临床微生物检测中应用荧光定量PCR技术的临床价值

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摘要：目的：为了深入研究不同临床标本微生物应用荧光定量PCR技术的阳性率结果。方法：选取我院2019年6月至2020年6月期间的微生物检验标本66例作为研究对象，应用荧光定量PCR技术检测，处于2020年1月-2020年6月这一时间区间的标本为参照组，应用常规检测方法，应用对比两组标本的阳性结果评分。结果：试验结束后，研究组阳性评分显著高于参照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。结论：临床微生物检测中应用荧光定量PCR技术，有利于提高临床微生物检验准确度，故方案值得推广。

关键词：临床微生物检测;荧光定量PCR技术;临床价值

【中图分类号】R446.5 【文献标识码】A 【文章编号】1673-9026（2021）01-049-01

真菌、病毒等一切不能通过肉眼看到的生物被统称为微生物，微生物是机体出现感染的原因之一，对于不同微生物的感染需要采取不同的治疗措施，如果治疗药物选择不当，患者感染情况不仅不能得到缓解，而且治疗难度还会进一步加大。因此，对临床微生物检测中应用荧光定量PCR技术的临床价值成为临床研究的重点。我院选取2019年6月至2020年6月期间的微生物检验标本作为研究对象，现报道如下：

1资料与方法

1.1一般资料

选取我院2019年6月至2020年6月期间的微生物检验标本作为试验对象，将其随机分组，处于2019年6月-2019年12月这一时间区间的标本为研究组，应用荧光定量PCR技术检测，处于2020年1月-2020年6月这一时间区间的标本为参照组，应用常规检测方法，所有检验标本中，创口标本14例，占比约为21.21%，呼吸道分泌标本25例，占比约为37.88%，尿液标本27例，占比约为49.09%。所有标本的基本资料对比，差异无统计学意义（P>0.05）。

1.2方法

参照组与研究组的微生物标本是不同时间段采取同样方法采取的标本：（1）创口标本：选取病症相同、性别一样、年龄大致和治疗方式相同的标本，使用无菌采集方法采集标本并放入无菌器皿中。（2）呼吸道标本：选择病症类似的患者，采集患者晨起漱口后的标本，并将无菌器皿中的标本送检。（3）尿液标本：筛选标准与上述两类相同，采取标本前让患者提前饮用大量的水，患者起床后采集标本。

PCR检测方法：往灭菌的试管中加入1.5毫升增菌液。之后与标本混匀后高速离心干预2分钟，将上层清液去除后在剩余沉淀物中加入100微升DNA提取液，摇匀后在沸水中放置10分钟，再高速离心10分钟，取上层清液在PCR检测仪中检测。

1.3观察指标

观察两组标本的阳性评分。详细记录相关数据并比较。

1.4统计学分析

本组实验涉及到的数据信息统一采用SPSS20.0软件进行分析，计量资料用t检验，用均值标准差表示，计数资料用X2检验，用%表示，组间比较，差异显著性水平均为：P<0.05。

2结果

2.1对比两组阳性评分

干预完成后，研究组创口标本阳性评分为（65.45±9.47），呼吸道标本阳性评分为（68.52±9.18），尿液标本阳性评分为（48.75±6.59），参照组创口标本阳性评分为（55.44±7.71），呼吸道标本阳性评分为（56.46±8.07），尿液标本阳性评分为（39.75±8.67），研究组阳性评分显著高于参照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。

3讨论

病原微生物会对人类和动物产生各种各样的的损害，导致各种各样的疾病，影响人和动物的身体健康。如何检查这些病原微生物，把提害降到最低，這就是临床微生物检验存在的意义[1]。要保证微生物检验报告的准确性，检测方法尤为重要。但是样本采集也需要注意：采集时间最好是病程早期、急性期或症状典型时，而且必须在使用抗生素或其他抗菌药物之前采集[2]。采集的标本应无外源性污染。在采集无菌标本时，应注意对局部及周围皮肤的消毒，严格进行无菌操作;对于从正常菌群寄生部位（如口腔）采集的标本[3]，应明确检查的目的菌，在进行分离培养时，采用特殊选择性培养基。采集的标本均应盛于无菌容器内，盛标本的容器须先经高压灭菌、煮沸、干热等物理方法灭菌[4]，荧光定量PCR技术对于病毒类项目具有极大的优势。为了我们的检验质量，为了病人的身体健康，对于临床微生物检测中应用荧光定量PCR技术的临床价值进行研究有重要的意义[5]。本次研究中，对比不同时间相同方法采集的阳性标本，结果显示，干预完成后，研究组创口标本阳性评分为（65.45±9.47），呼吸道标本阳性评分为（68.52±9.18），尿液标本阳性评分为（48.75±6.59），参照组创口标本阳性评分为（55.44±7.71），呼吸道标本阳性评分为（56.46±8.07），尿液标本阳性评分为（39.75±8.67），研究组阳性评分显著高于参照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。表明对微生物标本检验的阳性结果进行研究有利于临床微生物研究。

综上，临床微生物检测中应用荧光定量PCR技术，有利于提高临床微生物检验准确度，故方案值得推广。

参考文献

[1]张若楠， 于雷， 王钊，等. 多重荧光定量PCR在动物检测中的应用[J]. 山东畜牧兽医， 2020， v.41;No.273（04）：77-80.

[2]卢庆文， 许青霞， 田育佼. 实时荧光定量PCR技术在检测复发性口腔溃疡患者口腔微生物菌群改变中的应用[J]. 中国微生态学杂志， 2019， 031（008）：899-902.

[3]王菲， 张玲， 杨佳怡，等. 基于实时荧光定量PCR检测的沙门氏菌标准物质验证[J]. 食品与发酵工业， 2020， v.46;No.404（08）：223-229.

[4]冯俊丽， 孟璐， 戴志远，等. 荧光定量PCR对鲐鱼中腐败微生物的检测法及所用引物：， CN105525019B[P]. 2019.

[5]蒋雪纷. 荧光定量PCR技术在临床微生物检测中的应用价值[J]. 临床检验杂志（电子版）， 2020， 009（003）：P.344-345.

1.西藏高原医学研究所;2.西藏自治区人民医院检验科 850000