急性肾盂肾炎清洁中段尿病原菌培养及药敏试验结果分析

王建军，郭静

(洛阳市第三人民医院 检验科，河南 洛阳 471002)

急性肾盂肾炎属临床常见泌尿系统感染性疾病，与病原菌侵犯肾盂导致肾盂黏膜、肾实质及其他周围组织损伤有关，起病急骤，可使患者出现发热、腹部疼痛、尿频、尿痛等多种临床症状，需及时给予有效治疗[1-2]。既往临床研究发现，急性肾盂肾炎病原菌分布较为复杂，且不同菌种对各类型抗菌药物耐药情况存在一定的差异性，明确病原菌分布特点及耐药性情况对针对性抗菌方案的制定具有重要指导性作用[3]。本研究采用尿标本培养及药敏试验分析急性肾盂肾炎病原菌分布情况及不同菌种对各类抗菌药物耐药性。

1 资料与方法

1.1 一般资料

1.1.1研究对象 选取2018年10月至2019年 10月洛阳市第三人民医院治疗的急性肾盂肾炎患者88例，其中男39例，女49例；年龄18～67岁，平均(42.77±11.79)岁；病程4～9 d，平均(6.31±1.12)d；合并糖尿病31例，合并脑血管疾病25例，合并尿路结石8例。

1.1.2纳入及排除标准 (1)纳入标准：①经临床症状、实验室检查等确诊为急性肾盂肾炎；②存在发热、尿急、尿频等临床症状；③尿检结果显示尿沉渣白细胞增多，白细胞酯酶试验结果呈阳性，存在白细胞管型；④中段尿培养菌落数>105·mL-1；⑤知情并签署同意书。(2)排除标准：①临床资料不完整；②尿液标本采集前3 d内使用过抗菌药物治疗；③合并精神疾病，无法配合有效取样；④全身状态欠佳，需非经口营养维持。

1.2 方法

1.2.1清洁中段尿病原菌培养 (1)样本采集：采用肥皂水、新洁尔灭水溶液常规清洗消毒外阴，无菌纱布擦干后以无菌尿杯留取开始排尿将尿道干净冲洗后的清洁中段尿做尿液标本，并及时送检。(2)病原菌培养：将1 μL混匀未离心尿液标本接种于麦康凯平板，置于35 ℃恒温CO2培养箱中进行病原菌培养，培养操作均由高资质检验专科人员依照临床微生物学检验技术规范进行。培养成功后将病原菌分离，采用全自动微生物鉴定仪(法国梅里埃，VITEK 2 Compact)进行菌种鉴定。

1.2.2药敏试验 取1 d内分离菌种以K-B纸片法进行药敏试验，均于室内质量控制合格条件下实施试验全过程操作，所有纸片均购自北京天坛生物制品厂，且严格依照说明书进行结果判读。质控菌株包括大肠埃希菌ATCC25922、金黄色葡萄球菌ATCC25923、屎肠球菌ATCC3566、铜绿假单胞菌ATCC27853等。

1.2.3观察指标 (1)病原菌分布情况。(2)主要病原菌对抗菌药物耐药情况。(3)产超广谱β-内酰胺酶(extended spectrum β-lactamases，ESBLs)菌株耐药性情况。

2 结果

2.1 病原菌分布情况88例患者清洁中段尿标本经培养共分离出病原菌78株，其中革兰阴性菌41株，占52.56%(41/78)，包括大肠埃希菌31株，占39.74%(31/78)，肺炎克雷伯菌5株，占6.41%(5/78)，铜绿假单胞菌3株，占3.85%(3/78)，其他2株，2.56%(2/78)。革兰阳性菌37株，占47.44%(37/78)，包括金黄色葡萄球菌20株，占25.64%(20/78)，粪肠球菌15株，19.23%(15/78)，其他2株，占2.56%(2/78)。

2.2 主要病原菌对抗菌药物耐药情况大肠埃希菌对头孢曲松、头孢噻肟耐药率较高，分别为83.87%和77.42%；金黄色葡萄球菌对庆大霉素、青霉素耐药率较高，分别为65.00%和60.00%；粪肠球菌对青霉素耐药性较高，为73.33%。见表1。

表1 主要病原菌对抗菌药物耐药情况(n，%)

2.3 产ESBLs菌株耐药性情况抗感染治疗过程中，大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌易变成产ESBLs菌株，进而产生更强耐药性。病原菌分离鉴定结果显示，31株大肠埃希菌中，18株为产ESBLs菌株；5株肺炎克雷伯菌中，4株为产ESBLs菌株。药敏试验结果可见，产ESBLs菌株对头孢曲松、头孢噻肟、头孢呋辛、头孢唑林、氨苄西林耐药率较高，均为100.00%，对亚胺培南、美罗培南、阿米卡星、替加环素耐药性较低，均为0。见表2。

表2 产ESBLs菌株对抗菌药物耐药情况(n，%)

3 讨论

急性肾盂肾炎是由病原菌侵袭肾小管、肾间质、肾盂黏膜等部位所引起的炎症疾病，成年女性发病率较高，且多为单侧[4]。急性肾盂肾炎病灶局部供血不足，存在局部淋巴回流障碍，肾实质变性可引起脂质代谢异常，进而引起局部炎症反应，此外，尿路结石、阻塞还可进一步加重感染，需及时采取有效治疗措施控制感染，以免对肾实质产生持续性破坏[5]。

既往临床研究显示，急性肾盂肾炎致病菌多为大肠埃希菌，且女性发病率高于男性，与女性尿道短、尿道口与肛门距离近等生理结构差异有关，使病原菌更易入侵并黏附定植于泌尿道，引起急性炎症反应，造成肾损伤[6-7]。本研究采集急性肾盂肾炎患者清洁中段尿标本进行病原菌培养及药敏试验，结果显示，88例患者尿标本经培养共分离出病原菌78株，其中革兰阴性菌41株，所占比例为52.56%，革兰阳性菌37株，所占比例为47.44%，主要病原菌包括大肠埃希菌39.74%、金黄色葡萄球菌25.64%、粪肠球菌19.23%，大肠埃希菌对头孢曲松、头孢噻肟耐药率较高，分别为83.87%、77.42%，金黄色葡萄球菌对庆大霉素、青霉素耐药率较高，分别为65.00%、60.00%，粪肠球菌对青霉素耐药性较高，为73.33%，说明大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、粪肠球菌是急性肾盂肾炎主要病原菌，且耐药形势严峻。药敏试验结果显示，主要病原菌对阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦耐药率均处于相对较低水平，可为临床合理用药提供一定参考。同时治疗期间还应严格控制用药剂量，动态监测血药浓度，保证用药安全性，可适当增加用药方案，避免长期使用同种抗菌药物造成耐药情况发生。在常规抗感染治疗中，大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌易变异产生ESBLs菌株[8]。本研究22株ESBLs菌株对头孢曲松、头孢噻肟、头孢呋辛等头孢菌素类药物均产生耐药性，对亚胺培南、美罗培南、阿米卡星、替加环素耐药性较低，为保证治疗效果，防止耐药性进一步增加，临床应明确病原菌分布，同时参考病原菌耐药性结果选择合适抗菌药物实施治疗，避免抗生素滥用。

综上可知，大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、粪肠球菌是急性肾盂肾炎主要病原菌，且耐药形势严峻，规范实施尿液标本病原菌培养及药敏试验对临床抗菌药物合理使用具有重要指导意义。