尿抗原测定快速诊断儿童肺炎链球菌感染性疾病的临床应用效果分析

路瑞静 吴丽娟 周喜友 肖海军 江凡 纪梓良（通讯作者）

（1 深圳市宝安区妇幼保健院检验科 广东 深圳 518102）

（2 南方医科大学深圳医院泌尿外科 广东 深圳 518101）

肺炎链球菌是目前临床肺炎致病菌中检出率最高的致病菌，因此很多医生在初步用药中首先考虑抗菌谱包括肺炎链球菌的抗生素，但是随着抗生素在临床的广泛使用，导致肺炎链球菌耐药性不断提高，会导致治疗失败结局出现，不得不更换抗生素来治疗，容易造成抗生素滥用和耐药性增长，增加患儿的身体负担[1]。因此初步治疗前明确患儿的致病菌能够提高临床用药的科学性，减少耐药菌的出现[2]。但是由于传统细菌培养方法对实验室条件、技术要求较高，且所花费的时间较长，给临床诊断与治疗带来较大的问题。近些年来一些快速诊断且符合率高的检查方法在临床得到推广使用，尿抗原检测是肺炎链球菌性肺炎临床筛查的常用技术，目前已经有成品试剂盒可供使用，因此在基层医院得到推广使用[3]。文章主要针对尿抗原测定快速诊断在儿童肺炎链球菌感染性疾病临床诊断价值展开分析，报道如下。

1.资料与方法

1.1 临床资料

选取2018 年1 月—2019 年12 月11338 例疑为肺炎链球菌感染性疾病患儿，在除掉年龄＞12 岁人群并筛除掉重复人数之后共计入选9291 例患儿，其中有男孩4704 例，女孩4587 例；年龄为5 个月～12 岁，平均为（5.2±1.3）岁。入选标准：患儿均符合《儿童社区获得性肺炎诊疗指南》中的诊断标准，家属均对本次研究知情并同意本次调查。排除标准：年龄＞12 岁、合并非感染性肺间质性疾病、临床资料不完整的患儿。

1.2 方法

患儿分别进行尿抗原测定快速诊断和传统实验室细菌培养（痰液培养、血液培养）检查。微生物血液培养用的仪器是BACTEC FX400 血培养仪器、BD 血培养瓶。微生物细菌培养用的是迪景生物的血平板、嗜血巧克力平板、麦康凯平板。所有微生物的细菌鉴定使用的是BD Phoenix M50 全自动微生物鉴定药敏分析仪微生物培养使用的培养箱是Thermo 二氧化惨培养箱；生物安全柜为BSC-1600IIA2 生物安全柜。肺炎链球菌抗原检测试剂盒是Alere 的试剂。

样本采集方法：①痰液样本：患儿入院第2 天清晨第一口痰，采集样本前漱口3 次祛除口腔残渣和细菌，然后指导患儿用力咳出深部痰液，然后使用0.9%氯化钠溶液冲洗，去除外层唾液保留脓性成分，尽可能减少口腔菌群影响。跳去脓性部分进行涂片镜检，观察痰液样本是否合格。合格的痰液样本分为两部分，一部分送入细菌培养，另一部分装入EP管内放入-80℃冰库备存；②血液样本：采集患儿肘静脉血，每瓶采血8 ～10ml。上下颠倒数次混匀。血培养瓶需要采2h 内送到实验室；③尿液样本：采集10ml 中段尿，放置于室温中24h 检测，若无法及时检测可放在2 ～8 冰箱中冷冻保存。

1.3 观察指标

以实验室细菌培养结果作为金标准，观察尿抗原测定快速诊断的准确率。肺炎链球菌抗原检测的标本是尿液，结果阳性判读为肺炎链球菌感染，阴性为非肺炎链球菌感染。微生物细菌培养；（1）痰液培养发现肺炎链球菌结果阳性，否阴性。（2）血液培养；一个人不同部位采血培养，任一结果检出肺炎链球菌为结果阳性，否阴性。

1.4 统计学分析

采用SPSS16.0 统计学软件进行统计学分析，计数资料比较采用χ2检验，P＜0.05 为差异有统计学意义。

2.结果

2.1 两种检查方法的结果

尿抗原测定快速诊断与传统实验室细菌培养阳性率分别为16.5%和14.1%，两种检测方法的结果比较差异无统计学意义，见表1。

表1 两种检查方法的结果比较（n，%）

2.2 尿抗原测定快速诊断的符合率

以实验室细菌培养结果作为金标准，肺炎链球菌抗原快速检测的阴性符合率为85.7%，阳性符合率为80.5%，见表2。

表2 尿抗原测定快速诊断的符合率

3.讨论

肺炎是儿科常见疾病之一，临床上发病率较高，且由于儿童肺部功能发育不成熟，多数儿童需要住院治疗。有统计指出，儿童肺炎在欧美国家儿童疾病死亡率中排名第7 位，我国目前无确切儿童肺炎死亡率报道，但预测不会低于欧美国家水平。随着临床抗生素的滥用，导致肺炎主要致病菌的耐药菌株数量不断增长，导致儿童诊疗难度进一步提高，增加了家庭的经济负担[4]。因此，儿童社区获得性肺炎成为我国卫生部门需要解决的重要问题，临床中与此相关的研究也不断增长。

近些年来随着临床检测技术的不断发展，儿童中非典型病原体的检出率不断提升，但检出率最高的还是肺炎链球菌。肺炎链球菌可通过表面蛋白以及鼻咽部上皮细胞表面受体粘附在细胞上，从而定植在呼吸道黏膜上，此时无致病性；但是当上呼吸道粘膜屏障功能以及机体免疫功能下降时可引发疾病，例如上呼吸道粘膜损伤以及慢性肺部炎症性病变等[5]。该病主要可引起肺炎，影像学检查可发现大叶性实变，其次可引起支气管炎，可引起小叶性实变。儿童患病之后由于免疫力不足而出现继发中耳炎、肺脓肿、脑膜炎以及败血症等并发症，对儿童的健康安全造成了较大的威胁[6]。

有研究通过统计发现，2015—2018 年儿童社区获得性肺炎细菌性检查中仍旧以肺炎链球菌一直位居前列，且无论是单一致病菌感染性肺炎还是混合致病菌感染性肺炎儿童中均有较高的检出率，仅次于肺炎支原体位居第2 位[7]。目前临床主要是以实验室培养作为肺炎链球菌性肺炎诊断的金标准，但是由于该方法的培养时间长，同时容易受到不确定因素的影响而出现假阳性率和假阴性率，因此本次研究纳入样本数量超过1 万例，主要是为了减少样本量小而出现的偏差，本次研究中尿抗原测定快速诊断结果的阳性率为15.1%，与国内外相关研究统计结果相近，因此本次研究结果具有较好的重复性[8]。

传统实验室细菌培养方法主要是以痰液、脓液、脑脊液以及肺泡灌洗液作为样本，本次研究中主要是以痰液和血液作为检测样本。传统实验室培养结果虽然具有较高的准确率，但是其对实验室环境以及检验医师技术具有较高的要求，低年资医师可能出现诊断混淆的情况，例如与草绿色链球菌混淆[9]。同时由于肺炎链球菌本身会产生溶解酶，需要血清培养基才能够生长，培养和鉴别方法较为复杂。此外，由于对样本的要求较高，若早期使用了抗生素会影响实验室培养结果。这也限制了传统实验室培养在儿童肺炎链球菌感染性疾病临床诊断中的应用。

由于实验室培养时间较长，因此很多医生在初步治疗中通常会选择覆盖肺炎链球菌的广谱抗生素，如青霉素，无需实验室培养也可获得较好的临床疗效。但是随着现代抗生素的广泛使用，耐药菌数量不断增多且出现多重耐药的情况，有相关统计学指出，青霉素不敏感肺炎链球菌在儿童肺炎链球菌肺炎细菌学检查中的检出率超过10%，且肺炎链球菌对大环内酯类药物的耐药性超过50%，这说明肺炎链球菌耐药性以及耐药谱也不断提升。因此，明确儿童肺炎链球菌感染性疾病的致病菌对于临床合理用药具有重要意义。

尿抗原快速测定方法主要是基于免疫层析法的基础上提出的一种检测方法，其主要是检测PnC 抗原，是肺炎球菌血清型所共有的一种抗原。本次研究使用的肺炎链球菌抗原检测试剂盒是Alere 的试剂盒，具有较高的检出率，且无交叉反应性。该检测方法与传统实验室细菌培养方法相比，仅需要采集患者的尿液样本即可进行检测，且使用的检测工具为试剂盒，具有操作简单的优势，一般来说严格按照试剂盒说明书进行操作即可确保临床检查的可靠性。总体来说由于该检测方法具有操作简单、无创且检测速度快的优势，在国内外获得了多位专家学者的肯定。本次研究中尿抗原测定快速诊断与传统实验室细菌培养阳性率分别为16.5%和14.1%，两种检测方法的结果比较差异无统计学意义（P＞0.05）；以实验室细菌培养结果作为金标准，肺炎链球菌抗原快速检测的阴性符合率为86.3%，阳性符合率为80.1%，这说明了尿抗原测定快速诊断方法具有较高的检测符合率，在儿童肺炎链球菌感染性疾病临床诊断中能够快速检测致病菌是否为肺炎链球菌，从而指导临床用药，确保用药的安全性，减少耐药菌的发生。

综上所述，肺炎链球菌在儿童社区获得性肺炎中具有较高的检出率，尽早明确病因有助于指导临床治疗，提高临床用药的科学性，但是传统实验室细菌培养方法所需时间较长，因此需要寻找更加安全、快速、有效的治疗方法；本次研究发现尿抗原测定快速诊断具有高效、准确度高的特点，能够快速鉴别儿童肺炎链球菌感染性疾病，为患儿的临床治疗提供有效依据。