绵马贯众药材的快速多信息薄层鉴别方法研究

赵丽丽，缪雪荣，兰新财，安丽娜

(浙江金大康动物保健品有限公司，浙江金华 301016)

绵马贯众为中国药典历版所收载品种，为鳞毛蕨科植物粗茎鳞毛蕨的干燥根茎和叶柄残基，具有清热解毒、驱虫之功效。现代研究表明：绵马贯众还具有抗肠虫[1]、抗菌、抗病毒[2]、抗肿瘤[3]、抗生育[4]、止血等作用，临床常用于虫积腹痛和疮疡[5]。其主要成分包括绵马酸类、黄绵马酸类、绵马三萜、鞣质等，其中绵马酸类化合物为间苯三酚或二元间苯三酚的衍生物，从结构分析既有脂溶性又有中极性、水溶性成分。目前，绵马贯众药材收载于中国药典2015年版一部，其薄层鉴别方法繁琐、费时，需要特制的薄层板，薄层操作步骤限制条件多，显色剂极少应用，在薄层鉴别的普及应用方面受到了很大限制，普及检测率降低，耗时3 h多，不利于简便、快捷、多信息的质量监督。

本文对绵马贯众药材进行了专题多信息快速薄层鉴别研究，以期为绵马贯众药材及其不同工艺制备的复方制剂提供简便、快捷、低成本、高效率的多信息鉴别方法。

1 仪器、药品与试剂

1.1 仪器 ZF-1型三用紫外分析仪，上海宝山顾村电光仪器厂；YQ-520型超声波清洗器，上海易净超声波仪器有限公司；AB135-S系列天平，梅特勒托利多仪器有限公司；DHG-9070型电热恒温鼓风干燥箱，上海精宏实验设备有限公司。

1.2 药品及试剂 绵马贯众药材由浙江金大康动物保健品有限公司提供；绵马贯众对照药材(批号：121034-200302)购自中国食品药品检定研究院。甲醇、三氯甲烷、乙酸乙酯等均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 溶液配制 对照药材溶液的制备：取绵马贯众对照药材0.2 g，研细，加甲醇2 mL，超声处理20 min，上清液作为对照药材溶液。供试品溶液的制备：取绵马贯众药材0.2 g，研细，加甲醇2 mL，超声处理20 min，上清液作为供试品溶液。

2.2 绵马贯众药材脂溶性成分薄层鉴别(1) 吸取供试品溶液和对照药材溶液各6 μL，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-浓氨试液(10 ∶1 ∶0.1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365 nm下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色荧光主斑点(图1A)；再喷以10 %硫酸乙醇溶液，105 ℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯365 nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色荧光主斑点(图1B)；再置暗室内透过灯光检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点(图1C)。

A:365 nm下薄层色谱图；B:显色后365 nm下薄层色谱图；C:显色后灯光下薄层色谱图；1:绵马贯众对照药材；2-6:绵马贯众药材 A:the TLC under 365 nm；B:the colour reaction of TLC under 365 nm；C:the colour reaction of TLC under daylight lamp 1:the reference of Dryopteridis Crassirhizomatis Rhizome；2-6:Dryopteridis Crassirhizomatis Rhizome图1 绵马贯众药材脂溶性成分(1)薄层色谱图Fig 1 The TLC on liposoluble component of Dryopteridis Crassirhizomatis Rhizome

2.3 绵马贯众药材脂溶性成分薄层鉴别(2) 吸取2.1项下的供试品溶液和对照药材溶液各6 μL，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯-甲酸(12 ∶2 ∶0.2)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯254 nm下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色主斑点(图2A)；再喷以10 %硫酸乙醇溶液，105 ℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯365 nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色荧光主斑点(图2B)；再置暗室内透过灯光检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点(图2C)。

A:254 nm下薄层色谱图；B:显色后365 nm下薄层色谱图；C:显色后灯光下薄层色谱图；1:绵马贯众对照药材；2-5:绵马贯众药材 A:the TLC under 365 nm；B:the colour reaction of TLC under 365 nm；C:the colour reaction of TLC under daylight lamp 1:the reference of Dryopteridis Crassirhizomatis Rhizome；2-5:Dryopteridis Crassirhizomatis Rhizome图2 绵马贯众药材脂溶性成分(2)薄层色谱图Fig 2 The TLC on liposoluble component of Dryopteridis Crassirhizomatis Rhizome

2.4 绵马贯众药材中极性成分的薄层鉴别 吸取2.1项下的供试品溶液和对照药材溶液各6 μL，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-浓氨试液(4 ∶2 ∶4 ∶0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯254 nm下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色主斑点(图3A)；再喷以10 %硫酸乙醇溶液，105 ℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯365 nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色荧光主斑点(图3B)；再置暗室内透过灯光检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点(图3C)。

A: 254 nm下薄层色谱图；B: 显色后365 nm下薄层色谱图；C: 显色后灯光下薄层色谱图；1.绵马贯众对照药材；2～5.绵马贯众药材 A: the TLC under 365 nm；B: the colour reaction of TLC under 365 nm；C: the colour reaction of TLC under daylight lamp 1. the reference of Dryopteridis Crassirhizomatis Rhizome；2-5 Dryopteridis Crassirhizomatis Rhizome图3 绵马贯众药材中极性成分薄层色谱图Fig 3 The TLC on intermediate polar component of Dryopteridis Crassirhizomatis Rhizome

2.5 绵马贯众药材水溶性成分的薄层鉴别 吸取2.1项下的供试品溶液和对照药材溶液各6 μL，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-浓氨试液(1 ∶2 ∶4 ∶0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365 nm下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同荧光主斑点(图4A)；再喷以10 %硫酸乙醇溶液，105 ℃加热至斑点显色清晰，日光下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点(图4B)。

A:365 nm下薄层色谱图；B:显色后灯光下薄层色谱图 1:绵马贯众对照药材；2-5:绵马贯众药材 A:the TLC under 365 nm；B:the colour reaction of TLC under daylight lamp；1:the reference of Dryopteridis Crassirhizomatis Rhizome; 2-5: Dryopteridis Crassirhizomatis Rhizome图4 绵马贯众药材水溶性成分薄层色谱图Fig 4 The TLC on water-soluble component of Dryopteridis Crassirhizomatis Rhizome

3 讨论与结论

本文通过对70%甲醇、甲醇和乙酸乙酯作为提取溶剂时各薄层图谱进行比较，发现当用甲醇作提取溶剂时，对绵马贯众药材中脂溶性成分和水溶性成分均有较好的溶解效果，排除水溶性薄层背景干扰的同时获得了清晰的薄层色谱图。

本方法克服了《中国药典》中绵马贯众药材薄层鉴别方法需要特制薄层板，且制备薄层板、展开和检视时间过长、斑点扩散、集聚性差等问题，建立了只需药材和对照药材各0.2 g、提取溶剂4 mL、展开剂40 mL，整个过程时间不足1 h，操作简单的多信息薄层鉴别方法。

本文建立的绵马贯众药材薄层鉴别方法，大大提高了检测效率，节省了检测时间，降低了检测成本，同时减少了环境污染。多个信息斑点的获得，为快速鉴别绵马贯众药材的真伪提供了数据支撑，为有效控制绵马贯众药材质量提供了依据。