电感耦合等离子体质谱法测定丙泊酚注射液中有害元素含量*

2021-04-16高亚乾杜文力

中国药业 2021年7期

郑颖，白靖，梁平，高亚乾，杜文力，冯锐

（河北医科大学第四医院药学部，河北石家庄050011）

丙泊酚注射液为短效静脉麻醉药，起效快，广泛用于临床麻醉［1-3］，其中含有的有害元素是临床主要风险来源。重金属在人体易与酶蛋白结合，使蛋白质失去活性，损伤人体组织细胞，过量摄入某些重金属会对人体产生危害［4-6］。因此，建立一种快速检测丙泊酚注射液中铜(Cu)、砷(As)、镉(Cd)、汞(Hg)、铅(Pb)5种有害元素含量的方法十分重要。电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）法灵敏度高、线性范围宽，可同时测定多元素，已成为痕量有害金属离子检测的首选方法［7-9］。本研究中采用ICP-MS技术检测丙泊酚注射液中有害元素的含量，以保障临床用药安全。现报道如下。

1 仪器与试药

1.1 仪器

安捷伦7700型电感耦合等离子体质谱仪，配安捷伦SPS4 Autosampler型自动进样器（美国安捷伦公司）；Mars型高压微波消解仪（美国CEM公司）；Millpore Milli-QIQ7000型超纯水机（德国默克密理博公司）。

1.2 试药

铅（Pb）标准溶液（纯度为1 000μg/mL，批号为GSB04-1742-2004），镉（Cd）标准溶液（纯度为1000μg/mL，批号为GSB 04-1721-2004），铜（Cu）标准溶液（纯度为1 000μg/mL，批号为GSB 04-1725-2004），砷（As）标准溶液（纯度为1 000μg/mL，批号为GSB 04-1714-2004），汞（Hg）标准溶液（纯度为1 000μg/mL，批号为GSB 04-1729-2004），金（Au）标准溶液（纯度为1 000μg/mL，批号为GSB 04-1715-2004），铟（In）标准溶液（纯度为1 000μg/mL，批号为GSB 04-1731-2004），铋（Bi）标准溶液（纯度为1 000μg/mL，批号为GSB 04-1719-2004），锗（Ge）标准溶液（纯度为1 000μg/mL，批号为GSB 04-1728-2004），均购自国家有色金属及电子材料分析测试中心；水为纯化水，硝酸为优级纯，其他试剂均为化学纯；丙泊酚注射液（西安力邦制药有限公司，批号分别为1412262，1505141，1412253，1505112，1503142，规格为20 mL∶0.2 g）。

2 方法与结果

2.1 ICP-MS工作条件

仪器最佳工作参数见表1。

表1 仪器工作参数Tab.1 The working parameters of the instruments

2.2 溶液制备

内标溶液：精密量取Ge，In，Bi标准溶液各0.1 mL，置100 mL容量瓶中，分别用水稀释成质量浓度为1μg/mL的标准溶液。

标准金溶液：精密量取Au标准溶液0.1 mL，置100 mL容量瓶中，用2%硝酸稀释成质量浓度为1μg/mL的溶液。

供试品溶液：精密量取样品0.3 mL，加入硝酸7 mL，置微波消解仪中消解完全，冷却后取出，精密加入Au标准溶液0.2 mL，用2%硝酸稀释至50 mL，摇匀，即得。如样品中测定结果超出线性范围，则用2%硝酸适当稀释后，进行测定。同法配制空白溶液。

2.3 方法学考察

线性关系考察：分别精密量取Pb标准溶液和As标准溶液各50μL，Cd标准溶液25μL，Cu标准溶液500μL，置50 mL容量瓶中，用2%硝酸定容至刻度，作为标准贮备液A。精密量取Hg标准溶液50μL，置50 mL容量瓶中，用2%硝酸定容至刻度，作为标准贮备液B。精密量取标准贮备液A和B适量，用2%硝酸配制成每1 mL含Pb 1，5，10，20 ng，含Cd 0.5，2.5，5，10 ng，含As 1，5，10，20 ng，含Cu 10，50，100，200 ng，含Hg 0.2，1，2，5 ng的系列质量浓度标准溶液。按仪器最佳工作条件进行测定，量取内标溶液和标准溶液同时进样（ICP是蠕动泵进样，无进样体积），依次测定，以测量值（Y）为纵坐标、质量浓度（X，μg/mL）为横坐标绘制标准曲线。结果见表2。

表2 5种有害元素线性关系、检测限和定量限考察结果Tab.2 Linear relationship，limit of detection and limit of quantitation of five harmful elements

检测限和定量限确定：照样品前处理方法，依法测定，样品空白溶液重复进样11次，以测定浓度标准偏差（SD）的3倍为检测限，以测定浓度标准偏差（SD）的10倍为定量限。结果见表2。

精密度试验：选取分别含Pb，As，Cd，Cu，Hg 10，10，5，100，2 ng的标准溶液，重复进样6次，结果Pb，Cd，Cu，As，Hg含量的RSD分别为1.40%，1.17%，1.09%，1.78%，1.46%(n=6)，表明仪器精密度良好。

回收率和重复性试验：取样品适量，精密量取0.3 mL，共18份，分别置50 mL消解管中，各6份，平行测定3组，分别精密加入标准贮备液A 250，500，750μL，标准贮备液B 50，100，150μL，按2.2项下方法制备低、中、高3个浓度水平的供试品溶液，各6份，分别进样测定，并计算回收率。结果见表3。

2.4 样品含量测定

取样品(批号分别为1411242，1505133，1412233，1409162，1505131)，按2.1项下工作条件进行测定，按标准曲线计算各元素浓度，得各元素对应含量。结果见表4。

3 讨论

有害元素如Pb，Cd，As，Cu，Hg等可通过土壤、水和环境的污染，对大豆、鸡蛋等造成吸收污染，通过注射液危害人体健康。丙泊酚注射液由大豆油、蛋黄卵磷脂、甘油和注射用水组成［10］，故检测有害元素十分必要。

相较于湿法、干法等传统样品消解方法［11］，微波消解法操作简单、高效，酸用量少，不易污染，在元素分析中应用广泛［12］。重金属限量检查法除了有主观的目测颜色比对相关的明显误差外，不能给出单个元素浓度，且也不能测定一些常用元素［13］。

本研究中采用ICP-MS法测定样品中Pb，Cd，As，Cu，Hg 5种有害元素的含量，方法简便，回收率在规定范围内，精密度高，重复性好，与标准方法测定结果基本一致［14］。丙泊酚注射液中Pb，Cd，As，Cu，Hg的含量较低，均在标准限度范围内［15］。本研究结果能为保障丙泊酚注射液的质量和临床用药安全提供参考。