主动免疫治疗对不明原因早期复发性自然流产患者妊娠结局的影响

孙震

复发性流产(RSA)是妇产科广受关注的生殖疾病，目前国内通常将3 次及以上且发生在妊娠28 周内发生的流产称为RSA［1］。该疾病会随着流产次数的增多而升高，成为威胁女性生殖健康的主要因素［2］。目前临床上有＞45%的患者病因无法确定，称为URSA。近年来有研究表明，有＞50%的URSA 可能是由于免疫因素导致［3］。本研究通过对比分别接受LIT 和黄体酮常规保胎患者治疗前后淋巴细胞免疫表型、IFN-γ 与IL-4水平变化，并记录两组患者的妊娠结局，旨在探讨LIT对URSA 患者的临床疗效，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择本院2018 年10 月～2019 年10 月收治的120 例URSA 患者为研究对象。纳入标准：①夫妇两人无遗传因素问题；②患者自然流产次数≥3 次；④妇科检查，子宫附件检查等无器质性病变；⑤生殖器官无解剖畸形。排除标准：①夫妇任意一方患有乙肝、梅毒等传染性疾病；②不愿参与者。将患者随机分为LIT 组和P 组，各60 例。LIT 组年龄23～41 岁，平均年龄(31.24±7.58)岁。P 组年龄24～40 岁，平均年龄(32.07±6.99)岁。两组患者一般资料比较差异无统计学意义(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 方法 LIT 组：抽取患者配偶或第三方健康男性静脉血25 ml，取等量Hanks 溶液混合，在分流层面上进行离心，取Hanks 溶液进行洗涤，取得淋巴细胞浓度为2×1010～3×1010/L，治疗用量约为0.3 ml/次，行前臂3 点皮内注射，皮丘直径0.2～0.4 cm 左右，孕前每2 周重复治疗1 次，3～4 次为1 个疗程。若患者3 个月内未孕，加强治疗1 次；若患者妊娠，加强1 次后每3个月1次，直至超声显示胎盘发育稳定即可结束治疗。P 组：黄体酮注射液(西南药业股份有限公司，国药准字H50020104，规格：1 ml∶20 mg)，自妊娠开始，每周注射2～3 次，10～20 mg/次。连续治疗1 周。

1.3 观察指标 分别在治疗前后进行相关检查。①淋巴细胞免疫表型：抽取静脉血3 ml，检测TC、NKC 的细胞表型，主要观察的细胞表型为TC 亚群：CD3+T、CD4+T；NKC 亚群：CD3-CD56+NK、CD56dimCD16+NK、CD56brightCD16-NK、CD56+CD69+NK。②IFN-γ、IL-4水平：采用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测分析。记录两组治疗前后指标变化，观察妊娠结局。

1.4 统计学方法 采用SPSS21.0 统计学软件处理数据。计量资料以均数±标准差()表示，采用t检验；计数资料以率(%)表示，采用χ2检验。P＜0.05 表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组治疗前后TC、NKC 表型变化比较 治疗前，两组CD3+T、CD4+T水平比较，差异无统计学意义(P＞0.05)；治疗后，LIT组CD3+T水平高于P组、CD4+T水平低于P组，差异有统计学意义(P＜0.05)。治疗前，两组CD3-CD56+NK、CD56dimCD16+NK、CD56brightCD16-NK、CD56+CD69+NK 水平比较，差异无统计学意义(P＞0.05)；治疗后，LIT 组患者CD3-CD56+NK、CD56+CD69+NK水平均低于P组，CD56dimCD16+NK、CD56brightCD16-NK 水平均高于P 组，差异有统计学意义(P＜0.05)。见表1，表2。

表1 两组治疗前后TC 表型变化比较(，%)

表1 两组治疗前后TC 表型变化比较(，%)

注：与P 组治疗后比较，aP＜0.05

表2 两组治疗前后NKC 表型变化比较(，%)

表2 两组治疗前后NKC 表型变化比较(，%)

注：与P 组治疗后比较，aP＜0.05

2.2 两组治疗前后IFN-γ、IL-4 水平比较 治疗前，两组IFN-γ、IL-4 水平比较差异无统计学意义(P＞0.05)；治疗后，LIT 组IFN-γ 水平低于P 组，IL-4水平高于P 组，差异有统计学意义(P＜0.05)。见表3。

表3 两组治疗前后IFN-γ、IL-4 水平比较(，ng/L)

表3 两组治疗前后IFN-γ、IL-4 水平比较(，ng/L)

注：与P 组比较，aP＜0.05

2.3 两组妊娠结局情况比较 LIT组未成功妊娠2例，P 组未成功妊娠3 例。LIT 组的再发流产率低于P 组，成功分娩率高于P 组，差异有统计学意义(P＜0.05)。见表4。

表4 两组妊娠结局情况比较［n(%)］

3 讨论

妊娠属于一种胎儿与母体共生形态，在正常妊娠情况下，母体免疫功能正常调节使机体对胎儿抗原产生耐受，母体免疫系统并不会因胎儿抗原而产生免疫反应［4］。但对于URSA 患者来说，机体免疫调节能力失常，免疫功能紊乱，母体与胎儿之间的免疫平衡丧失，母体的免疫系统会对胚胎发起免疫攻击，极易导致流产［5］。为提高URSA 患者妊娠分娩的成功率，对LIT 法治疗URSA 的疗效与相关指标变化对比研究，对患者妊娠结局及临床治疗有重要意义。

王挺等［6］的研究发现，CD4+T 细胞减少可降低母体对胎儿的免疫排斥作用。上述结论与本研究结论存在共性。探究其原因，可能是因为URSA 患者T 细胞亚群表达失衡，导致机体强排斥胎儿。LIT 可调节患者免疫功能，稳定患者的免疫功能。NKC 具有细胞毒性，当患者体内NKC 细胞表达活跃时，机体内处于强排斥免疫状态，极易对胎儿抗原产生反应，对胎儿生存发育构成威胁。钟光芹等［7］的研究发现，妊娠成功与否在一定程度上决定于IFN-γ、IL-4 水平。分泌IFN-γ 等细胞因子所产生的免疫反应会损害滋养层细胞及胎儿。IFN-γ 含量增加产生的炎性反应使胎儿状态不稳定，最终导致流产。IL-4 等细胞因子所参与的反应可提高机体排斥反应的耐受力。谢多等［8］通过研究发现，LIT 疗法对提高URSA 患者成功分娩率有着重要意义。LIT 的机理就是通过注射淋巴细胞调整患者免疫功能，大多数URSA 患者免疫系统失衡，母体与胚胎存在免疫冲突，该疗法缓解患者免疫失衡状态，减轻母体对胚胎的排斥，使胎儿存活率显著上升。

综上所述，LIT 对URSA 患者疗效明显，能有效降低母胎间免疫排斥，提高胚胎存活率，降低流产率，值得临床推广。