2016-2019年攀枝花市高致病性H5亚型禽流感免疫抗体检测与分析

张昕彤，熊 杰，蒲杨柳，蒋成伟，陈富忠，胡生富

（攀枝花市动物疫病预防控制中心，四川 攀枝花617000）

禽流感（AI）是由正黏病毒科流感病毒属的A 型流感病毒（AIV）所引起的一种禽类烈性传染病。在AIV 不同的亚型中，只有部分H5 和H7 亚型毒株可引起高致病性禽流感（HPAI），该病会给家禽养殖业造成巨大的经济损失，并对公共健康造成持续性威胁，被世界动物卫生组织规定为必须报告的动物疫病，我国将其列为一类动物疫病。高致病性禽流感是我国强制免疫的主要病种之一，免疫接种是目前预防和控制的重要手段。为掌握攀枝花市H5 亚型禽流感免疫效果情况，在2016-2019 年春秋两季集中免疫结束后，对各县（区）养殖场和散养户禽类进行随机抽样，共采集血清样品2 057 份，用血凝抑制试验进行免疫抗体检测。

1 材料与方法

1.1 血清样品及来源（见表1）

表1 血清样品来源

2016-2019 年春秋两季集中免疫结束后，随机抽取全市各县（区）内规模场和散养户禽类血清样品共2 057份，其中散养户1 770 份，规模场287 份，鸡血清1 719 份，水禽血清338 份。采集的血液样品待血清析出后进行离心，取上层血清倒入干净的离心管中，置于-20℃冰箱中保存备检。

1.2 试剂

禽流感病毒H5 亚型血凝抑制试验抗原、禽流感病毒H5亚型阳性血清，均购自哈尔滨维科生物技术开发公司。

1.3 检测方法与结果判定

根据GB/T 18936－2003《高致病性禽流感诊断技术》的规定，采用血凝（HA）和血凝抑制（HI）试验进行免疫抗体检测。

结果判定：HI 效价≥4log2 为阳性，判定为免疫合格；HI效价＜4log2为阴性，判定为免疫不合格。判定标准：免疫抗体合格数占抽检总数的70%以上为免疫合格。

2 检测结果与分析

2.1 2016-2019年全市H5亚型禽流感免疫抗体总体情况

2016-2019 年全市共检测2 057 份样品，合格1 957份，合格率95.14%，其中2016 年-2019 年H5 亚型禽流感免疫抗体合格率分别为95.79%、96.92%、98.14%、89.44%，均达到国家规定要求，说明强制免疫工作较理想，能够对家禽起到一定的保护作用。其中免疫抗体水平在2016-2018年呈上升趋势且合格率都在95%以上，但2019年下降到90%以下，下降原因主要是2019 年春秋防盐边县免疫抗体只有70%左右，进而拉低了总体合格率。可能与以下因素有关：一是村级防疫员操作不熟练、技术不规范导致免疫效果不佳；二是盐边县地域较广，散养户居住分散，“跑山鸡”比例较大，白天散养在山林，村级防疫员只能晚上上门免疫，个别农户受风俗习惯影响，不愿意或不配合免疫，造成免疫难度加大，存在漏免的情况；三是个别村级防疫员随身携带的疫苗冷藏箱由于保温效果不良导致疫苗失效。

2.2 2016-2019年全市散养户和养殖场H5亚型禽流感免疫抗体情况（详见表2）

2016-2019 年全市共检测散养户1 770 份，合格1 679份，合格率94.86%，检测养殖场287 份，合格278 份，合格率96.86%，其中养殖场抗体合格率略高于散养户，其原因可能是因为养殖场的管理技术、生物安全水平和防疫水平均高于散养户。散养户2016-2018 年合格率逐年上升，可能与攀枝花市开展培训宣传及农户防控意识提高有关。养殖场2019 年合格率有所下降，主要因为个别养殖场管理人员思想松懈、更换疫苗和调整免疫程序等因素有关。

表2 2016-2019年全市H5亚型禽流感免疫抗体结果

2.3 2016-2019年全市鸡和水禽H5亚型禽流感免疫抗体情况（详见表3）

表3 2016-2019年全市鸡和水禽H5亚型禽流感免疫抗体情况

2016-2019 年全市共检测鸡血清1 719 份，合格1 643份，合格率95.58%，检测水禽血清338 份，合格319 份，合格率94.38%，可以看出，鸡的总体抗体水平略高于水禽。其中2016、2017 年鸡的免疫抗体合格率均高于水禽，而2018、2019 年水禽的免疫抗体合格率则高于鸡并达到100%，且水禽的抗体水平呈逐步上升趋势，说明近两年来水禽的免疫抗体水平有较大提高，起到了较好的保护作用，鸡的抗体合格率除2019年外，总体较平稳且抗体水平较高。

3 讨论与小结

一直以来，国内外对禽流感的防控均高度重视，2004 年1 月23 日，我国发生第一起高致病性禽流感（H5N1），从2004 年起，全国开始实施强制免疫政策。随着养殖业的发展，病毒也在不断发生变异，其中使用疫苗免疫方法防止禽流感的暴发是现目前最有效的防控手段，我国对禽流感的免疫要求是高致病性禽流感群体免疫密度应常年保持在90%以上，其中应免畜禽免疫密度应达到100%，免疫抗体合格率应常年保持在70%以上，采取春秋两季集中免疫与定期补免相结合的方式进行。

从检测结果看，2016-2019 年这4 年间，H5 亚型禽流感免疫抗体均达标准，说明我市高致病性H5亚型禽流感的免疫情况总体上较好。由于H5 亚型禽流感病毒目前仍是威胁我国养禽业的重要亚型，所以养殖者对其重视程度较高，但仍有个别县（区）散养户和养殖场血清样品的抗体水平有高有低，这可能与免疫过程中操作不规范有关，存在漏免或注射疫苗时漏到体外，导致免疫失败，使群体免疫密度降低和免疫抗体不均衡。因此，要加强对防疫人员免疫技术和免疫操作技能培训，提高免疫质量。

综合看来，攀枝花市免疫效果较好，对预防高致病性禽流感能够起到一定的抗体保护作用，但免疫效果的持续监测仍是当前高致病性禽流感免疫防控工作中的重点，所以在家禽养殖中长期对禽流感进行血清学监测是十分必要的，这对疫苗的选择、免疫效果的考察、免疫计划的执行是十分有用的。禽流感防控是一项长期持久的工作，要加强强制免疫，认真做好免疫抗体的监测，通过培训宣传，提高防控意识，做到防患于未然，保证养禽业的健康发展。