低体重早产儿支气管肺发育不良的危险因素研究

范旭升，杨方方

1.深圳市宝安区石岩人民医院新生儿科，广东深圳 518108；2.深圳市儿童医院新生儿科，广东深圳 518108

近年来随着我国经济的快速发展和现代医疗技术的不断提高， 尤其是围产和新生儿医疗救治和护理技术的不断提高，我国低体重早产儿的成活率不断增加[1-2]。 据广州医科大学冯周善等人2008—2017 年的研究结果: 极低出生体重早产儿成活率已达到81.6%[3]。 然而早产儿特别是低体重和极低体重早产儿的支气管肺发育不良(bronchopulmonary dysplasia,BPD) 的发生率也随之不断增加[4]。近年来虽然已经有一些临床研究报道了BPD 的一些危险因素和保护因素，但研究结果还不完全一致，且有的研究报道之间还出现相反结论[5]。 外周血微核试验广泛用于遗传损伤水平的检测， 对于母亲妊娠期环境毒物暴露水平的评价也具有重要价值， 然而很少有研究报道其与低体重早产儿支气管肺发育不良的关联性[6]。该研究选择2014年1 月—2017 年6 月通过调查深圳市150 名低体重早产儿， 了解低体重新生儿围产期相关指标以及母亲妊娠期染色体损伤水平， 了解围产期相关因素对支气管肺发育不良（BPD）发生的相对影响，为BPD 的危险因素探究提供新的证据。 现报道如下。

1 对象与方法

1.1 研究对象

选取该院150 名低体重新生儿作为研究对象。

纳入标准： 选取该院录入医院登记信息系统的低出生体重早产儿。 排除标准：正式开展调查前已死亡的胎儿或新生儿或因家属不能配合完成全部调查的新生儿。 所有研究对象的家属均已签署知情同意书。 该次调查经过医院医学伦理委员会审批。

1.2 方法

根据医院登记信息系统收集信息，内容包括：胎龄、出生体质量、母亲异常生育史、母亲产道感染、胎膜早破、新生儿窒息、出生时动脉血pH 值、RDS、感染性肺炎、呼吸暂停、PDA、败血症、低蛋白血症、机械通风、CPAP 等。

1.3 诊断标准

按照美国国家儿童保健和人类发展研究院通过的BPD 诊断标准诊断[6]。

1.4 微核试验

胞质阻滞微核试验 （cytokinesis-block micronucleus，CBMN assay）的主要试剂和仪器：RPMI1640 培养基（Gibco公司，美国），胎牛血清（Gibco 公司，美国），植物血凝素（Sigma-Aldrich 公司，美国），细胞松弛素 B（Sigma-Aldrich公司，美国），Giemsa 溶液（Sigma-Aldrich 公司，美国），二氧化碳培养箱（Thermo scientific forma 公司，美国），光学显微镜（Olympus-CX21，Olympus-CX31）。

微核判定标准：游离于胞质中，与主核完全分离或相切，呈圆形或椭圆形，边缘光滑，嗜色性与主核一致或略浅，直径小于主核[7]。 所有阳性结果涂片均由两人判定。

微核率计算： 微核率 (‰) =微核数/1 000 个双核细胞×1 000‰。

1.5 统计方法

采用SPSS 22.0 统计学软件处理数据， 计量资料用（）表示，正态分布采用 t 检验，非正态分布采用 Z 检验；计数资料用[n(%)]表示，采用χ2检验，多因素采用Logistic 回归分析，P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组基线资料比较

共有150 名新生儿纳入研究，其中113 名未发生支气管肺发育不良， 归为非BPD 组，37 例发生支气管肺发育不良， 归为 BPD 组。 BPD 组的胎龄显著低于非 BPD 组[（28.1±1.6）周 vs（29.0±2.1）周]，差异有统计学意义（t=2.388，P=0.018），BPD 组的极低出生体重的比例显著高于非 BPD 组（56.8%vs.21.2%），差异有统计学意义（P＜0.001），两组性别构成差异无统计学意义（P＞0.05）。 见表1。

表1 两组研究对象基本情况比较Table 1 Comparison of basic information between the two groups

2.2 非BPD 组与BPD 组危险因素相关指标比较

BPD 组母亲妊娠期微核率和异常生育史、 新生儿窒息、RDS、感染性肺炎、呼吸暂停、PDA、低蛋白血症、机械通风、CPAP 的发生率显著高于非BPD 组， 差异有统计学意义（P＜0.05），两组之间母亲产道感染、胎膜早破、出生时动脉血pH 值＜7.2 和败血症的发生率比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。 见表 2。

表2 低出生体重儿非BPD 组与BPD 组危险因素相关指标比较Table 2 Comparison of risk factors related indicators between the non-BPD group and the BPD group of low birth weight infants

2.3 BPD 危险因素多因素Logistic 回归分析

以是否发生BPD 为因变量， 以表1 和2 中有统计学差异的指标：母亲妊娠期微核率，胎龄、出生体质量、异常生育史、新生儿窒息、RDS、感染性肺炎、呼吸暂停、PDA、低蛋白血症、机械通气、CPAP 为自变量进行多因素Logistic 回归分析，结果显示：母亲妊娠期微核率升高是BPD 的危险因素，出生月龄增加是BPD 的保护作用。 见表3。

表3 BPD 危险因素多因素Logistic 回归分析Table 3 Multivariate Logistic regression analysis of BPD risk factors

3 讨论

该次研究选取的新生儿均是低体重儿相关。 一般将出生体质量小于2 500 g 的新生儿定义为低出生体重儿。低出生体重儿不只是出生体重低， 而且多数在母亲妊娠阶段经历了母体营养不良或有毒有害物质的暴露， 这些不良状态不仅能影响母体自身健康，甚至也能对胎儿早期的器官发育造成长远影响[8-9]。 该次研究最重要的研究结果是不仅验证了出生月龄增加是BPD 的保护因素， 还首次发现母亲妊娠期微核率升高可能是BPD 的危险因素[10]。

遗传物质损伤引发的疾病种类繁多。 肿瘤、心脑血管疾病、 糖尿病等很多疾病的病因都包含了染色体异常和（或）基因突变等遗传因素。 流产、死产、低体重儿以及新生儿BPD 的形成原因也是多样的, 但从正常妊娠角度出发， 排除孕期有毒有害物质暴露以及生产过程中的机械损害， 引起新生儿BPD 的原因主要还是集中在遗传物质损伤方面。 当然危害率这个指标不仅可以直接评估染色体损伤水平， 也可以间接评估母亲妊娠期接触环境毒物（如多环芳烃和二手烟）的暴露水平。 因而该次研究发现母亲妊娠期微核率升高可能是BPD 的危险因素具有较为可信的生物机制学解释， 这个结果也提示通过检测母亲妊娠期的微核率水平来综合评估母亲环境有害物质的暴露水平并预测新生儿发生BPD 的发生[11-12]。当然这需要在正常体重新生儿的队列研究中进行验证才能将该次低体重早产儿研究人群的研究结论。

该次研究的单因素分析结果还发现胎龄＜30 周的新生儿发生BPD 的概率远大于胎龄≥30 周新生儿，这与新疆的一篇研究报道结果相似[13]。 在多因素logistics 回归结果中也发现胎龄的独立作用。 说明即使校正了其他因素的作用， 胎龄也是早产儿尤其是低体重早产儿的BPD 发生的重要影响因素。

另一个与新生儿BPD 发生有重要关系的因素是感染。 一些感染性因素可能会诱发母体和胎儿炎性物质如TNF-α、IL-6、IL-8 等的升高，而炎性物质的升高可能会对支气管肺发育产生不良影响[14-15]。 感染多发生在胎儿和胎儿娩出阶段， 因而母亲产道感染和胎膜早破也经常被调查是否和新生儿BPD 发生相关， 但是该研究中并未观察到产道感染、胎膜早破对新生儿BPD 发生率的影响，这可能跟该次研究是横断面研究且样本量较小， 研究过程中可能存在一定的偏倚有关，尚需要进一步研究证实[16-17]。

虽然既往一些研究已经报道了新生低体重儿BPD 的发病率，但不同报道之间的BPD 发生率仍然有较大差异。如钟美珍[18]在2009—2010 年开展的一项包含425 个早产儿的前瞻性队列研究结果显示低体重早产儿BPD 的发病率约为10.6%，而该次调查发生率约为25%，钟美珍等人的结果显著高于该课题组的研究结果， 这可能跟钟美珍等人选取的研究胎儿胎龄（中位胎龄33.9 周）较该课题组高（中位胎龄28.8 周）有关；也可能跟该次研究样本量较小（选取了150 名低体重早产儿，其中37 例发展成BPD）且较为集中在同一家医院有关， 样本量较小且较为集中时代表性较差。

综上所述，除胎龄外，母亲妊娠期染色体损伤水平对低体重早产儿的支气管肺发育不良有重要关联性， 并且该关联性可能是病因学关联。