罕见Bmh 类孟买血型1 例血清学鉴定

韩新乐

（江苏省新沂市人民医院，江苏 新沂）

0 引言

孟买血型是1952 年Bhende 在印度发现的，是十分罕见的血型，这种个体红细胞膜上缺乏A、B、H 抗原，而类孟买型与孟买型很相似，红细胞上没有H 抗原，但不同的是类孟买型红细胞上有少量的A 或B 抗原，主要是H 基因受到其抑制基因Z 的影响，基因表达产物大大下降，但仍有一小部分H 产生，这部分抗原在正常A 基因或B 基因作用下，转化成少量的A 或B 抗原，其血清中也有相应的抗A 或抗B 及抗H 抗体[1]。这给实验室ABO 定型和交叉配血带来困难，本例是武汉一家医院送检的标本，经上海血液中心血型参比实验室基因测序为B101/O01,h3h3，也称Bmh血型。现将患者血清学检测报道如下。

1 临床资料

患者，女26 岁，G2PO，临床诊断：宫腔粘连Ⅱ度，无手术史外伤史，无药物史。否认有家族遗传史；现欲行宫腔镜手术备血，由于家属不在本地，家系调查无法及时获得。

2 血型血清学检测

2.1 试剂

单克隆抗-A、抗-B 抗-H 标准ABO 的细胞（批号分别为：20150917、20150917、20150316、20160315）均购自上海血液生物医药有限公司。抗-Lea、抗-Leb（Sanquin，Ho11and 批号：8000168048）。人源抗-A、抗-B 血清自制，实验用O 细胞和B 细胞均来自3 d 以内献血者。

2.2 方法

血型定型、抗体鉴定、吸收放散试验、血型物质检测均按文献[2]操作。仪器：离心机（KA-2200，日本久保田）、普通离心机、水浴箱、孵育器。

3 试验结果

3.1 ABO 正反定型

立即及多次离心后以及将反定型各个试管分别置4 ℃、37 ℃后反应结果如下表1。

3.2 H 抗原检查

患者红细胞与抗H 反应未见凝集，表明患者红细胞上无H 抗原，见表2。

3.3 Lewis 血型检测

Lewis 血型检测该患者为Le（a-b+），提示患者是分泌型，见表3。

表1 患者正反血型鉴定结果（试管法）

表2 患者红细胞悬液与抗H 抗体反应结果

表3 患者红细胞悬液与抗Lea、Leb 试剂反应结果

3.4 患者血清中不规则抗体检测

选择2 个成人正常新鲜O 型、B 型及脐带O 细胞，三洗，配成红细胞悬液与患者血清反应，见表4。提示患者血清中存在抗-I 抗体。

表4 患者血清与正常新鲜O 型、B 型及脐带血反应结果

3.5 吸收放散试验

取一份患者洗涤压积细胞加入一份等量人源抗B 血清混合放4 ℃过夜收，用冷的生理盐水将红细胞洗涤6 次，加入等量生理盐水，于56 ℃10 min 进行热放散，离心取放散液加入B 细胞；同时做O 细胞对照，结果放散液中有抗B 抗体，表明患者红细胞上有B 抗原（对未次上清液2 滴加入B 细胞1 滴应为阴性），见表5。

3.6 吸收后血清效价测定

将患者细胞吸收前后的抗B 血清的效价进行检测，患者红细胞吸收前128，经吸收后抗B 已效价为64，也证实患者红细胞上存在B 抗原。

表5 吸收放散试验结果

3.7 唾液中血型物质检测

将抗A、抗B、抗H 试剂血清进行标化，以出现2+ 凝集强度的最小稀释度作为工作液对唾液中的血型物质进行中和抑制试验，抗A 进行1:4 稀释，抗B 进行1:8 稀释，抗H 进行1:4 稀释，在抗A、抗B、抗H 试管中加入相应的标化试剂50 μL，各加入经煮沸处理的唾液上清液50 μL 室温充分作用30 min，然后加入相应的试剂A、B、O 细胞悬液50 μL，离心观察结果表明，抗A 管2+，抗B 管阴性，抗H 管阴性，近一步证实唾液中有B 和H 血型物质。

4 结果

通过以上一系列的试验可证实该患者为红细胞上H 抗原缺失，存在弱的B 抗原，Lewis 血型为（a-b+），唾液和患者血清中分别检出B 和H 血型物质，根据其血清学特征该患者的血型为类孟买Bmh。

5 讨论

H 抗原受控于FUT1（H）、FCT2（Se）、FUT3（Le）三个基因，它们分别决定红细胞上H 的表达，分泌液中H 物质的出现和消失，及红细胞上是否有Lea或Leb抗原的出现。孟买型是红细胞H 抗原缺乏的非分泌型，基因型是hh，其血清学特征是红细胞不能被抗-A、抗-B、或抗-AB 凝集，血清中则含有抗A、抗B 和抗H 抗体，所以其唾液中无A、B、H 物质而类孟买是分泌型，其血清学特征为红细胞与抗H 不凝集，与抗A、抗B 凝集很弱，甚至用吸收放散才能检出A 和B 抗原，是因为其分泌液和血清中含有A、B 物质，类孟买型都是分泌型（Sese 或SeSe），其Lewis 血型可以为Le（a-b+）/Le（a-b-），Lewis 物质广泛存在于人体，可以通过其检测推断其分泌性[3]。

通过表1、表2 可见：ABO 正反定型不符抗H 抗原阴性，考虑可能是类孟买血型；A、B、O 细胞在4 ℃时全部凝集考虑患者血清中可能有冷抗体存在；患者Lewis 血型为Le（a-b+），从而确定患者为分泌型，并且通过唾液中血型物质的检测进一步明确了该患者为分泌型个体。

为了证实患者弱B 抗原存在，做了吸收放散试验，结果与人源B 血清冷吸收后的血清，效价降低；患者红细胞进行热放散液中检测出B 抗体，则可以证实了患者红细胞上B 抗原的存在，患者唾液血型物质检测结果证实了唾液中有B 和H 血型物质。综上所述该患者血型为Bmh。通过选择病人血清与成人O、B、脐O 细胞进行反应发现该患者血清中存在抗-HI 抗体，HI 抗体是一种自身冷抗体。曾经被认为是无害的，但也有因抗HI 引起的急性输血反应报道。所以输注时要注意保温[4]

类孟买型目前鉴定方法有二种：血型血清学和分子生物学。血型血清学比较适合医院日常检测，根据近年文献报道，总结有几个特点：红细胞上无H 抗原、血清中有弱抗A/B 抗体或H（HI）抗体，血清中及唾液中有少量ABH 物质；Lewis血型为分泌型。本例中B 抗原和抗H 抗体均较弱，有HI 冷抗体很容易误定患者血型为O 型，容易造成严重后果[5-6]。本例类孟买患者输血时，尽量输注同型血或自身输血，如果情况紧急选择37 ℃与患者血清反应最弱或无反应的B 型或O 型预温洗涤滤白红细胞输注，确保患者安全。