AECOPD 患者外周血嗜酸性粒细胞水平与IgE 及FeNO 的相关性分析

田文景

（河南省神火集团职工总医院呼吸内科，河南 永城476600）

慢性阻塞性肺疾病 （chronic obstructive pulmonary disease，COPD）是一种全球范围内常见的多发病，全球40 岁以上人群发病率高达9%～10%，且病死率和致残率较高[1]。 COPD 以持续性气流受限为主要特征，表现为慢性气道炎症和肺气肿。 目前研究表明，其病因多于吸烟、化学物质、粉尘、空气污染等外部因素和气道高反应性、遗传等内部因素有关，发病机制涉及CD8+T 淋巴细胞、巨噬细胞、中性粒细胞等[2]。 近年来研究报道，慢性阻塞性肺疾病急性加重期（Acute exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease，AECOPD） 患者外周血中嗜酸性粒细胞（eosinophil，EOS）增多，而嗜酸粒细胞气道炎症预示着患者对吸入性或系统性糖皮质激素反应良好，与预后改善有关[3]。 呼出气一氧化氮（fractional exhaled nitric oxide，FeNO）由 EOS、中性粒细胞等产生，是气道炎症情况的灵敏检测指标[4]。 免疫球蛋白 E（immuneglobulin E，IgE）是介导超敏反应的介质，研究表明，气道高反应性、超敏反应可能是AECOPD 患者糖皮质激素有效治疗的重要基础[5]。目前尚未见有关AECOPD 患者外周血EOS 与FeNO、IgE 的关系研究，本研究分析AECO PD 患者外周血 EOS%与 FeNO、IgE 的相关性，探讨其意义，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择 2017 年 1 月-2018 年 3 月本院收治的83 例AECOPD 患者作为病例组， 男56例，女 27 例，年龄 42～76 岁，平均年龄 60.53±11.81岁，其中全身炎症表型45 例，频发急性加重表型38 例。纳入标准：⑴均符合慢性阻塞性肺疾病诊断标准[6]；⑵呼吸道症状急性加重；⑶患者及家属知情并自愿参与;⑷经医院伦理委员会批准。 排除标准：⑴因AECOPD 再次住院者；⑵支气管哮喘、肺结核、肺炎、肺癌等其他肺部疾病；⑶合并心脏、肾脏、肝脏等其他脏器慢性疾病；⑷合并自身免疫系统及血液系统疾病; ⑸近期内使用过糖皮质激素。另选择 50 例健康者为对照组，男 32 例，女 18 例，年龄 40～80 岁，平均年龄 61.15±12.76 岁。 两组性别、年龄等一般资料比较差异无统计学意义（P＜0.05）。

1.2 方法

1.2.1 外周血EOS 和IgE 检测 采集患者外周血5 ml，分成两份：一份采用流式细胞术检测EOS，方法:加入 4～10mol/L 茶碱、4～10mol/L 地塞米松中，37℃下预处理 24h， 然后加入 20μl CD16 PEmAb 和20μl CD62L mAb-FITC 中进行双标记染色，准确找到EOS， 采用FAC SCalibur 流式细胞仪 （美国BD公司）分析EOS 阳性比例。 根据EOS 检测结果，将患者分为两组：EOS%≤2%组40 例，EOS%＞2%组43 例，两组性别、年龄、体重、吸烟史等一般资料比较差异无统计学意义（P＜0.05），最大呼气第一秒呼出的气量容积占预估值的百分数（FEV1%）、FEV1与用力肺活量FVC 比值（FEV1/FVC）等一般资料比较差异有统计学意义(P＜0.05)。见表1。另一份离心后收集血清， 采用酶联免疫吸附法检测IgE 水平，人IgE ELISA 试剂盒购于上海樊克生物科技有限公司。

1.2.2 FeNO 检测 采用Niox Mino FeNO 检测仪检测患者FeNO，方法参照美国胸科学会/欧洲呼吸学会推荐的FeNO 标准化测定指南。 患者在检测前1h 禁食、禁水、禁剧烈运动，测定时控制流速50 ml/s，呼出时间 10 s，反应 90 s～100 s 后读数。

1.3 统计学分析 统计学软件SPSS22.0 用于统计分析数据，外周血IgE 和FeNO 水平等计量资料用平均数±标准差表示， 两组比较采用两独立样本t检验，死亡率、再住院率等计数资料用百分数表示，组间行 χ2检验，Pearson 相关系数（r）法分析 AECOPD 患者外周血 EOS%与 IgE 和 FeNO 的相关性，P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

表1 EOS%不同分组临床资料

2.1 病例组和对照组外周血EOS、IgE 和FeNO 水平 病例组外周血EOS 比例高于对照组，IgE 和FeNO 水平高于对照组， 病例组和对照组外周血EOS、IgE 和 FeNO 水平比较差异有统计学意义（P＜0.05）。 见表2。

2.2 EOS%不同分组IgE 和FeNO 水平 EOS%＞2%组患者外周血IgE 水平高于EOS%≤2%组患者，两组外周血IgE 水平比较差异有统计学意义 （P＜0.05）； EOS%＞2%组患者外周血 FeNO 水平高于EOS%≤2%组患者，但两组外周血FeNO 水平比较差异无统计学意义（P＞0.05）。 见表3。

表2 病例组和对照组外周血EOS、IgE 和FeNO 水平比较

2.3 病例组 EOS 与 IgE、FeNO 的关系 病例组外周血EOS%与IgE 水平呈显著正相关关系(r=0.655，P=0.000)， 与 FeNO 呈显著正相关关系 (r=0.501，P=0.006)。 见图1。

表3 EOS%不同分组IgE 和FeNO 水平比较

图1 病例组EOS%与IgE、FeNO 的相关性

2.4 病例组EOS%与患者预后的关系 83 例AECOPD 患者经治疗，死亡8 例，死亡率9.64%，治疗后随访1 年，再次住院45 例，再次住院率54.22%。其中EOS%≤2%组，死亡7 例，死亡率17.50%，再次住院27 例， 再次住院率67.50%；EOS%＞2%组，死亡1 例，死亡率2.33%，再次住院18 例，再次住院率41.86%。 EOS%≤2%组死亡率和再次住院率均高于EOS%＞2%组，两组死亡率和再次住院率比较差异有统计学意义（P＜0.05）。

3 讨论

全球COPD 流行病学调查显示，2010 年全球COPD 患病率为11.7%，其中城市居民患病率13.6%高于农村居民9.7%， 成年男性总患病率14.3 %高于女性7.6%，预计至2020 年COPD 将上升成为全球疾病死因的第三位[7]。 COPD 急性加重对患者肺功能、疾病进展产生严重不良影响，是COPD 患者死亡的重要原因。 以往研究表明，AECOPD 与中性粒细胞性炎症有关，近年来研究发现，10%～45%的AECOPD 患者存在嗜酸粒细胞性炎症， 且诱导痰EOS 增多与患者吸入糖皮质激素治疗效果有关[8，9]。 但临床上诱导痰 EOS 检测不适合诱导咳痰困难、呼吸困难患者，存在一定局限性。 外周血EOS便于检测， 研究报道，AECOPD 患者外周血EOS%≥2%预测诱导痰EOC≥3%的ROC 曲线下面积为0.85，敏感性为90%，特异性为60%，证实外周血EOS 能够高效识别 AECOPD 患者嗜酸性炎症[10，11]。

气道慢性炎症反应是COPD 进展的重要原因之一， 炎症反应过程中T 淋巴细胞分泌白细胞介素，可调节气道IgE 和EOS，产生气道高反应，同时B 淋巴细胞产生 IgE 可使 EOS 活化[12，13]。 IgE 是淋巴细胞等与变应原接触后，引发浆细胞反应而产生的免疫球蛋白，IgE 升高提示过敏性反应。COPD 急性发作时，多种细胞在肺部感染因子的刺激下过表达诱导型一氧化氮合成酶， 导致一氧化氮合成增多，造成气道炎症及组织损伤，研究表明，FeNO 是评估气道嗜酸性炎症的临床指标[14]。 本研究结果，AECOPD 患者外周血 EOS%、IgE 和 FeNO 均显著高于对照组，证实 AECOPD 患者 EOS、IgE 和 FeNO增多，与以往研究结果一致。 本研究根据外周血E OS%将AECOPD 患者分为两组，EOS%＞2%组患者外周血IgE 显著高于EOS%≤2%组患者，FeNO 高于EOS%≤2%组但差异无统计学意义。 病毒等病原体刺激机体，引起浆细胞分泌IgE 可作用于肥大细胞，使其脱颗粒产生白三烯、组胺等炎性介质，并使EOS 增多，机体处于致敏状态。当机体再次受到变应原刺激后，EOS 活化产生气道高反应、呼吸困难、 咳嗽加剧等。 本研究相关性分析显示，AECOPD 患者外周血EOS%与IgE、FeNO 分别呈显著正相关关系。

临床研究表明，EOS 减少标志着COPD 患者细菌感染强度增加，与COPD 急性期患者预后不良有关[15]。 何浪涛等研究报道，EOS 减少与AECOPD患者病死率、 再入院率及机械通气率增加有关[16]。提示EOS 可用于预测AECOPD 患者预后。 本研究结果，AECOPD 患者外周血EOS%≤2%组，治疗期间死亡发生率17.50%，治疗后再次住院率67.50%，而EOS%＞2%患者，治疗期间死亡发生率2.33%，再次住院率41.86%，EOS%≤2%患者死亡率和再次住院率均显著高于EOS%＞2%患者， 与何浪涛、张莹莹等研究结果一致[17]。越来越多的研究证实，EOS水平与COPD 患者病情严重程度有关。 George 等研究表明，EOS 计数在稳定期和急性期COPD 患者之间存在明显差异， 痰EOS 增多患者表现出对皮质类固醇治疗的良好反应[18]。 吴艳等研究报道，血EOS 增多的AECOPD 患者对糖皮质激素治疗反应较快， 血EOS 检查有助于对患者病情进行分层，以优化治疗方案，提高治疗效率[19]。

综上所述，AECOPD 患者外周血EOS 比例升高，IgE 和 FeNO 水平升高， 且 EOS 比例与 IgE 和FeNO 水平呈显著正相关关系，提示AECOPD 患者嗜酸粒细胞性炎症水平可能与气道炎症反应、过敏反应有关。 高EOS 比例患者对糖皮质激素等治疗反应增强，可有效降低气道炎症和过敏反应，改善预后，降低AECOPD 患者死亡率和再入院率。本研究不足之处在于纳入样本量较少，未进行综合因素分析，下一步将继续扩大样本量，探讨外周血EO S 水平在COPD 进展中的意义，及对AECOPD 患者临床治疗的指导意义。