891例中段尿培养阳性标本感染病原学特点及药敏分析

丁 锋，赵爱学

陕西省汉中市洋县人民医院：1.院办；2.检验科，陕西汉中 723300

泌尿系统感染(USI)是由病原体直接侵犯泌尿系统(如尿路黏膜或泌尿组织等)引起损伤、尿路发生炎症，是临床较为常见的感染性疾病之一。患者一般会出现排尿困难、尿频、尿痛、血尿等症状，感染严重者会出现慢性肾功能不全。仅依据患者的临床症状、尿常规检测及体征检查，临床难以正确判定，致使临床的尿路感染发病率逐年上升[1]。近年来，随着各种抗菌药物、抗癌药物、免疫抑制剂药物大量使用以及侵入性手术操作增多，USI病原菌耐药性不断发生变化，使用原有的一些抗菌药物难以达到应有的治疗效果，新的耐药机制不断出现和多重耐药菌株感染逐年增多，从而严重影响临床诊断和有效治疗USI。尿培养能大大增加USI的诊断正确性，为减少并控制尿路感染以及后续治疗提供依据。研究证实，不同地区USI的病原菌类型存在一定差异[2]。为了解本地区USI患者的病原菌分布特点及耐药情况，本研究采用回顾性调查方法，对汉中市洋县人民医院USI患者自行收集或无菌导出的中段尿培养的阳性标本病原菌分布及耐药情况进行分析，旨在了解本地区USI患者病原菌分布特点及耐药情况，为指导临床治疗USI患者合理选择抗菌药物提供依据。

1 资料与方法

1.1标本来源 选取2018年1-12月在汉中市洋县人民医院肾病、内分泌、泌尿外科等科室门诊、急诊及住院部送检的USI患者自行收集或无菌导出的中段尿标本，共2 679例，包括门诊237例、急诊168例、住院2 274例。患者主要临床表现为发热、排尿困难、尿急、尿频、尿痛、血尿等。其中男性标本1 618例、女性标本1 061例，患者年龄19～55岁、平均(37.6±6.7)岁。排除处于月经期患者的标本。

1.2试剂与仪器 鑫科全自动培养仪由山东鑫科生物技术有限公司提供，鑫科分析仪及配套的鉴定卡、药敏卡由鑫科生物技术有限公司提供。哥伦比亚血琼脂平板、麦康凯琼脂平板、T．M巧克力琼脂平板等由郑州安图生物技术有限公司生产提供。一次性棉拭子和一次性接种环由江苏康健医疗用品公司提供。仪器操作严格按照标准操作规程进行检测。

1.3质控菌株 本实验室质量控制所用质控菌株如金黄色葡萄球菌(ATCC 29213)、铜绿假单胞菌(ATCC 27853)、大肠埃希菌(ATCC 35218)、克柔念珠菌(ATCC 6258)、近平滑念珠菌(ATCC 22019)等均购自国家卫生健康委员会临床检验中心。

1.4方法

1.4.1标本收集与培养 标本收集要求患者冲洗尿道口附近部位并将水渍擦净，自行收集或经无菌导出的清洁中段尿标本6 mL于无菌培养杯中，在1 h内送至检验科微生物室。在无菌条件下量取10 μL，用无菌接种环将标本分别接种于哥伦比亚血琼脂平板、麦康凯琼脂平板及血平板(有特殊需求时，接种T．M巧克力琼脂平板或伊红美蓝平板)，置于温度35 ℃、5% CO2的培养箱中培养18～24 h。平板上出现细菌种类超过两种(不含两种)为细菌污染，培养48 h板上无菌生长为阴性。操作均严格按照《全国临床检验操作规程》[3]开展。

1.4.2细菌鉴定及药敏试验 当中段尿标本培养的菌落计数革兰阴性(G-)菌≥105CFU/mL，革兰阳性(G+)菌和念珠菌≥104CFU/mL时，采用鑫科细菌鉴定仪及配套病原菌鉴定卡对其分离出的单个菌落进行病原菌的鉴定。对同一标本连续2次分离出同一菌株只统计1次结果，病原菌药物敏感试验由鑫科细菌鉴定仪及配套的药敏检测卡在质控菌株在控后，采用世界卫生组织(WHO)推荐的Kirby-Bauer(K-B)纸片扩散法进行药敏试验(念珠菌药敏试验用鑫科念珠菌药敏试验卡完成)。药敏试验结果根据2018年美国临床和实验室标准化协会(CLSI)标准[4]进行判定。

1.5统计学处理 用Excel建立数据库，分类资料及其他计数资料用频率或百分率描述，采用WHONET 8.4软件进行处理。

2 结 果

2.1中段尿标本病原菌检出情况比较 2 679例中段尿标本中共检出891株病原菌，检出率为33.26%。其中男性送检1 618例，检出单一菌株感染482株，2种及以上的混合菌株感染25株,总检出507株，检出率31.33%。女性送检1 061例，检出单一菌株阳性374株，2种及以上的菌株混合感染10株，总检出384株，检出率36.19%。

2.2中段尿培养主要病原菌分布、构成比及总检出率分析 891株病原菌中，G-菌647株(72.62%)，主要以大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌为主；G+菌173株(19.42%)，主要以屎肠球菌和粪肠球菌为主；真菌71株(7.97%)，主要以光滑念珠菌为主。中段尿培养感染病原菌的详细分布及构成比情况见表1。

表1 中段尿培养的主要病原菌分布、构成比及总检出率

2.3中段尿培养排名靠前的病原菌对常用抗菌药物的耐药性分析

2.3.1G-菌排名前4位的病原菌对常用抗菌药物的耐药性分析 结果显示，排名前4位的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、奇异变形杆菌和铜绿假单胞菌对各类抗菌药物均有不同程度的耐药，见表2。

表2 G-菌排名前4位的病原菌对常用抗菌药物的耐药性分析

表3 G+菌排名前3位的病原菌对常用抗菌药物的耐药性分析

2.3.2G+菌排名前3位的病原菌对常用抗菌药物的耐药性分析 结果显示，排名前3位的屎肠球菌、粪肠球菌和表皮葡萄球菌对各类抗菌药物均有不同程度的耐药。屎肠球菌对部分抗菌药物(如红霉素、氨苄西林等)的耐药率均在80.0%以上，对喹努普汀/ 达福普汀的耐药率小于2.0%。粪肠球菌对部分抗菌药物(如红霉素、喹奴普汀/达福普汀等)的耐药率均在70.0%以上，对氨苄西林和青霉素G耐药率均小于15.0%。表皮葡萄球菌对青霉素G、左氧氟沙星等的耐药率均>50.0%，对氨苄西林、环丙沙星的耐药率均<30.0%。排名前3位的G+菌对万古霉素、替加环素和利奈唑胺100.0%敏感，未发现有耐药菌，其耐药率为0.0%。药敏试验结果见表3。

2.3.3真菌对常用抗菌药物的耐药性分析 结果显示，光滑念珠菌和近平滑念珠菌对伏立康唑、氟康唑和伊曲康唑的耐药率均在35.0%以上，对5-氟胞嘧啶耐药率<5.0%。白色念珠菌对所有抗真菌药物的耐药率较低，均<5.0%。这3种真菌对两性霉素B高度敏感。

3 讨 论

USI是医院和社区获得性感染最常见的疾病之一，常伴有尿频、尿痛等膀胱刺激症状[5]；可引起患者肾周围脓肿、尿路结石与梗阻等并发症，严重者可出现肾衰竭或败血症，甚至死亡，已严重影响患者的生命健康和生活质量[6]。及时做好尿液细菌培养及药物敏感性试验，对USI的诊治具有重要的临床意义。

尿液培养是明确USI病原菌的主要方法，对USI的诊断具有较高的应用价值。本研究显示，送检的2 679例标本，共检出891株病原菌，检出率为33.26%，略高于耿雪等[7]报道的29.93%，这可能与检测地区不同有关。对检出的病原菌进行鉴定，发现891株病原菌中，G-菌647株(72.62%)，G+菌173株(19.42%)，真菌71株(7.97%)。这与肖严[8]研究一致，表明USI患者病原菌的构成复杂多样，临床应重视尿液的培养及细菌鉴别，有助于了解USI的致病因素。

及时、有效了解USI的每种病原微生物对抗菌药物的敏感性，对临床合理使用抗菌药物，避免新型耐药菌出现具有重要的意义[9]。本研究发现，G-菌和G+菌排名靠前的病原菌对各类抗菌药物均有不同程度的耐药。其中大肠埃希菌对氨苄西林、环丙沙星等抗菌药物耐药率均在50.0%以上，肺炎克雷伯菌对氨苄西林耐药率为100.0%，对氨苄西林/舒巴坦、环丙沙星等抗菌药物耐药率在25.0%以上。这与文献[10]报道一致，说明G-菌感染治疗时，应慎重选用上述抗菌药物。G-菌排名前4位的病原菌对阿米卡星和亚胺培南耐药率较低，可作为G-菌感染治疗的首选用药，但阿米卡星和亚胺培南临床应用还需慎重。屎肠球菌对红霉素、氨苄西林等抗菌药物耐药率均在80.0%以上，粪肠球菌对四环素、红霉素等抗菌药物耐药率均在70.0%以上，表皮葡萄球菌对青霉素G、左氧氟沙星等抗菌药物耐药率均在50.0%以上，高于苟建军等[11]报道。屎肠球菌对喹努普汀/ 达福普汀耐药率小于2.0%，粪肠球菌对氨苄西林和青霉素G耐药率均小于15.0%，表皮葡萄球菌对氨苄西林、环丙沙星等抗菌药物耐药率均小于30.0%。说明这些抗菌药物可作为USI治疗的经验用药。G+菌排名前3位的病原菌对万古霉素、替加环素和利奈唑胺高度敏感，未发现有耐药菌，其耐药率为0.0%。这与郑瑶等[12]报道一致，提示这3种抗菌药物是治疗G+菌感染的首选药物，但对万古霉素临床应慎重选用。光滑念珠菌和近平滑念珠菌对伏立康唑、氟康唑和伊曲康唑的耐药率均在35.0%以上，白色念珠菌对所有抗真菌药物的耐药率较低，均小于5.0%，这3种真菌对两性霉素B 高度敏感。这表明不同念珠菌对抗真菌药物耐药性有差异，警示临床医师在USI抗感染治疗过程中要明确病原菌的耐药性，应合理使用抗真菌药物。同时注意提高患者免疫力避免真菌感染。因此，临床医师应根据致病菌分离鉴定及药敏结果来合理选择抗菌药物，避免经验性用药。

综上所述，汉中洋县USI阳性标本中病原菌构成复杂、种类较多，G-菌是USI的主要病原菌。不同病原菌呈现高水平耐药，对USI患者应积极开展尿液培养、病原菌鉴定及药物敏感试验，便于临床医师根据病原菌药敏结果为USI患者治疗合理选用抗菌药物提供依据，可有效避免新型耐药菌出现。