微柱凝胶法、凝聚胺法及盐水法在交叉配血中的效果评价

曹 敏，庞晓蕾

（江阴临港医院检验科，江苏 无锡 214443）

临床上抢救病人的一种重要方式就是输血，而交叉配血则是给患者输血前的常规检查项目。传统的交叉配血方式为盐水法，但随着科技进步，微柱凝胶法、凝聚胺法在临床也逐渐得到应用[1]。为保证患者的输血安全，本次研究通过对80例血样标本同时进行微柱凝胶法、凝聚胺法及盐水法的交叉配血，比较这3种交叉配血方式的应用效果，现作出以下报道。

1 资料与方法

1.1 资料

选取我院2018年3月-2020年3月80例血样标本进行本次试验。80例血样标本提供者中，男性43例，女性37例，年龄19-57岁，平均（38.06±2.15）岁，其中12例有既往输血史。所有供血者均为无偿献血者，且在知情并自愿的前提下签署知情同意书。

1.2 方法

本次研究选择仪器为TD-A型血型血清学用离心机、FYQ型免疫微柱孵育器以及CX-21奥林巴斯生物显微镜。凝聚胺法试剂选用（台资）珠海贝索生物技术有限公司产品，微柱凝胶法试剂选用长春博迅生物技术有限责任公司产品。

所有血样标本均进行微柱凝胶法、凝聚胺法及盐水法3种交叉配血方法。盐水法严格按照说明书和《输血技术学》[2]操作即可。微柱凝胶法：为受血者和供血者的血样标本均用生理盐水配制0.5%～1%红细胞悬液，将患者姓名仔细标注于配血卡上，取2支试管标注主侧、次侧，将50 μL供血者红细胞悬液和受血者血浆加入主侧，再在次侧也加入50 μL供血者红细胞悬液和受血者血浆。将孵育器温度调至37℃，孵育15 min，再用离心机离心3 min，速度为900 r/min，最后再用1500 r/min的速度离心2 min。若凝胶管底部沉积有红细胞，则为无凝集，若凝胶管胶上、中部聚集有红细胞，则为凝集阳性。凝聚胺法：为受血者、供血者的血样标本分别用生理盐水配制3%-5%红细胞悬液，取2支试管标注主侧、次侧，将2滴受血者血清、1滴供血者红细胞悬液加入主侧试管，将1滴受血者红细胞悬液、2滴供血者血清加入次侧试管。将0.7 mL低离子介质溶液加入2支试管中，并混匀，使用离心机离心15min，速度为3000 r/min，弃上清液，让管底仅残留0.1 mL左右，摇动试管并观察是否凝集，无凝集则重做，2支试管均加入2滴重悬液，摇动后将其置于显微镜下仔细观察。非特异性凝集表现为30s内红细胞散开，反之则为阳性，表现为因血型抗原、抗体引发特异性凝集。

1.3 观察指标

比较微柱凝胶法、凝聚胺法及盐水法在交叉配血中的阳性检出率和耗时。

1.4 统计学

本次研究所有结果数据均采用SPSS 20.0 for Windows进行统计学处理，3种方法的耗时采用t检验，以“”表示，阳性检出率采用x2检验，以[n（%）]表示，P＜0.05表示数据差异显著。

2 结 果

比较3种交叉配血方法的阳性检出率和耗时：盐水法的阳性检出率为86.25%，凝聚胺法阳性检出率为92.50%，微柱凝胶法阳性检出率为98.75%，微柱凝胶法的阳性检出率显著高于盐水法和凝聚胺法，P＜0.05；但凝聚胺法的耗时则明显低于盐水法和微柱凝胶法，P＜0.05。见表1。

表1 比较3种交叉配血方法的阳性检出率和耗时[（）；n（%）]

表1 比较3种交叉配血方法的阳性检出率和耗时[（）；n（%）]

注：3组比较，P＜0.05。

方法 n 阳性检出情况 耗时（min）主测阳性 次测阳性 阳性检出率盐水法 80 5 64 86.25（69/80） 22.67±2.94凝聚胺法 80 6 68 92.50（74/80） 13.18±3.22微柱凝胶法 80 9 70 98.75（79/80） 31.47±3.43 t/x2 9.009 18.619 P 0.011 0.001

3 讨 论

盐水法中的红细胞上抗原决定簇可以与相应抗原结合部位相结合，形成凝集块，在IgM抗体的检出试验中有较高应用价值，且操作相对简单，耗时不长。但该方法中红细胞间的距离为25 nm左右，IgM抗体分子上相邻Fab端的最短距离在35 nm以上，IgG则在25 nm以下，IgG抗体在盐水介质中无法与相应抗体的红细胞进行凝集，因此该交叉配血方法的阳性检出率会相对较低，且会出现溶血性输血反应。

凝聚胺法中的凝聚胺是高价阳离子季胺盐多聚物，可在溶解后产生一定量的正电荷，使红细胞表面的负电荷得到中和，缩小红细胞间距，从而出现可逆非特异性凝集，但若是与抗体致敏红细胞凝集，则会出现不可逆凝集，进而判断受血者与供血者的血液是否可以结合[3]。凝聚胺法的阳性检出率不低，且耗时短，是一种快速、简便的方法，但凝聚胺法无法检测-k抗体。若患者有反复输血史、妊娠史，或有溶血性贫血，自身免疫性抗体、红细胞上抗原较弱，则使用凝聚胺法可能出现漏检。

微柱凝胶法是一项等待完善和推广的新型技术，在临床上已逐渐得到应用。该方法操作也较为简单，易对结果进行判定，且具有高特异性、敏感性、可重复性，试验过程中对试验人员的依赖性小，结果能够得到长期保存，在对患者的后续治疗中可随时复查检查结果[4]。将待检红细胞盐水悬液加入抗球蛋白试剂中时，若红细胞表面抗体球蛋白与试剂中的抗体出现特异性反应，则可凝集，再经离心后观察红细胞是否聚集于凝胶上或中部，以此判断是否为阳性，若聚集于底部，则为阴性。该方法能够有效降低人为误差几率，结果更加准确。但该方法因需借助离心机和孵育器，耗时通常为30 min左右，不适合用于急诊配血中。

本次研究结果显示，微柱凝胶法的阳性检出率显著高于盐水法和凝聚胺法，但凝聚胺法的耗时则明显低于盐水法和微柱凝胶法，P＜0.05。表明微柱凝胶法的检测结果更加准确，可在实际工作中广泛应用，但因其耗时较长，在急诊配血工作中则更推荐使用凝聚胺法。