血清HE4与TWEAK在子宫内膜癌中的表达

徐士达，张丹凤，窦鹏挥，肖晓超

(1.佳木斯大学附属第一医院，黑龙江 佳木斯 154003；2.佳木斯市妇幼保健院，黑龙江 佳木斯 154002)

子宫内膜癌是人类七大恶性肿瘤之一，严重威胁女性健康及生命质量[1]，该疾病一般无法预防，可尽量减少高危因素降低患病率，如早期诊断及时治疗其预后较好，但大多数患者发现较晚，晚期患者5年生存率及生命质量明显降低，现针对早期诊断并没有可观手段。在国内外研究中发现血清附睾蛋白HE4在子宫内膜癌患者中呈现高表达[2]，可能作为其早期诊断肿瘤标志物。研究中发现血清肿瘤坏死因子样凋亡微弱诱导剂(TWEAK)是一种肿瘤坏死因子[3]，其在多种肿瘤细胞中呈现高表达，可能成为早期子宫内膜癌新的肿瘤标志物。本研究旨对不同子宫内膜患者中血清HE4及TWEAK的表达，分析其在子宫内膜癌中表达情况及相关性。

1 一般资料

选取佳木斯大学附属第一医院妇科2017-10～2019-12住院收治的经病理检查确诊子宫内膜癌患者60例，年龄38～78岁；同期住院病理检查结果为子宫内膜不典型增生症行子宫全切术患者20例，年龄43～56岁；正常因子宫肌瘤要求行子宫全切术术后病理为正常增生期子宫内膜组织患者20例为对照组，年龄28～52岁。以上患者术前均未行放化疗或激素治疗等任何辅助治疗，且无其他恶性肿瘤合并。实验前病人知情同意并经医院伦理委员会批准。3个组别年龄差异无统计学意义(P>0.05)。血液标本均非月经期采血，标本取自术前2～3d，空腹肘静脉血5～7mL，血样放入无添加抗凝剂真空采血管，剔除溶血标本，4℃冰箱封存，离心机离心(3000r/min)，取上清液装入聚丙烯RP管，冻存-80℃冰箱待测。

2 方法

2.1 血清HE4检测

血清HE4 ELISA试剂盒为瑞典康乃格产品, 用酶联免疫吸附试验 (ELISA双抗体夹心法) 检测，按照说明书操作。

2.2 血清TWEAK检测

血清TWEAK ELISA试剂盒为美国R&D产品，用酶联免疫吸附试验 (ELISA双抗体夹心法) 检测，按照说明书操作。

2.3 参考值与阳性判断值

血HE4试剂盒提供的参考值为0～150pmol/L,>150pmol/L判断为阳性。血清中TWEAK的浓度, 以正常健康妇女TWEAK水平均数±1.96S作为上下临界值。

2.4 统计学方法

采用SPSS23.0软件分析,计数资料采用χ2检验、连续性校正χ2、Fisher确切概率法检验及Spearman等级相关性进行分析，P<0.05时差异具有统计学意义。

3 结果

3.1 血清HE4在不同子宫内膜组间表达情况

血清HE4在子宫内膜癌、不典型增生的子宫内膜及正常增生期子宫内膜组中表达经χ2检验显示有统计学意义，将表达情况进行组间差异对比，结果显示血清HE4在子宫内膜癌组与不典型组及正常组比较具有统计学差异(χ2=3.889，χ2=5.878，P均<0.05)，而不典型组与正常组间血清HE4的表达情况无统计学差别(P>0.05)。见表1。

表1 血清HE4在不同子宫内膜组间表达

3.2 血清TWEAK在不同子宫内膜组间表达情况

血清TWEAK在子宫内膜癌、不典型增生的子宫内膜及正常增生期子宫内膜组中表达经χ2检验显示有统计学意义，将表达情况进行组间差异对比，结果显示血清TWEAK在子宫内膜癌组与不典型组及正常组比较具有统计学差异(χ2=8.867，χ2=11.380，P均<0.05)，而不典型组与正常组间血清TWEAK的表达情况无统计学差别(P>0.05)。见表2。

表2 血清TWEAK在不同子宫内膜组间表达

3.3 子宫内膜癌组中血清HE4与TWEAK表达的相关性

血清HE4与TWEAK在部分子宫内膜癌组标本中同时呈现阳性表达，经Spearman等级相关分析检测，发现血清HE4与TWEAK在子宫内膜癌组中表达呈正相关(r=0.386，P<0.05)。见表3。

表3 在同一标本中血清HE4与WEAK表达

4 讨论

随着近几年研究不断加强，在遗传和分子信息方面的研究越来越多用于诊断、治疗及预防，故许多研究人员不断致力于寻找早期诊断和治疗子宫内膜癌的分子标志物[4]。研究发现HE4主要分布于生殖系统上皮如附睾、曲细精管、输精管上皮、输卵管上皮和子宫内膜，子宫内膜癌组织中90% HE4表达都是强阳性的，并且与组织病理类型无关[5]。多数研究表明HE4对子宫内膜癌早期诊断检测具有重要价值[6]。研究发现TWEAK是一种肿瘤坏死因子[3]，大量研究发现TWEAK在多种肿瘤细胞中表达介导不同生物学活性，可以促进新生血管的生成, 并起着调节免疫反应的作用，还可以诱导血管内皮生长因子 (VEGF) 和IL-8的生成，可能成为子宫内膜癌早期诊断肿瘤标志物。

本研究结果显示血清HE4在子宫内膜癌患者中阳性率明显高于不典型增生及正常增生期子宫内膜患者(P<0.05)，说明血清HE4水平可以用于子宫内膜癌的早期辅助诊断，可进一步确定其检测阳性区间范围指导临床，对于血清HE4指导子宫内膜癌复发及预后评价需进一步验证。研究结果与国内外多数研究结果一致，血清HE4在子宫内膜癌早期即明显升高，考虑HE4可能与子宫内膜癌进一步演变发展存在关联，检测血清HE4的表达，可对恶变倾向的子宫内膜病变患者进行早期诊断, 早期治疗。本研究结果发现血清TWEAK在子宫内膜癌患者中阳性率明显高于不典型增生及正常增生期子宫内膜患者(P<0.05)，与血清TWEAK在多种肿瘤研究结果中表达情况相同[7，8]，说明血清TWEAK同样可以对于子宫内膜癌患者进行早期辅助诊断，可作为子宫内膜癌一种肿瘤标志物。在本研究中发现在部分子宫内膜癌患者中血清HE4及TWEAK同时呈现阳性表达呈正相关性(P<0.05)，考虑二者在子宫内膜癌的演变中存在协同性，提示血清HE4及TWEAK联合检测可对于子宫内膜癌的早期诊断具有重要应用临床价值, 有望为子宫内膜癌的早期筛查诊断奠定实验基础。