高危型人乳头瘤病毒感染和女性宫颈上皮内瘤样病变程度的相关性分析

廖鸿力，林 鹏，叶 琼

(1.温州市中心医院病理科，浙江 温州 325000；2.温州医科大学附属第一医院病理科，浙江 温州 325000)

宫颈癌是世界范围内导致女性死亡的第四类恶性肿瘤，仅次于乳腺癌、结直肠癌和肺癌，严重威胁女性健康[1]。人乳头瘤病毒(human papillomavirus，HPV)感染高峰多发生在性生活开始后不久，绝大多数感染(80%)可在数月到两年内被机体的免疫系统清除，只有小部分感染持续存在并有可能发展成为宫颈癌。HPV包括高危型HPV(high risk human papillomavirus，HR-HPV)和低危型HPV(low risk human papillomavirus，LR-HPV)，HR-HPV的持续感染与宫颈癌的发生和发展密切相关[2]。宫颈上皮内瘤病变(cervical intraepithelial neoplasia，CIN)属于癌前病变，多数与高危型HPV感染有关，大量的流行病学资料和实验室证据表明，HR-HPV感染是宫颈癌发生的触发因子，95%以上的宫颈癌由HR-HPV 感染引起，从 HPV持续感染到不典型增生再到宫颈癌通常需要 5～20 年的时间[3]。本次研究探讨HR-HPV和妇女CIN病变程度之间的相关性，为临床上宫颈癌的早期诊断和治疗提供参考。

1 资料与方法

1.1 一般资料

回顾性分析2018年7月至2019年7月于温州市中心医院就诊的154例CIN患者的临床资料，按照CIN程度分为CIN Ⅰ组(52例)和CIN Ⅱ～Ⅲ组(102例)。CIN Ⅰ组患者年龄26～64岁，平均年龄(47.59±3.41)岁，病程1～5个月，平均病程(3.56±0.64)月；CIN Ⅱ～Ⅲ组患者年龄27～63岁，平均年龄(46.89±3.52)岁，病程2～6个月，平均病程(3.73±0.59)个月。两组患者年龄、病程比较差异无统计学意义(P>0.05)。纳入标准：①患者临床资料完整并愿意接受随访调查；②年龄在18～65岁之间。排除标准：①合并其他恶性肿瘤疾病；②合并全身性感染疾病；③患有严重肝脏、肾脏功能性损伤；④妊娠期、分娩期、哺乳期妇女。

1.2 方法

1.2.1样本采集与检测方法

采用无菌拭子清除患者宫颈口部分分泌物，并使用无菌拭子轻压患者宫颈管表层，顺时针旋转5圈并获得足够的上皮细胞样本，取出无菌拭子并放置于试管内，即刻送检。试管保存温度在7℃，且保存时间在24h之内。

1.2.2 细胞学检查

宫颈脱落细胞检测结果参照《子宫颈细胞学报告系统》中的诊断标准，分为：①未见宫颈上皮病变或恶性改变(no intraepithelial lesion malignant，NILM)；②未明确诊断的非典型鳞状上皮细胞(atypicai squamous cells of unknown significance，ASCUS)；③非典型鳞状上皮细胞不除外高级别鳞状上皮内病变(atypicai squamous cells of unknown significance high lesions，ASC-H)；④低级别宫颈鳞状上皮内病变(low grade intraepithelial squamous lesion，LSIL)；⑤高级别宫颈鳞状上皮内病变(high grade intraepithelial squamous lesion，HSIL)；⑥宫颈癌(包括鳞状细胞癌、腺癌)，将ASCUS以上病变设为细胞学检查阳性。

1.2.3 HPV分型检测

采用HPV检测分型核酸试剂盒(上海浦科生物技术有限公司)对患者宫颈上皮细胞样本进行检测，并采用3 000P型PCR实时荧光检测仪(北京库尔生物仪器有限公司)对样本进行DNA提取、杂交导流、PCR扩增等，操作流程严格按照试剂盒说明书及临床检验标准进行。所有患者行HPV分型检测，所有操作均严格按照试剂盒说明书进行。包括13种高危亚型(HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68)。

1.2.4宫颈组织病理活检

细胞学诊断为ASCUS及以上病变或高危型HPV感染者实施阴道镜检查及组织病理学检查。将病理活检中CIN Ⅰ定义为低级病变，CIN Ⅱ～Ⅲ定义为高级病变。

1.2.5观察指标

①不同年龄妇女HR-HPV感染情况，包括单一型HR-HPV感染率、HR-HPV双重感染率、HR-HPV多重感染率；②CIN Ⅰ组与CIN Ⅱ～Ⅲ组HR-HPV感染情况。

1.3 统计学方法

采用SPSS 23.00统计学软件进行数据分析，计数资料采用例数或百分比表示，样本率的比较采用卡方检验或Fisher确切概率法，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 CIN Ⅰ组与CIN Ⅱ～Ⅲ组患者HR-HPV感染情况

154名患者共发现50例HR-HPV感染，HR-HPV感染率为32.47%；CIN Ⅰ组HR-HPV感染率为21.15%，其中HPV 58亚型感染率最高(9.62%)，CIN Ⅱ～Ⅲ组HR-HPV感染率为38.24%，其中HPV 58亚型感染率最高，其次为HPV 16和HPV 52亚型，CIN Ⅱ～Ⅲ组HR-HPV总感染率显著高于CIN Ⅰ组，差异有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 CIN患者HR-HPV亚型感染情况对比(n,%)Table 1 Comparison of infection rates of HR-HPV subtypes in the patients with CIN (n，%)

2.2 不同年龄段CIN患者HR-HPV感染情况对比

不同年龄段CIN患者中18～30岁年龄组HR-HPV感染率最高，共发现31例HR-HPV感染，HR-HPV感染率为66.04%，其次为31～40岁年龄组(16.42%)，>50岁年龄组HR-HPV感染率最低(7.14%)。18～30岁年龄组HR-HPV感染率显著高于31～40岁年龄组、41～50岁年龄组和>50岁年龄组(χ2值分别为30.821、15.155、15.451，均P<0.01)，而31～40岁年龄组、41～50岁年龄组和>50岁年龄组HR-HPV感染率每两组间相比差异均无统计学意义(χ2值分别为0.789、0.490、0.023，均P>0.05)，见表2。

表2 不同年龄段CIN患者HR-HPV感染情况对比(n,%)Table 2 Comparison of HR-HPV infection rates in the patients with CIN among different age groups (n,%)

2.3 CIN Ⅰ组和CIN Ⅱ～Ⅲ组HR-HPV感染相关性比较

CIN Ⅱ～Ⅲ组患者单一型HR-HPV感染率为21.57%，显著高于CIN Ⅰ组的7.69%，差异有统计学意义(P<0.05)，而两组患者HR-HPV双重感染率、HR-HPV多重感染率比较差异均无统计学意义(均P>0.05)，见表3。

表3 CIN Ⅰ组和CIN Ⅱ～Ⅲ组HR-HPV感染率比较(n，%)Table 3 Comparison of HR-HPV infection rates between CIN Ⅰ group and CIN Ⅱ～Ⅲ group (n，%)

3 讨论

3.1 宫颈癌对女性健康的影响

宫颈癌包括鳞癌和腺癌，其中宫颈鳞癌较为常见，我国宫颈鳞癌发病率、病死率较高，且发病趋势呈现年轻化。多数宫颈癌患者早期无明显临床症状，但随着病情的进展，病灶将会发展成浸润癌，进而严重威胁妇女的生活质量及身心健康[4]。2015年中国癌症统计数据显示中国的宫颈癌发病趋势呈现增加状态，患者多见于30岁至59岁之间[5]。刘萍[6]的流行病学调查结果显示在全部宫颈癌患者中，<35岁的者占比从90年代初的5.01%上升至90年代末的9.88%。本研究结果显示154名患者以18～30岁年龄组HR-HPV感染率最高，均显著高于31～40岁年龄组、41～50岁年龄组和>50岁年龄组(P<0.01)，可能与该年龄段性生活比较活跃、初次性生活年龄过早、吸烟、性伴侣数目较多等因素有关。蒋盈盈等[7]调查了2 846例宫颈病变筛查的女性，结果发现HR-HPV感染率为21.01%，其中以21～30岁年龄组感染率最高，该调查中HR-HPV感染率稍低于本研究的感染率，可能与该调查中CIN Ⅱ～Ⅲ患者比例少于本研究有关。研究证实HR-HPV是宫颈癌发病的致病因子，感染HR-HPV的患者前期多无异常表现，长期的持续性HR-HPV感染也成为CIN发生的前兆，对年轻妇女进行HPV感染防控是预防及筛查CIN的主要方法[8]。

3.2 高危型HPV感染与宫颈癌关系

持续HR-HPV感染在宫颈癌发生发展中起重要作用，目前已证实的HR-HPV类型有HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68，不同地区人群的HPV感染检出率及HPV分型结果有一定的差异[9]。本研究结果显示154名患者共发现50例HR-HPV感染，HR-HPV感染率为32.47%。国内学者调查研究结果发现，女性宫颈HR-HPV感染率为21.01%，稍低于本研究的感染率，可能与该调查中CIN Ⅱ～Ⅲ患者比例少于本研究有关[7]。一项HR-HPV感染的Meta分析结果显示，中国女性人群的HR-HPV总感染率在西北地区为12.21%[10]，低于本研究结果，此差异可能与入选女性的生活习惯、卫生保健观念、居住地、性伴侣人数等因素有关。本研究结果显示CIN Ⅰ组和CIN Ⅱ～Ⅲ组中均以HPV 58亚型感染率最高，CIN Ⅱ～Ⅲ组HR-HPV总感染率显著高于CIN Ⅰ组(P<0.05)，可能原因是HPV 16、HPV 52等基因型在世界范围内感染率较高，某些发展中国家能够达到50%，且HPV 16具有逃避免疫检测的能力。此外，本研究结果还发现CIN Ⅱ～Ⅲ组患者单一型HR-HPV感染率为21.57%，显著高于CIN Ⅰ组的7.69%(P<0.05)，而两组患者HR-HPV双重感染率、HR-HPV多重感染率比较差异均无统计学意义(P>0.05)，提示大多数CIN患者是单一HR-HPV感染。韩巍等[11]调查了西安市未央区360例CIN患者，结果发现HR-HPV感染中HPV58亚型比例较高(19.2%)，并以单一感染为主，这与本研究结果相似。

综上所述，CIN患者中以HPV58亚型感染最高，并以单一感染为主，且HR-HPV感染与CIN病变严重程度有关，18～30岁年龄段女性易受HR-HPV感染，应加强该年龄段宫颈病变的筛查和监测。