HPLC法定量分析22%苯·五氟·硝水分散片剂

彭 丽，周玉良

(山东胜邦绿野化学有限公司，山东 济南 250204)

22%苯·五氟·硝磺水分散片剂是由苯噻酰草胺、五氟磺草胺和硝磺草酮的混配制剂，主要用于防除水稻移栽田一年生杂草，其中五氟磺草胺作为稻田广谱除草剂，可有效防除稗草、千金以及一年生莎草科杂草，并对众多阔叶杂草有效[1]。本品用于水稻移栽后，稻苗彻底返青期，均匀撒施，不仅可高效防除我国水稻田主要杂草，而且使用方便，省工省时，与我国当前农业生产相适应。水分散片剂(WDT)是20世纪末在水分散性粒剂(WDG)[2]、片剂(T)[3]以及泡腾片剂(EVT)[4]基础上研发出来的农药固体新剂型，集三者优点于一身，同时对环境友好，三种组分同时分析检测未见报道。

采用高效液相色谱外标法分析22%苯·五氟·硝水分散片剂中各有效成分，结果表明，该方法操作简便，快速，重现性好。定量准确易于车间大批量生产检测。

1 实 验

1.1 仪 器

仪器：1260 Infinity Ⅱ高效液相色谱仪，安捷伦；检测器：紫外检测器。

色谱柱：ZORBAX SB-C18(250×4.6 mm，5 μm)不锈钢柱；数据处理：安捷伦Chemstation工作站；过滤器：滤膜孔径约0.45 μm。

1.2 试剂和溶液

乙腈(色谱纯)；水(新蒸二次蒸馏水)；磷酸(分析纯)；苯噻酰草胺标样(已知准确质量分数，≥98.0%)；五氟磺草胺标样(已知准确质量分数，≥98.0%)；硝磺草酮标样(已知准确质量分数，≥98.0%)；22%苯·五氟·硝水分散片剂样品，山东胜邦绿野化学有限公司。

1.3 色谱操作条件

流动相：乙腈+水=50+50(磷酸调pH 3.0)(V/V)；流速：1.0 mL/min；柱温：室温；

波长：254 nm；进样量：10 μL；

保留时间：硝磺草酮约4.8 min；五氟磺草胺约6.5 min；苯噻酰草胺约11.8 min。

图1 硝磺草酮、五氟磺草胺和苯噻酰草胺样品液相色谱图

上述液相色谱条件系典型操作参数，可根据不同仪器特点对给定操作参数做适当调整，以期获得最佳效果。

1.4 测定步骤

1.4.1 标样溶液的配制

准确称取0.0125 g(精确至0.0002 g)五氟磺草胺标样和0.0375 g(精确至0.0002 g)硝磺草酮标样置于两个25 mL容量瓶中，向两个容量瓶中分别加入约20 mL乙腈，放在超声波中处理10 min，取出冷至室温。用乙腈稀释至刻度，摇匀；准确称取0.045 g(精确至0.0002 g)苯噻酰草胺标样于50 mL容量瓶中，用移液管准确移取5 mL五氟磺草胺标样溶液和5 mL硝磺草酮标样溶液于此容量瓶，用乙腈稀释至刻度，摇匀备用。

1.4.2 试样溶液的配制

准确称取约含0.045 g(精确至0.0002 g)苯噻酰草胺的试样，置于50 mL容量瓶中，向容量瓶中加约20 mL乙腈，放在超声波中处理10 min，取出冷至室温。用乙腈稀释至刻度，摇匀过滤后备用。

1.4.3 测定

在上述液相色谱操作条件下，待仪器基线稳定后，连续注入数针标样溶液，直到相邻两针苯噻酰草胺(五氟磺草胺、硝磺草酮)峰面积相对变化小于1.0%为止，按照标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液的顺序进行测定。

1.4.4 计 算

将测得的两针试样溶液及试样前后两针标样溶液中苯噻酰草胺(五氟磺草胺、硝磺草酮)峰面积，分别进行平均。

试样中苯噻酰草胺(五氟磺草胺、硝磺草酮)质量分数X1(%)按式(1)计算：

(1)

式中：A1——标样溶液中苯噻酰草胺(五氟磺草胺、硝磺草酮)峰面积的平均值

A2——试样溶液中苯噻酰草胺(五氟磺草胺、硝磺草酮)峰面积的平均值

m1——苯噻酰草胺(五氟磺草胺、硝磺草酮)标样的质量，g

m2——试样的质量，g

P——标样中苯噻酰草胺(五氟磺草胺、硝磺草酮)的质量分数，%

2 结果与讨论

2.1 流动相的选择

色谱柱选用常用的反相填料C18柱，选用乙腈+0.05%磷酸水溶液为流动相[5]，以及甲醇+水为流动相，经过多次试验，最终以乙腈+水=50+50(磷酸调pH 3.0)(V/V)流动相，流速为1.0 mL/min，苯噻酰草胺、五氟磺草胺和硝磺草酮能得到较好的分离，而且峰形好，保留时间短。

2.2 检测波长的选择

通过高效液相色谱仪DAD检测器3D光谱数据采集，得到三者的紫外吸收光谱图(图2)，再综合考虑样品检测用溶剂、仪器以及杂质的影响，采用254 nm为三种物质同柱分析的检测波长。

图2 硝磺草酮、五氟磺草胺和苯噻酰草胺紫外吸收光谱图

2.3 线性相关性

取苯噻酰草胺、五氟磺草胺和硝磺草酮标准品分别配制5种不同浓度的标准溶液，在上述液相色谱条件下分别测定，以不同浓度下苯噻酰草胺、五氟磺草胺和硝磺草酮的峰面积为纵坐标，其对应的苯噻酰草胺、五氟磺草胺和硝磺草酮称样量为横坐标做线性回归曲线。得到苯噻酰草胺回归方程为y=15262x+298.2，相关系数为0.9996；五氟磺草胺回归方程为y=8668.7x+58.118，相关系数为0.9991；硝磺草酮回归方程为y=22859x-19.135，相关系数为0.9997。

表1 精密度测定结果

2.4 精密度实验

对同一样品，按照上述分析检测方法，连续进行五次测定，分别计算有效成分的质量分数、平均值及相对标准偏差，并考察方法的精密度。得到苯噻酰草胺、五氟磺草胺和硝磺草酮质量分数的标准偏差分别为0.05、0和0.05，变异系数为0.27%、0和1.61%。

2.5 准确度试验

表2 回收率测定结果

将除原药以外的所有助剂混匀，作制剂空白。然后，按制剂标称值在制剂空白中添加有效成分，合成5个制剂样品，再按照上述分析方法测定质量分数，计算回收率，测得苯噻酰草胺的平均回收率为99.56%，五氟磺草胺的平均回收率为99.58%，硝磺草酮的平均回收率为99.43%。

3 结 论

本方法以乙腈+水=50+50(磷酸调pH 3.0)(V/V)溶液为流动相，在同一高效液相色条件下测定复配制剂中苯噻酰草胺、五氟磺草胺和硝磺草酮的质量分数，其检测结果的线性关系、精密度和准确度均能满足生产中分析检测的要求，并且具有分离效果好，不受杂质干扰，而且还有快速、简便和准确的特点，是一种非常实用且有效的分析检测方法。