气相色谱法测定蔬菜中10种有机磷农药残留分析

李新梅

（常州市金坛区农业农村局 江苏常州213200）

随着生活水平的提高，人们的食品安全意识在增强，蔬菜质量安全问题也备受关注。果蔬的种植需要农药的支持，但如果在种植时农药使用过多就会造成果蔬中农药残留。当它的残留量高于最大残留限量时，会对人体健康造成不利影响[1]。有机磷农药是一类含磷元素的有机化合物农药，因其高效性、广谱性而被广泛应用于植物病虫草害的防治。在生产中，因有机磷农药的使用不当，导致蔬菜中发生不同程度残留的问题客观存在。因此，开展蔬菜中有机磷农药残留监测工作，及时、准确的检测残留农药，对蔬菜安全生产及提高蔬菜品质具有重要意义。蔬菜中有机磷残留检测的样品前处理方法和检测方法众多，气相色谱法因具有分离效率高、分析速度快、灵敏度高、选择性好及低成本等特点[2]，广泛应用于农产品农药残留分析[3－6]。本试验于2020年进行，利用气相色谱仪脉冲火焰光度检测器（PFPD），对蔬菜中10种有机磷农药进行检测分析，建立同时测定蔬菜中多种有机磷残留的方法，为蔬菜安全生产提供一定的技术支持。

1 材料与方法

1.1 试验仪器与试剂

1.1.1 试验仪器 气相色谱仪（瓦里安GC450，自动进样器、PFPD检测器）；氮吹仪（OrganomationN-EVAP）；食品加工器；高速匀浆机（IKA T25）；冷冻高速离心机（eppendorf 5804R）；冷冻高速离心机（ThermoFisher）；振荡器（IKA KS260）；CP-Sil24 CB毛细管柱（0.32 mm×0.25μm×30 m）。

1.1.2 试剂 乙腈（HPLC级）、丙酮（HPLC级）、氯化钠（140℃烘烤4 h）；分散固相萃取管（4 g硫酸镁、1 g氯化钠、0.5 g柠檬酸氢二钠、1 g柠檬酸钠）、分散固相萃取纯化剂（150 mg MgSO4、50 mgPSA、50 mgC18），购于上海安谱实验科技股份有限公司；农药标准品：甲胺磷、乙酰甲胺磷、甲拌磷、乐果、甲基对硫磷、毒死蜱、马拉硫磷、水胺硫磷、丙溴磷、三唑磷，购于农业农村部环境质量监督检验测试中心（天津），浓度为1 000 mg/L。分别以丙酮配制成标准储备液（100 mg/L），存储于冰箱中备用（-20℃）。

1.2 试验方法

1.2.1 样品提取 蔬菜样品购于农贸市场。样品经缩分后切碎，充分混匀放入食品加工器粉碎，制成待测样。提取方法参照NY/T 761-2008和QuEChERS。

提取方法1：称取蔬菜样品25.0 g于三角烧瓶中，加人50.0 mL乙腈，在匀浆机中高速匀浆2 min后滤纸过滤，滤液收集到装有5 g氯化钠的100 mL具塞量筒中，剧烈震荡2 min，室温静置30 min，使乙腈相和水相分层。净化：取上清液10 mL放入烧杯中，氮吹至近干。加入2 mL丙酮溶解，转移至15 mL刻度离心管中，再用3 mL丙酮冲洗烧杯，定容至5 mL，漩涡混合器上混匀，过滤膜，用于测定。

提取方法2：称取蔬菜样品10 g（精确至0.01 g）于50 mL塑料离心管中，加入10.0 mL乙腈，振荡30 min，加入分散固相萃取剂（4 g硫酸镁、1 g氯化钠、0.5 g柠檬酸氢二钠、1 g柠檬酸钠），剧烈振荡1 min后6 000 r/min离心5 min，吸取上清液于分散固相萃取纯化管（150 mg MgSO4、50 mgPSA、50 mgC18）中，6 000 r/min离心5 min，取上清液，过滤膜，用于测定。

1.2.2 色谱操作条件 进样口温度250℃，柱温40℃，保 持1 min，40℃/min到200℃，3℃/min到230℃，20℃/min到260℃，保持2 min，开启检测器PFPD，温度300℃，柱流量2 mL/min。进样量1μL（不分流进样）。

2 结果与分析

2.1 色谱条件的优化

通过对柱温箱升温程序、检测器的温度、载气流速等色谱条件进行探索，形成了“1.2.2”的色谱条件，所测10种有机磷农药组分均得到了良好的分离，峰型清晰不拖尾，分离效能高，出峰顺序依次为甲胺磷、乙酰甲胺磷、甲拌磷、乐果、甲基对硫磷、毒死蜱、马拉硫磷、水胺硫磷、丙溴磷、三唑磷。

表1 10种有机磷农药线性方程及检出限

2.2 方法的线性范围、线性方程、相关系数及检出限

精确吸取一定量的标准储备液，用丙酮逐级稀释成质量浓度为0.010 mg/L、0.020 mg/L、0.050 mg/L、0.100 mg/L和0.500 mg/L的混合标准溶液，分别测定对应的峰面积。以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。从表1的结果可以看出，在0.010～0.500 mg/L浓度范围内，10种有机磷农药组分呈现良好的线性关系，相关系数为0.999 3～0.999 9，满足仪器分析相关系数要求。以3倍的信噪比计算10种有机磷农药的检出限，检出限为0.002 0～0.007 8 mg/kg。

2.3 回收率和精密度试验

在蔬菜样品中添加农药标准品溶液，加标浓度为0.050 mg/L、0.100 mg/L，并采用2种方法进行提取。从表2可知，添加浓度为0.050 mg/L时，使用提取方法1，10种有机磷农药回收率为86.3%～102.1%，RSD为1.41%～6.03%；使用方法2，农药组分回收率为85.7%～98.7%，RSD为2.49%～6.23%。添加浓度为0.100 mg/L时，使用提取方法1，10种有机磷农药回收率为82.7%～96.2%，RSD为1.83～8.39%；使用方法2，各农药组分回收率为81.5%～100.5%，RSD为1.91%～7.02%。通过2种提取方法，回收率为81.5%～102.1%、RSD为1.41%～8.39%，符合检测要求。提取方法1，有机溶剂消耗量大，进行过滤再静置，操作费时；提取方法2，振荡提取然后离心，样品处理效率高，成本相对高。

2.4 样品测定

在农贸市场随机抽取蔬菜样品20份，采用本方法进行检测，同时设置2个样品添加，样品添加的回收率为83.5%～106.7%，抽检的20份蔬菜样品中10种有机磷农药均未检出。

表2 2种提取方法下10种有机磷农药的回收率和相对标准偏差

3 结论

采用乙腈提取，建立了气相色谱法PFPD检测器同时测定蔬菜中10种有机磷农药残留的方法。在优化的色谱条件下，10种有机磷农药都得到了良好分离，在0.010～0.500 mg/L浓度范围内线性良好，相关系数均大于0.99，检出限为0.002 0～0.007 8 mg/kg；加标浓度为0.050 mg/L、0.100 mg/L时，采用2种提取方法，回收率为81.5%～102.1%，相对标准偏差RSD为1.41%～8.39%，符合农药残留量测定方法的要求。该方法适用于蔬菜中有机磷农药多残留检测。