ELISA法和RIA法在检测系统性红斑狼疮抗双链DNA抗体中的效果对比

河南省范县人民医院（457500）孙文顺

系统性红斑狼疮（SLE）是常见的一类自身免疫疾病，会导致机体多器官受累，目前尚无根治方案。SLE患者会产生针对组织蛋白及核酸的特殊抗体，目前抗双链DNA（抗dsDNA）抗体已经成为了诊断SLE及判别SLE病情活动的重要指标[1]。目前抗dsDNA抗体的检测方案包括酶联免疫吸附试验（ELISA）、放射免疫分析（RIA）、间接免疫荧光法（CLIFT）等，有研究证实RIA法在检测抗dsDNA抗体水平上有着较高的阳性率，但该方案具有一定的污染性，临床应用受限[2]，也有研究认为RIA法与疾病活动情况有关。ELISA法多作为SLE的一个筛选方案，在抗dsDNA抗体检测上开展有限[3]。本文就ELISA法和RIA法在检测SLE患者抗dsDNA抗体上的诊断效能进行了研究对比，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 研究对象选取为2016年3月～2019年12月之间我院186例SLE患者、183例其他自身免疫疾病患者（非SLE）、78例非自身免疫疾病者和50例健康体检者，分别设为SLE组、其他自身免疫疾病组、非自身免疫疾病组、对照组。研究通过伦理委员会审批。SLE组患者包括男性5例，女性181例，年龄19～57岁，平均（35.7±9.6）岁；其他自身免疫疾病组患者包括干燥综合征98例，类风湿性关节炎51例，混合性结缔组织病11例，皮肌炎7例，多发性肌炎3例，其他13例，该组有男性13例，女性170例，年龄18～59岁，平均（39.4±7.6）岁；非自身免疫疾病组包括支气管哮喘34例，肺炎12例，冠心病23例，肝硬化5例，消化道炎症4例，该组有男性7例，女性71例，年龄18～69岁，平均（44.1±7.8）岁；对照组包括男性5例，女性45例，年龄20～53岁，平均（38.1±7.8）岁。各组受检者基本资料（性别、年龄）可比（P＞0.05）。

附表1 两种检验方案对各组患者抗dsDNA抗体阳性率的检测结果对比[n(%)]

附表2 两种检验方案在抗dsDNA抗体检测上的诊断效能对比（%）

1.2 纳入及排除标准 纳入标准：①年龄≥18岁；②符合1997年SLE分类标准及相关疾病诊断；③受检者知情同意。排除标准：①诊断未明者；②资料不全者；③中途退出研究者。

1.3 方法 所有对象均分别采用ELISA法和RIA法进行血清抗dsDNA抗体的检测。抽取受检者清晨空腹静脉血5ml，3000r/min条件下离心15min，取血清保存于-80℃环境下待检。ELISA法试剂盒由爱尔兰Trinity Biotech公司提供，RIA法试剂盒由上海万方金科生物科技有限公司提供。所有受试者血清样本收集完成后，同时进行样本抗dsDNA抗体水平的测定，实验开始前将标本与试剂盒提前取出，待恢复室温后开始试验，过程严格按照试剂说明书进行，确保实验环境、设备均符合检验要求。对比两种检验方案在不同组别中的阳性率，对比两种检验方案的诊断效能，并对两种检验结果进行一致性分析。

1.4 统计学方法 所有数据均录入SPSS23.0软件进行处理，计数资料用%表示，组间、组内技术资料对比均用χ2，两种检验方法的一致性分析采用Kappa检验，检验水平α=0.05。

2 结果

2.1 阳性率对比抗dsDNA抗体阳性率检测结果显示，RIA法检测SLE组、其他自身免疫疾病组、非自身免疫疾病组、对照组的阳性率分别为47.3%、23.5%、1.3%、0，ELISA法检测结果分别为62.9%、31.1%、0、0，两种检验方案SLE组的阳性率均显著高于其他组（P＜0.05），且ELISA检出阳性率显著高于RIA（P＜0.05）。见附表1。

2.2 诊断效能对比 诊断效能对比结果显示，两种检验方案在特异性、阳性预测值、阴性预测值对比上无显著差异（P＞0.05），但ELISA法的敏感性为62.9%，显著高于RIA法的47.3%，差异具有统计学意义（P＜0.05）。见附表2。

2.3 一致性检验 RIA法检测阳性例数132例，阴性例数365例，ELISA法检测阳性例数174例，阴性例数323例，一致性检验结果显示，两种检验方案中度一致（Kappa系数=0.629）。

3 讨论

上世纪60年代Ceppelini等人的研究首次发现SLE患者血清中的抗dsDNA抗体，在之后不断的研究中，对抗dsDNA抗体的认识不断加深，目前已经成为了SLE诊断的主要依据[4]。抗dsDNA抗体会随着SLE患者疾病活动度进行浮动，因此不但能作为诊断依据，同时还可作为疾病评估、疗效评估的重要依据。因此，选择合适的方案进行抗dsDNA抗体的准确检测，是十分必要的。RIA法和ELISA法都是临床常用的抗dsDNA抗体检测方案，从本次研究数据来看，两种检测方案对SLE患者的抗dsDNA抗体检出率均显著高于其他组别，这说明两种方案对于自身免疫疾病的诊断均有一定的应用价值，尤其在SLE诊断上预警价值较高。在进一步的诊断效能对比上来看，两种检验方案均有较高的特异性，但ELISA法的敏感性要明显高于RIA法，这说明前者对SLE患者的抗dsDNA抗体检测亲和力较高，在筛查上有着更高的诊断价值。从一致性分析结果来看，两种检验方案中度一致。本次的检验结果与Mahler等人的研究一致[5]，但也有学者研究结果显示，RIA法在SLE患者抗dsDNA抗体检测上敏感性要略高于ELISA法[6]，考虑原因可能受到样本量及不同厂商试剂等因素的影响，还需要进一步深入研究。

综上所述，两种检验方案在SLE患者的抗dsDNA抗体检测上均有较好效果，可帮助进行SLE病情活动情况的监测，ELISA法检验敏感性更好，更具有应用价值。