童年创伤对缓解期双相情感障碍患者血浆中lncRNA 51A表达及情绪认知功能的影响*

刘光伟 邓巧恩 赵 栋 綦 航 赵俊霞

双相情感障碍是一种临床表现复杂、重性、高致残性的精神疾病，其特点是发作频繁、自杀率高、病程长、疾病负担重等，其终生患病率在1.0%～2.4%[1]。由于生活压力、生活环境及遗传等因素，双相情感障碍患者在缓解期仍有残留症状，整体功能转归较差，影响复发等不良预后发生[2]。近年来关于缓解期双相情感障碍诊断和治疗研究较多，但由于患者临床症状复杂多变，探究其发生发展中相关影响因素和因子仍有重要意义。童年期创伤指发生在16岁以前的不良生活事件，包括童年忽视、虐待、亲情缺失等，与精神障碍发生有关[3]。Maria RD等[4]研究表明，童年期创伤对缓解期双相情感障碍患者情绪认知功能有显著影响。吕峥等[5]研究发现，长链非编码RNA 51A(Long non-coding RNA 51A，lncRNA 51A)在阿尔茨海默病患者血浆中表达水平高于健康对照组，可反映患者认知功能。由于lncRNA 51A在童年期创伤及双相情感障碍疾病中未有研究，本研究通过检测有童年创伤缓解期双相情感障碍患者血浆中lncRNA 51A水平，分析其与患者情绪认知功能关系，初步探究其在有童年创伤缓解期双相情感障碍进展中的意义。

1 对象与方法

1.1 对象 选取2018年3月～2019年11月石家庄市第八医院收治的缓解期双相情感障碍患者100例作为研究组，其中男63例，女37例，年龄18～65岁，平均(28.04±8.13)岁。根据儿童期创伤问卷评估将缓解期双相情感障碍患者分为有童年创伤组34例，无童年创伤组66例。纳入标准：(1)根据国际疾病分类第10版(ICD-10)[6]确诊为双相情感障碍；(2)患者临床症状消失>6个月，且汉密尔顿抑郁量表(Hamilton Depression Scale，HAMD)评分<8分[7]，杨氏躁狂量表(Young Mania Rating Scale，YMRS)评分<6分[8]；(3)能够完成量表和认知测查，右利手，且受教育年限≥9年。排除标准：(1)合并其他精神病性或显著躯体疾病所致精神障碍；(2)心、肾、肝脏功能严重不足者；(3)合并患有恶性肿瘤、严重脑疾病或其他躯体疾病；(4)有癫痫发作史或家族史。对照组为同期招募的自愿参加本研究的健康人100名，其中男61名，女39名，年龄17～63岁，平均(27.59±7.65)岁。所有受试者对本研究表示知情并签署知情同意书，本研究经相关伦理委员会批准同意。

1.2 方法

1.2.1 主要仪器和试剂 实时荧光定量(Quantitative Real-Time PCR，qRT-PCR)仪(型号：ABI 7500，美国ABI公司)，qRT-PCR试剂盒(货号：RR820A，大连宝生物公司)，总RNA提取试剂盒、反转录试剂盒(货号分别为：QN0926-EZK、ALH266-PTO，北京百奥莱博科技有限公司)。

1.2.2 童年创伤及情绪认知功能评估 根据儿童期创伤问卷进行各项童年创伤评估，包括情感虐待(Emotional Abuse，EA)、躯体虐待(Physical Abuse，PA)、性虐待(Sexual Abuse，SA)、情感忽视(Emotional Neglect，EN)和躯体忽视(Physical Neglect，PN)[9]。采用情绪面孔识别[10]进行患者情绪认知功能评估，记录患者对6种情绪表情(高兴、悲伤、愤怒、惊讶、恐惧、厌恶)的识别正确率，每种表情30张图片(选自北京师范大学心理研究中心编制的中国人情绪面孔图片库)。

1.2.3 qRT-PCR法检测血浆lncRNA 51A表达水平 所有受试者于入组后清晨(7:00～9:00)空腹状态下采集外周静脉血5 ml，静置于EDTA-K2抗凝管中20 min后在3 000 r/min条件下离心10 min，分离上层清液(即血浆)至新EP管中，-80 ℃保存备用。使用试剂盒提取总RNA后，经反转录获得cDNA，于-20 ℃保存，用于qRT-PCR实验。20 μl反应体系如下：10 μl SYBR©Mix Taq II，2 μl cDNA，0.4 μl ROX，0.8 μl上游引物，0.8 μl下游引物，6.0 μl ddH2O。具体反应步骤如下：95 ℃ 32 s，1循环；95 ℃ 5 s，61 ℃ 33 s，40循环。每个样本重复3次，用2-ΔΔCT法计算lncRNA 51A表达水平，所用引物如表1所示。GAPDH作为内参基因。引物由宝生物工程(大连)有限公司合成。

2 结果

2.1 研究组和对照组一般资料比较 研究组与对照组年龄、性别、民族、婚姻状况、受教育年限、身体质量指数(BMI)、吸烟、饮酒比较，差异均无统计学意义(P>0.05)，研究组HAMD、YRMS评分均高于对照组(P<0.05)。见表2。

表2 研究组和对照组一般资料比较

2.2 研究组和对照组童年创伤评分及情绪认知功能比较 研究组儿童期创伤问卷总分及EA、PA、SA、EN、PN评分均高于对照组(P<0.05)，研究组情绪面孔识别中对悲伤、愤怒、高兴、惊讶、恐惧、厌恶识别的正确率均低于对照组(P<0.05)。见表3。

表3 研究组和对照组童年创伤评分及情绪认知功能比较

2.3 有童年创伤组和无童年创伤组童年创伤评分及情绪认知功能比较 有童年创伤组儿童期创伤问卷总分及EA、PA、SA、EN、PN评分均高于无童年创伤组(P<0.05)，情绪面孔识别中对悲伤、愤怒、高兴、惊讶、恐惧、厌恶识别正确率均低于无童年创伤组(P<0.05)。见表4。

表4 有童年创伤组和无童年创伤组童年创伤评分及情绪认知功能比较

2.4 不同组别血浆lncRNA 51A表达水平比较 研究组血浆lncRNA 51A表达水平高于对照组[(4.65±1.32)vs(1.02±0.33)，t=26.679，P=0.000]；有童年创伤组血浆lncRNA 51A表达水平高于无童年创伤组[(5.64±1.73)vs(3.42±1.11)，t=7.784，P=0.000]。

2.5 研究组血浆lncRNA 51A表达水平与童年创伤评分、情绪认知功能的相关性分析 研究组血浆中lncRNA 51A水平与儿童期创伤问卷EA、SA、PA评分均呈正相关(P<0.05)，与悲伤识别、恐惧识别正确率均呈负相关(P<0.05)。见表5。

表5 研究组血浆lncRNA 51A表达水平与童年创伤评分、情绪认知功能的相关性

2.6 发生缓解期双相情感障碍的危险因素分析 以本研究资料为样本，以缓解期双相情感障碍是否发生为因变量(发生=1，未发生=0)，以差异有统计学意义的HAMD评分、YRMS评分及lncRNA 51A水平、童年创伤为自变量建立Logistic回归模型。结果可知，高HAMD评分、高YRMS评分、高lncRNA 51A水平、童年创伤是影响缓解期双相情感障碍发生的危险因素(P<0.05)。见表6。

表6 影响缓解期双相情感障碍发生的危险因素分析

3 讨论

双相情感障碍可表现为抑郁发作、狂躁发作及混合发作。抑郁发作时患者出现情绪低落、睡眠增加、体质量增加、易激惹、更多的自杀欲望和共病焦虑，狂躁发作时患者出现心境高涨、活动增多、思维奔逸、精力充沛、意志行为增强等，混合发作时狂躁症状和抑郁症状在同一时间出现。以上症状通过干扰患者生理和心理状态，影响患者生活质量和生命安全[11]。探寻双相情感障碍发生发展中相关生物标志物，对控制疾病进展有一定价值。

lncRNA是一类长度大于200 nt的具有调控功能的非编码RNA，参与多种疾病进展。Tomoe S等[12]研究发现，lncRNA在大脑中表达异常时可通过影响神经调节过程参与调控抑郁症发生发展。余天浩等[13]研究表明，冠心病合并抑郁患者血清lncRNA LIPCAR表达水平高于冠心病组和对照组，且与抑郁症严重程度有关。有研究报道[14]，lncRNA NONHSAT在精神分裂症外周血中表达水平升高，可能与患者多巴胺信号通路调控密切相关。以上研究提示，lncRNA可能与精神疾病进展有关。

lncRNA 51A是分拣蛋白相关受体1(Sortilin-related Receptor 1，SORL1)内含子1的反义链[15]。Shamseddin A等[16]研究发现，lncRNA 51A可通过参与神经原纤维缠结在阿尔茨海默病中起重要作用。Han Z等[17]研究报道，阿尔茨海默病患者大脑中lncRNA 51A表达上调，SORL1表达下调，与疾病发生有关。本研究结果显示，研究组血浆lncRNA 51A表达水平升高，高于对照组，与Han Z等[17]在阿尔茨海默病中研究结果相似。有研究表明，HAMD、YMRS评分升高与稳定期双相情感障碍患者认知功能下降有关[18]。本研究结果显示，与对照组相比，研究组HAMD、YRMS评分均升高，且情绪面孔识别对悲伤、愤怒、高兴、惊讶、恐惧、厌恶识别正确率均降低，与朱颀峰等[19]研究结果相似，提示缓解期双相情感障碍患者情绪认知功能下降。Blechingberg J等[20]研究证实，SORL1水平与阿尔茨海默病发生风险有关，SORL1可通过调节海马静息状态功能连接影响阿尔茨海默病发展。有研究表明[21]，SORL1可能通过促进患者认知功能障碍，加速帕金森患者痴呆发生。lncRNA 51A可能靶向SORL1调控Aβ蛋白表达，进而诱发阿尔茨海默病[20]。根据过往研究推测lncRNA 51A可能通过影响SORL1表达，调节海马功能，促进患者情绪认知功能障碍发展，参与缓解期双相情感障碍进展。但具体机制尚需大量实验验证和研究。

Etain B等[22]研究报道，童年创伤如性虐待、身体虐待与双相情感障碍中自杀企图、药物滥用症状发生有关。本研究结果显示，研究组儿童期创伤问卷总分及EA、PA、SA、EN、PN评分均高于对照组，提示童年创伤可能促进缓解期双相情感障碍发生。进一步研究发现，有童年创伤组儿童期创伤问卷总分及EA、PA、SA、EN、PN评分均高于无童年创伤组，且情绪面孔识别对悲伤、愤怒、高兴、惊讶、恐惧、厌恶识别正确率均低于无童年创伤组，提示童年创伤可能影响缓解期双相情感障碍患者的情绪认知功能。有童年创伤组血浆lncRNA 51A表达水平高于无童年创伤组，且研究组血浆中lncRNA 51A水平与EA、SA、PA评分均呈正相关，提示lncRNA 51A可能通过反映EA、SA、PA水平预示缓解期双相情感障碍患者童年创伤水平。

本研究还发现，研究组血浆中lncRNA 51A水平与悲伤识别、恐惧识别正确率呈负相关，且高HAMD评分、高YRMS评分、高lncRNA 51A水平、童年创伤是影响缓解期双相情感障碍发生的危险因素。提示lncRNA 51A可能通过反映缓解期双相情感障碍患者童年创伤水平，为评估患者情绪认知功能及患病水平提供一定帮助。

综上所述，缓解期双相情感障碍患者血浆lncRNA 51A表达水平升高，与EA、SA、PA等童年创伤评分及悲伤识别、恐惧识别正确率等情绪认知功能评价有关，可能作为有童年创伤缓解期双相情感障碍发生影响因素，为临床诊断和治疗提供一定理论依据。但由于本研究样本量较少，研究方法较为基础，具体机制尚需进一步深入研究。