新都地区成人血氨测定参考区间的建立*

钟 丽，黄华翠

四川省成都市新都区人民医院检验科，四川新都 610500

生物参考区间通常指参考值分布的95%置信区间[1],是解释检验结果、分析检验信息的基本依据和尺度,是临床判断健康与否的标准，实验室必须保证提供给临床的参考区间可靠、适用，否则容易引起漏诊、误诊[2]。血氨对急慢性肝病的诊断和判断预后有重要作用。临床中血氨增高也常见于消化道出血，是急诊及危重症医学常关注的检测指标之一。建立本地区成人血氨的参考区间，可为相关疾病的诊疗提供更可靠的依据。

1 资料与方法

1.1一般资料 随机抽取2020年1月10-20日到本院体检的健康者402例作为研究对象，其中男200例，年龄18～86岁,中位年龄为43岁；女202例，年龄18～93岁，中位年龄为32岁。每10岁为一个年龄段，男女纳入人群各分为8个年龄段。纳入标准：(1)肝功能检测正常；(2)无消化道出血及其他消化道疾病；(3)近期没有接受输血治疗；(4)无各种肿瘤疾病；(5)无先天性疾病。

1.2仪器与试剂 采用美康生物科技股份有限公司生产的血氨检测试剂盒在贝克曼全自动生化分析仪上进行检测，并将所得的检测结果进行统计学分析。使用配套的校准品(批号：190711102，生产日期：20190711，有效期：20200710，校准值：300.0 μmol/L)和质控品(批号：190927101，生产日期：20190927，有效期：20200926)，检测期间保证每天的室内质控均在控。

1.3方法 所有研究对象均在安静状态下采集空腹静脉EDTA抗凝血3 mL，采血管由江苏康健医疗用品有限公司生产提供(批号：191201，有效期：20210112)，标本3 000 r/min离心15 min，用血浆检测。排除标本量不足、严重溶血、黄疸、乳糜等标本，立即进行检测。所有试验严格按照仪器和血氨项目检测试剂盒的标准操作规程(SOP)进行操作。本研究依据WS/T 402-2012《临床实验室检验项目参考区间的制定》[2]推荐方法，取单侧95%建立各项目的参考区间。

1.4统计学处理 对所得的数据采用Dixon法剔除离群值[3]后，采用SPSS 21.0软件对检测结果进行数据处理及统计学分析。采用K-S检验对有效数据进行正态性检验，对符合正态分布的数据进行t检验；对不符合正态分布的数据，采用非参数秩和检验。采用SPSS描述统计功能，计算血氨数据的P2.5、P5、P50、P95和P97.5百分位数，以单侧第95百分位数(P95)作为参考区间的上限。以P<0.05为差异有统计学意义。

1.5参考区间验证 随机抽取男女各20例体检者做血氨检测，计算R值。R=测定结果在参考区间内的例数/总测定例数×100%。如20例参考个体中不超过2例检查结果落在所验证的参考区间外(即R≥90%)，则可基本认为该参考区间适用；如果有3例及以上的观测值落在参考区间外，则证明该参考区间不适用。

2 结 果

2.1离群值判断 对所得的数据使用Dixon法剔除离群值，将各项目数据分男、女升序排列，疑似离群值与相邻值的差值(D)与数据全距(R)之比D/R≥1/3则判断为离群值。所有检测对象的血氨检测结果按男、女按数值升序排列后，计算D/R值均小于1/3，故保留所有检测数据。

2.2不同性别血氨检测结果比较 经检验,血氨数据为非正态分布。不同性别间血氨检测结果差异有统计学意义(Z=-7.946，P<0.05)。故建议分别建立男性和女性血氨的参考区间。见表1。

表1 不同性别血氨检测结果比较(μmol/L)

2.3不同年龄段血氨检测结果比 各性别不同年龄段间血氨水平差异无统计学意义(P>0.05)。故无需依据年龄分别建立血氨指标的参考区间。见表2。

表2 不同年龄段血氨检测结果比较

2.4健康成人血氨的参考区间 健康成人的血氨检测结果的分布在统计学上存在性别差异，但不存在年龄差异，故建立不同性别参考区间。取单侧95%建立各项目的参考区间，健康成年男性血氨参考区间为0～65.0 μmol/L，健康成年女性血氨参考区间为0～52.0 μmol/L。 见表3。

2.5验证生物参考区间 随机抽取男女各20例体检者检测血氨值，检测结果均在自建参考区间内，即检测结果落在本研究参考区间外的个数为0例(R≥90%)。

表3 成人血氨参考区间(μmol/L)

3 讨 论

氨是人体内氨基酸代谢的主要产物，成人每天产生大约1 000 mmol 的氨，主要在肠道吸收，一部分氨在生物合成中被重新利用，在肝脏通过鸟羧酸循环转化为尿素由肾脏排出[4]，其余部分对机体没有作用甚至具有神经毒性[5]。血氨的检测广泛用于肝脏疾病、小儿先天性高血氨血症等疾病的诊断、鉴别诊断及治疗中[6]。大量临床研究数据表明，高氨血症能活化肝星状细胞和导致肌肉萎缩的发生[7-8]，是肝硬化患者的独立危险因素，与肝性脑病的发生密切相关[9]。除肝源性疾病外，血氨增高还常见于消化道出血及危重患者，大量脏器出血、大量输血、低钾血症、肾脏病变等患者，血氨增高会抑制神经系统的功能，引起昏迷，不利于患者的预后恢复[10]。目前高血氨的研究仍在继续，可能其危害仍未完全发现。生物参考区间是临床判断健康与否的标准，适宜的生物参考区间对疾病的预防、诊断、疗效及预后都有重要的指导意义。临床各实验室使用检测方法、仪器、试剂、环境等不同，加之生物属性本身存在个体差异，故建立适合本地区人群的参考区间尤为重要。本实验室通过对402例健康人群的血液进行血氨检测，建立本地区男性成人18～86岁血氨的参考区间为0～65.0 μmol/L，女性成人18～93岁血氨的参考区间为0～52.0 μmol/L，并通过了实验室内参考区间验证。在得到实验室参考区间的基础上，联系医务科，与临床各科室老师共同商讨确立了适合本地区的血氨危急值。

参考区间的适用性取决于实验室检验结果与建立参考区间结果的可比性和服务人群的适用性[11]。直接引用试剂说明书的参考范围，势必会影响医生对疾病的准确判断，建立本地区血氨的参考区间十分重要和必要，建议每个实验室应根据自己的检测系统和本地区人群特性，建立适合本地区人群的参考区间。