对每道陈述题进行选择，每个陈述题答案包括从来没有、很少、偶尔、经常和总是，分别评分1～5分，量表的Cronbach’s α系数为0.71。本研究采用各因子分值相加之后所得的总分，总分越高，被试所面临的生活应激及其产生的应激反应越大[7]。

1.2.1.3 匹兹堡睡眠质量指数量表(Pittsburgh Sleep Quality Index, PSQI) 量表由美国匹兹堡大学的精神科医生编制，被我国刘贤臣等[8]翻译为中文。该量表主要针对被调查者近1个月来的睡眠质量及其相关因素进行评估，为自测性调查问卷。共19个自评条目，总分>7分作为睡眠障碍的诊断标准，得分越高表示睡眠质量越差。本研究采用该量表的总分来进行比较分析。

1.2.2 施测方法 研究组均于门诊确诊后当天完成以上3个量表评定，为排除药物影响，当天均不给予药物，次日清晨空腹抽血。对照组抽血化验前1天进行相关量表评定，血清标本集中采集于学生升学体检时所采血样。所有受试者均为清早约8:00许抽取空腹静脉血5 ml静置，置于EDTA抗凝真空管中，高速离心10 min，取血清于-80 ℃冰箱保存，指标测定前避免反复冻融。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清BDNF、IL-6水平，所有样本采集结束后由同一人测定。试剂盒由上海锐品生物有限公司提供，严格按照试剂盒说明书操作。

1.2.3 统计学方法 采用SPSS 17.0进行统计学分析。计量资料的组间比较采用独立样本t检验，研究组不同年龄间血清BDNF、IL-6水平比较采用单因素方差分析，两连续变量之间的相关性采用Pearson相关分析，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 研究组男女之间血清BDNF、IL-6水平比较 研究组男性血清BDNF水平为(20.70±8.67)ng/ml，女性为(20.13±6.16)ng/ml，两者比较差异不存在统计学意义(t=2.74,P=0.79)。研究组男性血清IL-6水平为(2.87±1.63)pg/ml，女性为(4.18±3.84)pg/ml，两者比较差异不存在统计学意义(t=-1.70,P=0.10)。

2.2 研究组不同年龄之间血清BDNF、IL-6水平比较 根据单因素方差分析结果，研究组不同年龄之间血清BDNF、IL-6水平比较，差异均不存在统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 研究组不同年龄之间血清BDNF、IL-6水平比较

2.3 两组血清BDNF、IL-6水平及SAS、SLSI、PSQI评分比较 研究组血清BDNF、IL-6水平及 SAS、SLSI、PSQI评分均高于对照组(P<0.05)。见表2。

表2 两组血清BDNF、IL-6水平及SAS、SLSI、PSQI评分比较

2.4 血清BDNF、IL-6水平相关因素分析 将所有被试血清BDNF、IL-6水平与SAS、SLSI、PSQI评分进行相关性分析，发现BDNF水平与IL-6水平呈正相关(P<0.01)，SAS评分与SLSI、PSQI评分呈正相关(P<0.01)，SLSI评分与PSQI评分呈正相关(P<0.01)。见表3。

表3 血清BDNF、IL-6水平相关因素分析(r)

3 讨论

国内对BDNF和IL-6与GAD的关系研究较多，但多是其中单独一个因子与GAD之间关系的研究，对GAD患者中BDNF和IL-6之间关系的研究很少。本研究发现，青少年首发GAD患者男女之间、不同年龄之间BDNF、IL-6水平比较差异不存在统计学意义，但研究组BDNF及IL-6水平均高于对照组，说明未发现性别及年龄因素对BDNF和IL-6水平的影响，但BDNF及IL-6在青少年首发GAD患者血清中存在异常表达。有学者认为BDNF过度表达也会产生促进焦虑样行为的效应，BDNF过度表达的转基因鼠，易产生焦虑样行为[9]，国内沈鑫华等[10]研究显示首发GAD患者组BDNF浓度高于对照组。也有一些结果相反的报道，如国内王媛等[11]发现GAD患者血浆BDNF水平较健康对照组降低，李含秋等[12]也有类似发现，与本研究结果不一致，可能与年龄因素或首次发病有关。王媛等[11]及李含秋等[12]研究对象均为18～64岁成年人，病史及用药情况均与本研究不同，青少年身体正处于发育阶段，BDNF的分泌与中老年人可能不同。IL-6与GAD的关系与本研究多相同发现，焦虑越明显，IL-6水平越高。赵艳华[13]研究发现，66例GAD患者血清7项炎性因子(包括IL-6)水平均高于健康对照组，且炎症因子水平升高与焦虑程度呈正相关。叶刚等[14]发现首发GAD患者外周血IL-6水平高于健康对照组。冯婷婷等[15]研究发现，伴有明显焦虑症状的抑郁症患者IL-6水平高于非焦虑性抑郁症患者，Janszky I等[16]对大约5万名参与者平均37年的跟踪数据进行研究，发现焦虑症状是慢性炎症的一个重要预测因素。

本研究发现血清BDNF水平与IL-6水平之间存在正相关，虽然一般认为炎症过程和BDNF在脑内相互作用是消极的，但临床和体外研究显示，两者在脑外的相互作用是协同的，而不是拮抗，Patas K等[17]对重性抑郁症进行研究，结果发现血清BDNF水平和IL-6水平呈正相关。Hodes GE等[18]认为炎症机制增加不良情绪易感性，外周细胞因子的增加释放加剧了动物的焦虑和抑郁样行为。Patki G等[19]通过大鼠实验发现社交失败性焦虑会改变BDNF和IL-6在大脑特定区域的水平，如IL-6在海马和前额叶皮层的表达增加，而BDNF在杏仁核和伏隔核等部位水平升高，激活氧化应激诱导的炎症和细胞毒性，导致焦虑抑郁样行为。亦有相反的报道，如田涛等[20]研究发现抑郁症患者血清IL-6水平高于健康对照组，而血清BDNF水平低于对照组。综合以上研究，IL-6在情绪障碍中相对一致，而BDNF作用有不同认识，可能与研究样本不同有关。本研究结果表明在青少年首发GAD患者中炎症因子IL-6水平越高，BDNF水平亦越高，BDNF水平增多有可能作为一种保护因素而存在。

本研究未发现血清BDNF和IL-6水平与SAS、SLSI、PSQI评分之间的相关性，说明血清BDNF与IL-6可能是GAD的生物学特征，这与其他一些研究结果不同，如有动物实验发现应激大鼠血液中BDNF mRNA含量高于对照组，两者差异有统计学意义[21]。Alzoubi KH等[22]研究发现睡眠剥夺可降低BDNF水平，国内朱晓琴等[23]通过给大鼠侧脑室注射IL-6后发现大鼠大脑皮层及海马兴奋性神经递质谷氨酸较健康对照组升高，而γ-氨基丁酸下降，说明IL-6能够调节神经递质而影响神经功能。GAD往往会伴随生活应激事件增多，睡眠质量下降等，从相关性分析中也可以看出，SAS、SLSI、PSQI评分相关系数高，均达到非常相关程度，焦虑越明显，生活应激程度越重、睡眠质量越差，但BDNF、IL-6水平与这些因素未见到相关性，可能说明BDNF和IL-6是青少年GAD内源性的改变，也许有着内在的产生机制，另外也有可能与样本量有关，以后应进一步扩大样本量以评估上述因素之间存在的关系。

综上所述，本研究发现青少年首发GAD患者血清BDNF和IL-6水平均较健康对照升高，且两者之间存在相关性，说明两者共同参与了青少年GAD的病理生理过程，对研究GAD的发病机制有一定意义。