阳江市地区儿童αβ 复合- 地中海贫血的基因检测分析

曾研章

（阳江市妇幼保健院检验科，广东 阳江 529500）

地中海贫血（MA）又称海洋性贫血，是临床较为常见的遗传性溶血性贫血疾病，其致病机制是由于患儿遗传性的基因缺陷，从而导致组成血红蛋白的珠蛋白链合成缺失引起， 好发于中南亚沿海地区，可导致患儿发育不良，畸形等症状，甚至造成成活率低[1，2]。 其中 αβ 复合型 MA 是其常见的贫血类型，主要发生在父母α 与βMA 杂合婚配而出生的儿童中，其临床可能无表现，尤其是轻型复合型的个体结合，易导致出现MA 后代，故进行αβ 复合型MA 检测，降低MA 患儿的出生具有重要的临床意义[3，4]。 对此，本研究通过给予阳江市 β-MA 患儿α-MA 基因检测，探讨该地区的儿童αβ 复合-MA的基因检测分析结果， 并为后续临床治疗提供参考。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取 2016 年 6 月至 2018 年 6 月本院β-MA 患儿375 例并进行α-MA 基因检测，纳入标准：⑴经临床症状、实验室、影像学等检查证实为β-MA[5]，⑵年龄≤7 岁，⑶无沟通障碍或精神病病史者，⑷患者或其家属签署知情同意书；排除标准：⑴就诊前经过贫血治疗，⑵有心、肝、肾等严重性疾病，⑶拒绝或终止本次研究者;其中男180例，女 195 例，年龄 1～6 岁，平均 3.29±1.25 岁，体质量指数 19.31～21.25kg/m2，平均 24.62±2.05kg/m2，本次研究已经我院伦理委员会审批且通过， 所有数据来源均真实可靠。

1.2 基因检测方法 对纳入的所有患儿进行α-MA基因检测，即利用PCR-导流杂交技术检测 3 种常见的缺失型 α－MA 基因 (－－SEA、－α3.7和－α4.2);及 3 种常见的突变型 α－MA 基因(QSM、CSM 和 WSM)，试剂盒均购自广州凯普生物技术有限公司。

1.3 常规指标检测 抽取所有儿童上臂静脉血3ml置入ED-TA-K2 抗凝试管中， 血细胞参数采用希森美康1000i 血细胞分析仪， 血红蛋白分析采用Sebia 毛细管电泳仪， 检测记录所有患儿的平均红细胞体积（MCV）、血红蛋白浓度（HGB）、平均红细胞血红蛋量（MCH）、血红蛋白 A2（HbA2）。

1.4 统计学方法 采用SPSS 22.0 软件处理，计量资料均符合正态分布，以（±s）表示，多组计量资料的比较采用方差分析并通过SNK-q 检验进行进一步的组间比较，P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 β-MA 患儿中 αβ 复合-MA 发生率 375 例β-MA 患儿中，αβ 复合-MA 者有 122 例（32.53%），其中轻型 70 例（15.73%），分别为－α3.7/αα20 例，－α4.2/αα11 例，－－SEA/αα5 例，αWSα/αα17 例，－α3.7/－α4.26 例 ，－－SEA/－α3.7、 －α3.7/αWSα、 －α4.2/αWSα、αWSα/αWSα 各 2 例，－α3.7/－α3.7、－α4.2/－α4.2、αQSα/αα 各 1例，共检出 24 种基因型组合，轻型 αβ 复合-MA 者以－α3.7/αα 突变频率最高。 重型 52 例（16.80%），分别为分别为-α3.7/αα20 例，-α3.7/αWSα18 例，-α4.2/αα、αWSα/αα 各 4 例，--SEA/αα、-α4.2/ αWSα 各 2 例，-α3.7/-α4.2、αWSα/αWSα 各 1 例，共检出 15 种基因型组合，重型 αβ 复合-MA 者以-α3.7/αα 突变频率最高，见表1，表2。

2.2 不同基因型αβ 复合-MA 者的血液分析 不同基因型 αβ 复合-MA 者平均 MCV、HGB、MCH、HbA2 间比较，差异有统计学意义（P＜0.05），见表3。

3 讨论

MA 是临床较为常见的血液系统遗传病，好发区域为我国广东、海南、广西等地区中，其中α-地贫的发病率为3.9%～14.9%；β-地贫则为0.9%～5.9%[5]。 而根据地贫遗传规律，如果是相同类型的MA基因携带者进行婚配， 生育αβ 复合型MA 的概率为25.0%。 且随着我国几年来二胎政策的开放，其发病率有明显上升的趋势，故临床如何针对性的对αβ 复合型MA 进行基因检测， 有利于确保后代的健康出生[6-8]。

表1 70 例轻型αβ 复合型MA 基因突变类型(n)

表2 52 例重型αβ 复合型MA 基因突变类型(n)

表3 不同基因型αβ 复合-MA 者的血液分析

对此，本研究通过给予所有β-MA 患儿α-MA基因检测， 结果发现 375 例 β-MA 患儿中，αβ 复合-MA 者有 122 例(32.53%)，其中轻型 70 例（15.73%），以-α3.7/αα（CD41-42(- TCTT)）突变频率最高，重型 52 例（16.80%），以-α3.7/αα 突变频率最高，而夏威夷等[9]人的研究结果也证实了β-MA 患儿可能携带 αβ 复合基因， 表明该地区患儿 αβ 复合-MA 基因携带的发生率较高。 这可能由于MA 是最早在分子水平上阐述其病理学机制的人类遗传病之一，引起β-MA 的分子机制主要是β 珠蛋白基因点突变，α-MA 发生的分子机制则以α 珠蛋白基因缺失为主，亦有少数因α 珠蛋白基因的点突变导致其功能障碍，缺失数目和范围有种族和地区差异，且在已知的300 多种突变类型，中国以CD41-42(-TCTT)最为常见，这与本研究的结果基本一致[10，11]。

同时，本研究还发现不同基因型αβ 复合-MA者的平均 MCV、HGB、MCH、HbA2 间比较(P＞0.05)，表明不同基因型αβ 复合-MA 者的血液学特征存在差异，而郑琳、梁志洪等[12，13]人的研究也提示血细胞和血红蛋白在αβ 复合-MA 中具有诊断价值。这可能由于在αβ 复合-MA 患者中，随着有功能的α－珠蛋白基因拷贝数减少，MCV、MCH 甚至有所升高， 并且 α、β 的复合突变也导致 α、β 链的合成都有所降低，继而使HbA2 相对较高，同时α－地中海贫血基因中和β－地中海贫血表现的程度依赖于失活的α 珠蛋白基因个数， 通常失活1 个α 基因对β－地中海贫血表现没有明显影响，而失活 3 个α 基因对β－ 地中海贫血的临床表现影响就会很明显，表现为HGB 指标明显下降。 此外，随着α、β链的合成降低，也会一定程度上影响两类肽链的平衡状态，可能有进一步加重αβ 复合-MA，但本研究中基于不同基因型αβ 复合-MA 者的血液学分析比较，虽然部分指标差异有统计学意义，但也有部分指标难以区分，故不能准确鉴别复合型个体与单纯β-MA 杂合子个体。

由于轻型αβ 复合-MA 难以引起疾病的表型加重，故在婚检、产检中应重视父母双方是否是α－MA、β－MA 杂合子个体或是 αβ 复合型－MA 基因携带者，如若父母是以上基因携带者，则可能增加重型-MA 后代的风险。 为了能够使αβ 复合型地中海贫血基因携带者得到及时、准确的遗传，临床应重视父母是否是上述基因的携带者[14，15]。

综上所述，αβ 复合-MA 的发生率高， 轻型者以－α3.7/αα 突变为主， 重型者以以－α3.7/αα 突变为主，不同基因型αβ 复合-MA 者血液学特征存在差异但不能准确鉴别复合型个体与单纯β-MA 杂合子个体，应行αβ-MA 基因检测诊断，以及时发现并采取有效的干预措施。