α1酸性糖蛋白、谷胱甘肽还原酶在原发性肝癌中的表达及与患者临床特征的关系

董海波，周旭，武婉君，王亚玲，薛冉冉 郑州颐和医院医学检验科，郑州450018

原发性肝癌是指发生在肝细胞或肝内胆管细胞中的恶性肿瘤，具有疾病进展快，病死率高的特点，其病死率位居恶性肿瘤的第二位[1]。肝癌的早期临床症状不明显，约70%的患者在治疗时已处于中晚期，错过了最佳的治疗机会，预后不良[2]。因此，急需寻找一种有效的诊断方法，早发现、早治疗，有利于控制疾病进展。目前，临床主要通过检测甲胎蛋白（α-fetoprotein，AFP）诊断原发性肝癌，但特异度不高，影响了临床医师的判断[3]。研究显示，肝癌患者的血清α1酸性糖蛋白（α1-acid glycoprotein，α1-AG）水平明显高于肝脏良性病变患者和健康者[4]，对肝癌的诊断具有重要意义。谷胱甘肽是细胞中的关键抗氧化剂和自由基清除剂，把机体内有害的毒物转化为无害的物质，排泄出体外。传染性肝炎、急性肝炎、肝硬化和涉及肝转移的恶性病变的初期，血清中谷胱甘肽还原酶（glutathione reductase，GR）活性水平明显提高[5]，GR是用于评估肝损伤程度的重要指标。本研究探讨原发性肝癌患者血清α1-AG、GR水平及与患者临床特征的关系，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2018年1月至2019年12月郑州颐和医院收治的原发性肝癌患者。纳入标准：均经病理学确诊为原发性肝癌；既往未接受过放化疗等抗肿瘤治疗。排除标准：合并糖尿病、免疫风湿病、内分泌疾病等其他疾病；合并其他系统恶性肿瘤。依据纳入和排除标准，本研究共纳入196例原发性肝癌患者，作为观察组，其中男113例，女83例；年龄（53.30±6.10）岁；体重指数（body mass index，BMI）为（22.15±3.22）kg/m2。同期选取在本院进行健康体检的100例健康者作为对照组，其中男52例，女48例；年龄（54.42±8.11）岁；BMI为（22.78±4.10）kg/m2。两组受试者性别、年龄和BMI比较，差异均无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2 检测方法

抽取两组受试者空腹静脉血5 ml，3000 r/min离心15 min，采用AU5800自动生化分析仪检测α1-AG水平；采用氧化型谷胱甘肽（oxidized glutathione，GSSG）底物法，AU5800自动生化分析仪检测血清GR活性。

1.3 统计学方法

采用SPSS 22.0软件对所-有数据进行统计分析，计量资料以均数±标准差（x±s）表示，组间比较采用t检验；计数资料以例数和率（%）表示，组间比较采用χ2检验；相关性分析采用Pearson相关分析；以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组受试者血清 α 1-AG、GR水平的比较

观察组患者血清α1-AG、GR水平均明显高于对照组患者，差异均有统计学意义（P＜0.05）。（表1）

表1 两组受试者血清 α 1-AG、GR水平的比较（±s）

表1 两组受试者血清 α 1-AG、GR水平的比较（±s）

组别观察组（n=196）对照组（n=100）t值0.84±0.18 0.56±0.17 12.895 101.22±24.43 71.10±19.32 10.732 P值α1-AG（g/L）0.000 GR（mIU/ml）0.000

2.2 不同临床特征原发性肝癌患者血清 α 1-AG、GR水平的比较

不同性别、年龄、BMI、肿瘤直径、分化程度和乙肝病毒感染情况原发性肝癌患者血清α1-AG水平比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）；TNM分期为Ⅲ～Ⅳ期的原发性肝癌患者血清α1-AG水平明显高于TNM分期为I～Ⅱ期的患者，差异有统计学意义（t=6.225，P=0.000）。不同性别、年龄、BMI、分化程度和乙肝病毒感染情况原发性肝癌患者血清GR水平比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）；肿瘤直径≥5 cm、TNM分期为Ⅲ～Ⅳ期的原发性肝癌患者血清GR水平均明显高于肿瘤直径＜5 cm、TNM分期为I～Ⅱ期的患者，差异均有统计学意义（t=4.830、11.154，P=0.000）。（表2）

2.3 相关性分析

Pearson相关分析结果显示，α1-AG水平与GR呈正相关（r=0.312，P＜0.05）。

3 讨论

原发性肝癌是高度恶性的恶性肿瘤，其发病与乙型肝炎、丙型肝炎、肝硬化和病毒性肝炎密切相关[6]。随着肿瘤的生长和转移，可能导致黄疸、上消化道出血、肝性脑病、腹痛及肝肾功能衰竭等[7-8]。原发性肝癌的发病机制尚未完全清楚，患者治愈率和总生存率较低，由于其发病隐匿，缺乏早期典型的临床症状，一旦出现明显的症状，则表明肿瘤正在迅速进展，且患者多已经发展到晚期。若不及时治疗，可能发生转移并扩散到体内其他重要器官。甚至威胁生命和健康。因此，及早诊断原发性肝癌对治疗和预后均非常重要。影像学检查是诊断原发性肝癌的重要方法，甲胎蛋白是常见的实验室检查指标，但部分患者可能会出现假阴性结果，因此，有必要寻找具有更高灵敏度和特异度的血清标志物[9-11]。

研究发现，氧化损伤在肝癌发生发展中发挥重要作用，但其具体作用机制仍不清楚[12]。α1-AG是肝脏分泌的蛋白质，作为血清黏蛋白的主要成分，其是人体血浆中糖含量最高、酸度最强的糖蛋白，分子量为41 000～43 000 kD，由183个氨基酸组成，并含有高唾液酸[13]。研究发现，肝癌患者血清中α1-AG水平明显升高，是诊断肝癌的潜在肿瘤标志物[14]。肝脏是人体重要的解毒代谢器官，当受到药物、内源性或异质性等的刺激，可发生氧化应激反应，产生自由基并损害肝脏。谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase，GPX）和GR共同参与谷胱甘肽微循环的调节和维持，清除自由基和过氧化物，并抵抗各种内源性和外源性的刺激[15]。有研究表明，肝损伤患者血清和肝脏中GR水平明显升高[16-17]，进一步的研究证实，肝损伤期间的氧化应激反应导致血清GR水平升高，可激活人体自身的抗氧化保护系统，以消除自由基造成的伤害，在该系统中GPX使用谷胱甘肽转移电子以消除有机物或无机过氧化物来生成GSSG，而GR可将GSSG还原为谷胱甘肽以循环利用，人体通过增加GPX和GR的水平来改善体内的氧化还原环境，消除有害环境的影响[18]。

本研究结果显示，观察组患者血清α1-AG、GR水平均明显高于对照组患者。表明原发性肝癌患者氧自由基的产生过多，抗氧化剂的消耗过多，患者体内存在一定程度地氧化损伤。这可能与活性酶的释放机制有关：当肝损伤发生时，细胞膜的通透性改变，导致α1-AG、GR和其他肝源性酶从这些组织一起释放到血液中。TNM分期为Ⅲ～Ⅳ期的原发性肝癌患者血清α1-AG水平明显高于TNM分期为I～Ⅱ期的患者，肿瘤直径≥5 cm、TNM分期为Ⅲ～Ⅳ期的原发性肝癌患者血清GR水平均明显高于肿瘤直径＜5 cm、TNM分期为I～Ⅱ期的患者。表明血清α1-AG和GR可以用于评价TNM临床分期，且GR水平与肿瘤直径有关，诊断肝癌进展的特异度更高，相关性分析显示，α1-AG水平与GR呈正相关，可共同用于原发性肝癌临床诊断。

目前，临床仅对患者血清中α1-AG、GR水平变化进行了观察[19-20]，关于其含量变化与疾病严重程度、病情进展和患者生存时间、肿瘤大小等之间关系的研究很少。本研究在此基础上通过观察血清标志物水平与原发性肝癌患者临床特征的关系，进一步证实，血清α1-AG、GR水平变化与原发性肝癌的进展密切相关，可以作为辅助诊断、评估肝损伤程度的方法。

综上所述，原发性肝癌患者血清α1-AG、GR水平升高，且二者呈正相关关系，可能与临床特征有关。