甲壳质酶蛋白-40 在肾结核和肾肿瘤患者中的表达差异及临床意义

李秀君 安海霞 杨家鑫 陈怀安

河北北方学院附属第一医院泌尿外科，河北张家口 075000

肾结核在泌尿系统疾病中较为常见，男性发病率略高于女性。据一项统计学研究显示[1]，我国75%的肾结核患者疾病高发年龄为20～40 岁。肾结核患者发病后可出现膀胱刺激征、血尿、脓尿以及腰痛等临床表现，其中膀胱刺激征最早出现[2]。由于其临床表现会因病变范围、损伤程度而有所不同，在疾病早期由于病变局限在肾脏某一部位，因此临床表现不典型；随着病变程度不断加重，当出现血尿时，才会引起患者重视，因此一定程度上增加临床治疗难度[3]。肾脏肿瘤在男性生殖系统肿瘤中较为常见，并且肾肿瘤大多为恶性肿瘤，其中包含肾癌、肾盂癌、肾母细胞瘤等[4]。肾脏恶性肿瘤中肾癌占85.00%[5]。肾肿瘤患者疾病早期临床症状大多不明显，仅有乏力、体重下降、贫血等临床表现，因此患者极易忽视，当其出现显著临床表现时疾病通常已经发展至中晚期，错失疾病治疗最佳时期。因此，探寻早期诊断肾结核以及肾肿瘤的指标已成为临床研究重点。甲壳质酶蛋白-40（YKL-40）可存在于多种组织和肝脏组织内，属于组织纤维化标志物[6]。目前，在慢性肝炎、肿瘤疾病研究中通常进行YKL-40水平检测，但是在肾脏疾病中研究较少。为了解其在肾结核以及肾肿瘤中的表达情况，本研究对100 例肾结核患者、50 例肾肿瘤患者以及100 名健康体检者分别进行尿液、血清YKL-40 水平检查，现报道如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2016 年5 月—2019 年5 月河北北方学院附属第一医院（以下简称“我院”）接收的100 例肾结核以及50 例肾肿瘤患者为研究样本，将肾结核患者作为肾结核组，将肾肿瘤患者作为肾肿瘤组，另选择同期在我院实施健康体检的100 名体检者为参照组。回顾性分析全部样本临床资料，肾结核组中，男70 例，女30 例；年龄20～68 岁，平均（42.38±3.57）岁；双侧肾结核者25 例，单侧肾结核者75 例。肾肿瘤组中，男38 例，女12 例；年龄22～65 岁，平均（41.57±3.36）岁；双侧肾肿瘤者7 例，单侧肾肿瘤者43 例。参照组中，男66 名，女34 名；年龄25～70 岁，平均（42.26±3.40）岁。三组在性别、年龄方面资料比较，差异无统计学意义（P＜0.05），肾结核组与肾肿瘤组在性别、年龄以及病变部位方面资料比较，差异无统计学意义（P＜0.05），具有可比性。纳入标准：（1）肾结核组全部患者经临床诊断均符合肾结核诊断标准：①患者出现无诱因膀胱刺激征，同时伴有纳差、乏力以及低热等临床表现；②尿液检查提示存在结核分枝杆菌；③尿路平片检查提示肾体积增大或出现分叶状改变；④肾盂造影检查提示肾乳头以及肾小盏边缘粗糙，呈不规则改变，当病变较严重时可观察到肾脏空洞，并形成脓肿，当肾功能丧失时，患侧肾脏无法显影；⑤膀胱镜检查可存在结核性膀胱炎症状，同时还可钳取部分组织进行病理检查[7]；（2）肾肿瘤组患者经术后病理检查均诊断为肾癌[8]：①胸部X 线、腹部CT 以及腹部核磁共振检查提示肾脏内存在肿瘤细胞；②肾穿刺活检病理检查提示存在肿瘤细胞。排除标准[9]：①哺乳期或妊娠期女性；②肝功能有明显异常；③伴有心脑血管疾病；④机体存在严重的感染性疾病；⑤近3 个月内服用过损害肾功能药物；⑥患者存在严重的精神障碍，无法正常进行言语交流；⑦不配合研究。本研究经医院医学伦理委员会审核并同意。

1.2 方法及观察指标

1.2.1 血清以及尿液样本中YKL-40 水平检测 采集患者空腹上臂静脉血3 mL，3000 r/min 离心15 min，离心机半径15 cm，收集上层血清，将血清样本放置在-80℃的冰箱中保存。采集晨起首次中段尿液10 mL，离心方法与血标本相同，收集上清液5 mL，置入无菌试管中，储存条件与血清标本相同。检测前需从冰箱中取出待测样本，放置在室温下48 h，待其复溶后，采用酶联免疫吸附测定法检测每组患者血清标本、尿液标本中YKL-40 水平，YKL-40 试剂盒采购至上海广锐生物科技有限公司，全部操作均严格依据试剂盒使用说明进行。参照组体检者标本采集方法和处理方法与肾结核组和肾肿瘤组患者相同。

1.2.2 肾结核以及肾癌病理组织、病变部位周围正常组织检测 分别采集肾结核、肾癌手术后病理组织和病变部位周围正常组织标本，病变组织采集时需避开坏死、脂肪成分多的部位，尽可能选择质地较韧组织；周围正常组织标本采集时需有一定深度，大小以1.5 cm×1.5 cm×0.2 cm 为宜，钳取组织时需避免挤压，以防组织变形而影响诊断效果，将其制成石蜡标本，并切成5 μm 切片，利用免疫组化SP 法分别检测每组患者标本组织中YKL-40 水平，YKL-40 多克隆抗体采购至上海斯信生物科技有限公司（生产批号：3010173），SP检测试剂盒采购至上海瑞番生物科技有限公司（生产批号：SP0011）。选择我院两名临床经验丰富的检验科医师进行阅片。

1.3 统计学方法

采用SPSS 22.0 统计软件对所得数据进行分析处理，符合正态分布的，计量资料采用均数±标准差（）表示，两组间比较采用t 检验，多组间比较采用单因素方差分析，多组间进一步两两比较采用LSD-t 检验。计数资料采用例数和百分率表示，组间比较采用χ2检验。以P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三组血清以及尿液标本中YKL-40 水平比较

肾结核组、肾肿瘤组血清以及尿液标本中YKL-40 水平均高于参照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。肾结核组与肾肿瘤组血清、尿液中YKL-40 水平比较，差异无统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 三组血清以及尿液标本中YKL-40 水平比较（）

表1 三组血清以及尿液标本中YKL-40 水平比较（）

注：与参照组比较，*P ＜0.05。YKL-40：甲壳质酶蛋白-40

2.2 肾结核组以及肾肿瘤组病变组织、周围正常组织中YKL-40 水平比较

肾结核组、肾肿瘤组中病变组织的YKL-40 水平均高于周围正常组织（P＜0.05）。肾结核组与肾肿瘤组病变组织及周围正常组织中YKL-40 水平比较，差异无统计学意义（P＜0.05）。

表2 肾结核患者以及肾肿瘤患者病变组织、周围正常组织中YKL-40 水平（ng/mL，）

表2 肾结核患者以及肾肿瘤患者病变组织、周围正常组织中YKL-40 水平（ng/mL，）

注：YKL-40：甲壳质酶蛋白-40

3 讨论

结核病主要是因结核分枝杆菌感染而引起的一种慢性传染性疾病，结核分枝杆菌可侵入患者机体各器官，在泌尿系统中，肾结核发病率最高[13]。肾肿瘤主要包含原发性肿瘤以及继发性肿瘤，临床常见肺癌肾转移。若在疾病早期未实施相应治疗，伴随结核分枝杆菌以及肿瘤细胞的不断发展，会影响患者泌尿系统功能，最终导致肾脏功能完全丧失，部分疾病严重者甚至需实施手术治疗，切除病变肾脏组织，对患者机体以及心理均造成不利影响[14-15]。因此，在疾病早期采取有效方式进行诊断，同时实施相应措施改善患者肾脏功能，对提升疾病预后具有积极意义。

YKL-40 包含383 个氨基酸，其N 末端主要是由亮氨酸、赖氨酸以及酪氨酸组成，由于其分子量是40 kD，因此临床将其称为YKL-40[16-17]。在候永强等[18]的研究中，其分别对62 名肝硬化患者以及62 例健康人进行血清YKL-40 水平、肝纤维化以及肝功能检查。经研究发现，肝硬化患者血清YKL-40 水平明显高于健康人群，并且肝硬化患者机体白蛋白、血清胆固醇以及胆碱酯酶水平均低于健康人。并且其还分析肝纤维化程度与患者机体YKL-40 水平之间关系，经研究发现，肝纤维化程度越严重，患者机体YKL-40 水平越高。因此患者认为通过了解机体YKL-40 水平可对肝硬化程度进行判断。而本研究中参照组体检者尿液YKL-40 水平以及血清YKL-40 水平肾结核组、肾肿瘤组血清以及尿液标本中YKL-40 水平均高于参照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。肾结核组与肾肿瘤组血清以及尿液中YKL-40 水平比较，差异无统计学意义（P＜0.05）。分析原因可知，YKL-40 水平会随炎症发展而逐渐升高，由于其对巨噬细胞具有趋化作用，同时激活机体抗炎反应，进而促进炎症细胞聚集以及激活，从而提升其水平。YKL-40 属于软骨自分泌细胞因子，当机体受到肿瘤细胞刺激时，会导致YKL-40 大量形成，并且其还可刺激免疫细胞大量分泌白细胞介素-6，从而增强肾脏肿瘤部位炎症反应，进一步促进肿瘤细胞发展[19-21]。因此，在肾结核以及肾肿瘤患者尿液和血清中YKL-40 水平显著高于普通人群。在陈怀安等[22]的研究中，其分别对46 例肾结核患者以及46 名健康体检者进行YKL-40 水平检测，在其研究中，病变组织中YKL-40 水平是（31.52±6.87）ng/mL，正常组织中YKL-40 水平是（26.15±5.59）ng/mL，从结果可以看出正常组织中YKL-40 水平低于病变组织。本研究中，肾结核患者以及肾肿瘤患者病变组织中YKL-40 水平明显高于周围正常组织（P＜0.05）。分析原因可能与YKL-40 参与肾结核以及肾肿瘤发生、发展有关。临床有研究显示[23-25]，炎症细胞、淋巴细胞以及炎症因子等均参与上皮源肿瘤的形成以及转移，而YKL-40 蛋白可作为血管生成因子、细胞增殖因子、炎症因子等，在组织重建中发挥一定作用，因此其在恶性肿瘤中水平较高。

综上，肾结核患者以及肾肿瘤患者尿液和血清中YKL-40 水平相较于正常人而言有显著升高，通过了解患者机体内YKL-40 水平可对肾结核以及肾肿瘤进行初步诊断。但本研究同样存在一些不足，未对疾病治疗前后YKL-40 水平进行研究，加之样本量较小，研究时间较短，因此还需增加样本人数、延长研究时间来进一步研究。