4 例ABO 正反定型不一致原因分析

盛梅芳，朱辉，王长奇，胡乐君，熊慧莹，邓逸群

(乐平第二医院，江西 乐平 333300）

ABO 血型系统在临床输血中具有非常重要的意义，正确的血型鉴定是保证临床输血安全的首要条件[1，2]。 许多原因可致血型鉴定正反定型不一致，影响血型判定。 ABO 血型鉴定传统的血清学方法包括正反定型试验、吸收放散试验和唾液血型物质中和抑制试验等[3]。在实际工作中，需要分析出现正反定型不一致原因，通过相应的处理措施得到正确的血型结果。 现将本院正反定型不一致的4 例标本进行分析，报告如下。

1 材料与方法

1.1 一般资料 例 1，例 2，男，46，52 岁，江西乐平人，均患多发性骨髓瘤（MM）已有 3～4 年，现全身皮肤水肿，骨髓涂片显示有16% 和25%骨髓瘤细胞，符合MM 改变，在免疫固定电泳中检出γ 区 M成分，IgG 型。尿本周氏蛋白阴性。例 3，例 4，女，72，80岁，江西乐平人，例3 患左股骨粗粉碎性骨折，例4右股骨颈骨折而入院，过去患慢性支气管炎，阻塞性肺气肿，经手术治疗输血。

1.2 材料 RhD 单克隆抗体试剂（批号20160323）、抗筛细胞和抗人球蛋白试剂（产品批号20160807）和ABO 血型反定型细胞（批号20160901）由上海血液生物医药有限公司提供。 抗A、抗B 标准血清(批号2016043001)由北京金豪制药股份公司提供。ABO、RhD 血型定型检测卡（单克隆抗体）批号为20160401、抗人球蛋白检测卡(不规则抗体)批号为20160205 和抗人球蛋白检测卡（交叉配血）批号为20160411， 由长春博迅生物技术有限责任公司提供。

1.3 方法 每例抽取EDTA-K2 抗凝全血标本4ml，不抗凝标本3ml，要求无溶血的新鲜标本。 ABO 血型正、反定型采用试管法及微柱凝胶法，试管法加做正反定型加强性实验[4，5]。 不规则抗体筛查、直接抗球蛋白试验、交叉配血试验采用微柱凝胶法，当进行血型鉴定及交叉配血时， 出现血型正反定型不符及交叉配血不合样本时结合加强性试验分析样本正确血型。

2 结果

2.1 微柱凝胶法血型结果 例1～4 均为正定型为A 型，反定型为AB 型，正反定型不一致。 见表1。

表1 4 例正反定型血型结果

2.2 试管法血型结果 例1、2 均为试管法正定型为A 型，反定型显微镜镜下可见A1、O 红细胞呈缗钱状凝集，加生理盐水后凝集散开[6]。 例 3、4 试管法正定型为A 型，反定型显微镜镜下可见A1、O 红细胞呈聚集趋势，加生理盐水后凝集散开血型鉴定均为A 型。

2.3 试管法正反定型加强性实验 结果四例均为抗-A 血清和患者红细胞悬液成4+强阳性，例1 例2 患者血浆和B 红细胞悬液成2+阳性， 例3 例4，患者血浆和B 红细胞悬液成3+阳性， 患者血浆和A 红细胞都为阴性。

表2 正反定型加强性实验结果

2.4 4 例不规则抗体筛查 直接抗球蛋白试验、交叉配血试验、直抗及抗筛采用微柱凝胶卡，直抗均为阴性，抗筛筛查结果均阴性。 交叉配血试验采用微柱凝胶法及试管抗人球蛋白法， 采用ABO 同型配血，微柱凝胶法交叉配血主侧、次侧均阴性，试管抗人球蛋白法交叉配血主次侧均相合。 四例微柱凝胶法配血结果，见图1。

图1 4 例微柱凝胶法配血结果

2.5 采取增强抗原抗体反应的技术 采取增强抗原抗体反应的技术，加大血清量、置4℃增强反应，用O 型红细胞或自身细胞作为阴性对照[7]，均能做出正确判断，见图2、图3。

图2 未加大血清量图

图3 加大血清量，置4℃增强反应图

2.6 输血情况 例1～4 患者均当天输注A 型去白细胞悬浮红细胞2U， 输血后红细胞总数和血红蛋白均有上升，证明输血有效。 见表3。

3 讨论

输血目前已成为现代医疗中救治的重要手段之一，特别是对于一些先天原因、外伤等造成的血液成分缺乏，输血是有效的治疗措施。 正确鉴定红细胞血型是确保输血安全的先决条件。

表3 输血前后实验室结果变化

本文中， 例 1 例 2 是 MM ，MM 是一种恶性浆细胞病，分泌异常单克隆免疫球蛋白（M 蛋白)，使血清蛋白浓度异常，可使红细胞呈缗钱状而产生假凝集，干扰血型鉴定及交叉配血[8，9]。 一些 MM 患者缺乏相对应的血型抗体，可能是因正常免疫球蛋白和特异性抗体水平明显下降所致。抗-A 或抗-B 特异性仅仅与M 蛋白的某一部分有关， 并不是每例出现M 蛋白单克隆株峰的MM 患者都缺乏抗-A或抗-B。 本文患者即是这种情况，出现血型抗体减少或缺乏。 微柱凝胶卡血型鉴定及交叉配血的局限性在于其无法对血清蛋白紊乱引起的血型正反定型不符及交叉配血进行鉴定。MM 患者由于血液中各种免疫球蛋白成分的影响导致ABO 血型鉴定困难，主要原因是患者抗体减弱。 故在输血科工作中，除了要求操作者要有责任心外，还应掌握常见的血型血清学技术，包括手工试管抗人球蛋白法，以排除各种干扰因素，对临床可疑标本进行准确的血型鉴定及交叉配血。

本文例3 例4 抗体减弱或缺失主要见于老年患者。 老年人随年龄增加其抗体水平会逐渐减弱[10]，作者采取增强抗原抗体反应的技术，如加大血清量、置4℃增强反应等，把O 型红细胞或自身细胞作为阴性对照，也能做出正确判断。 反定型出现假阴性，与反定型细胞B 抗原太弱和患者抗-A 效价太低有关。

综上所述， 正确鉴定ABO 血型在提高临床输血安全方面有着重要意义。 当血型鉴定出现正反定型不一致时，首先应严格按照操作规程进行复查试验，在排除人为因素和技术因素后，根据出现的问题分析原因并采取相应处理措施，正确鉴定血型及得出准确的配血结果，以保证临床输血安全。