乙肝病毒相关肝细胞肝癌中性激素受体的表达及其意义

李媛，郭琳，张松，侯绍章

1.宁夏医科大学护理学院，宁夏银川 750004；2.宁夏医科大学总医院，宁夏银川 750004；3.宁夏医科大学基础医学院，宁夏银川 750004

肝细胞肝癌（hepatocellular carcinoma，HCC）是一种最多发的肝原发性肿瘤，致死性肿瘤中排名第二位[1]。乙肝病毒（hepatitis B virus，HBV）的感染存在于超过80%的HCC患者中[2]，有研究表明相比于女性，男性更容易感染HBV，这说明早在HCC癌前病变阶段男女之间的差异就已经存在[3]。有研究认为雌二醇可通过激活雌激素受体（estrogen receptor，ER）在抑制肝癌细胞增殖和介导癌细胞凋亡方面起到重大影响，并对HBV相关的肝癌进展起到保护作用[4]。近些年研究发现雄激素受体（androgen receptor，AR）尤其是在胞核内表达的激活AR在HCC癌细胞及癌旁肝细胞中的表达与病理组织学分级[5]以及预后[6]有关。HBV感染是HCC发生的重要危险因素，且机体对于病毒感染的应对也存在性别差异[7]。该研究回顾性选取2016年6月—2020年12月240例HBV相关HCC病例进行研究，旨在探讨性激素受体（AR、ER）在HBV相关HCC癌及癌旁组织的表达情况，以期在HBV相关HCC患者的诊断、治疗、预后等方面提供新的思路。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

研究对象来源于回顾性选取宁夏某医院病理科确诊为HCC患者的相关临床（包括年龄、性别等）及病理资料（包括癌细胞分化程度、mVI分级、癌旁组织有无肝硬化、有无卫星灶等），经纳入、排除标准筛查后共计HBV相关HCC患者240例，从上述240例HBV相关HCC病例中进行简单随机抽样（分别从女性52例和男性188例中进行简单随机抽样），抽出HBV相关HCC患者54例（女25例，男29例，平均年龄55岁）的组织蜡块行免疫组织化学（immunohistochemistry，IHC）检测。

1.2 方法

使用IHC检测AR、ER在54例HBV相关HCC癌及癌旁组织标本中的表达情况。将组织经常规处理、切片后，按照说明书操作进行免疫组化染色。

1.3 观察指标

运用半定量计数评估癌细胞及癌旁肝细胞中AR、ER的IHC染色，阳性结果以肿瘤细胞和（或）癌旁肝细胞内出现棕黄/黄褐色颗粒为标记。每张切片任意观察5个高倍镜（×400倍）视野，计数100个细胞/视野后取平均，细胞无染色或阳性细胞数＜5%为（－），≥5%为（＋）。

1.4 统计方法

采用SPSS 22.0统计学软件进行数据分析，计数资料采用[n(%)]表示，组间比较采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 AR在HBV相关HCC癌细胞及癌旁肝细胞中的表达情况

AR阳性定位于细胞的胞浆和（或）胞核，阳性呈棕黄/黄褐色（图1、图2）。在54例癌组织及癌旁组织中，AR阳性表达率分别为癌细胞核阳40.7%（22/54）、浆阳3.7%（2/54）、核浆双阳0.0%（0/54），癌旁肝细胞核阳1.9%（1/54）、浆阳9.3%（5/54）、核浆双阳85.2%（46/54），且AR在癌细胞与癌旁肝细胞间的表达差异有统计学意义（P＜0.001），见表1。

表1 AR在HBV相关HCC癌及癌旁肝细胞中的表达情况[n(%)]

图1 HBV相关HCC癌细胞中AR的表达（×400倍）

图2 HCC癌旁肝组织中AR的表达（×400倍）

2.2 ER在HBV相关HCC癌细胞及癌旁肝细胞中的表达情况

ER阳性定位于细胞的胞核，阳性呈棕黄色（图3）。在54例HBV相关HCC癌及癌旁组织中，ER在癌细胞中表达率为0.0%（0/54），在癌旁肝细胞中则为75.9%（41/54），癌及癌旁组织间的表达差异有统计学意义（P＜0.001），见表2。

图3 HBV相关HCC癌及癌旁肝组织中ER的表达（×400倍）

表2 HBV相关HCC癌及癌旁组织中ER的表达情况[n(%)]

3 讨论

HCC是最多发的肝细胞源性恶性肿瘤，而HBV感染、男性在HCC发展中属于重要因素[2，7]。目前有关AR及ER在HCC发生发展中的作用及机制未像其他激素依赖性肿瘤一样完全明确，尤其是其在HBV相关HCC中的表达及意义仍需深入学习和探讨。

AR是一种被睾酮或二氢睾酮激活后连接到DNA特殊区域上进而调控相关基因表达的转录因子，有研究表明AR在HCC发生发展中起到的重要作用是通过AR的激活实现的而非仅仅是AR受体的存在[8]，相关研究结果表明67.7%肝癌细胞表达AR，癌细胞中AR阳性率要高于癌旁肝细胞且其表达在癌细胞、癌旁肝细胞、正常肝组织中依次减少[9-10]。进一步挖掘AR在其中参与的通路及涉及的效应能有助于更好地了解AR在HCC中所扮演的具体角色，进而为HCC患者的靶向激素治疗提供理论依据。在该研究中发现，AR在HBV相关HCC患者癌细胞中以核阳模式为主（40.7%），而在癌旁肝细胞中则以核浆双阳模式为主（85.2%）。如上述，定位在胞浆中的多为未活化的AR，定位在胞核的则多为活化后的AR[11]，这支持了AR在HCC发生、发展中的影响不仅仅是与癌细胞中受体的存在有关，而AR主要通过雄激素（睾酮）激活，这在某种程度上解释了HCC患者中男性发病率高的原因。

ER是雌二醇所有受体的总称，主要包括了ER-α，ER-β和GPER。如生理剂量的雌激素通过ER-α，经由抑制Toll样受体适配蛋白MyD88调节的NF-κB活化来抑制IL-6的促肿瘤生长能力并下调肿瘤生长因子和在肿瘤微环境中的IL-6表现出抑制HCC癌转移[12]。除此之外，出于免疫系统表现出的性二态性，相较于男性，女性能够更好地应对HBV感染[13]，而且女性HBV携带者的病毒载量低于男性携带者[14]，较男性更容易产生HBV相关抗体，如HBeAb和HBsAb[14-15]。这提示雌激素及其受体在HBV感染及HCC发生、发展中的作用是复杂而未完全明确的，需要更进一步地研究。

在该研究中，与AR的表达模式不同，ER的表达仅定位于细胞核，且未发现ER在癌细胞中表达的病例，而在癌旁肝细胞中则有75.9%（41/54）的阳性率。

综上所述，AR在HBV相关HCC癌细胞中主要表达于细胞核，在癌旁肝细胞中主要在细胞核、浆中表达，相比于作为明确HCC诊断的IHC标志物，AR更适合作为HBV相关HCC患者的一项预后指标，或可预测HBV相关HCC患者预后提供一定理论依据。ER主要在癌旁肝细胞细胞核中表达，ER或可成为鉴别高分化癌细胞与癌旁增生的标记物。