TNF-α、IL-6及HE4和CA125在EAOC患者中的诊断价值①

高翠红 孙文杰 于艳丽 崔娇姣 周鹏翔 杜潘艳 蒙长虹

(唐山市妇幼保健院检验科,唐山 063000)

子宫内膜异位症( endometriosis，EM)是一种妇科常见的慢性炎症性疾病，是子宫内膜组织在子宫腔被覆黏膜以外的身体其他部位种植、存活而引起的一种病变。有研究发现，EM患者子宫内膜组织分泌的炎症因子白细胞介素(IL-6) 和肿瘤坏死因子α(TNF-α)等水平均升高[1]。子宫内膜异位症相关性卵巢癌(endometriosis-associated ovarian cancer，EAOC)是指与EM密切相关，可能从EM恶变而来的一组特殊的上皮性卵巢肿瘤[2，3]。研究表明，EM作为卵巢癌的诱因与卵巢癌的发生、发展有一定关系，其并发卵巢癌的患病率是正常人群的4倍以上[4].国外有报道称肿瘤标志物人附睾蛋白4(HE4)及糖类抗原125(CA125)在EAOC人群中升高[5]，EAOC兼有EM和卵巢癌的双重特征，国内对EAOC的实验室诊断研究较少，本实验拟通过研究炎症因子TNF-α、IL-6和肿瘤标志物HE4、CA125在EAOC中表达水平，探讨其在EAOC诊断中的临床意义。

1 材料与方法

1.1材料

1.1.1一般资料 所有病例均为2014年7月～2018年9月在唐山市妇幼保健院初诊住院的患者，其中EAOC组52例，平均年龄(42.7±7.8)岁；卵巢浆液性癌 32例平均年龄(49.2±13.6)岁；EM组35例，平均年龄(37.1±14.2)岁；卵巢良性肿瘤组30例,平均年龄(29.7±10.5)岁。所有入组病例均经术后病理诊断证实，其中 EAOC的病理诊断严格遵循国际诊断金标准(Sampson-Scott诊断标准)[6]。所有患者均为首发病例，术前均未行放化疗，同时排除转移性卵巢恶性肿瘤及其他系统肿瘤，妇科炎症和免疫系统疾病。选取同期在我院健康体检的女性30例为对照组，平均年龄(31.7±8.8)岁，心、肝、肾和胰腺功能正常，无其他良恶性肿瘤，近期无感染，没有应用免疫制剂及激素类药物。本研究得到唐山市妇幼保健院伦理委员会批准，所有对象均知情同意。

1.1.2EAOC组织学分级和病理分期 EAOC患者按组织学分级分为高分化癌28例，低分化癌24例。按FIGO病理分期标分为,Ⅰ、Ⅱ期共32例，Ⅲ期、Ⅳ期共20 例。

1.1.3仪器和试剂 DXI800化学微粒子发光免疫分析仪和原厂配套试剂盒购自美国贝克曼；ELISA试剂购自上海圆创生物技术有限公司；酶标仪购自美国Thermo公司。

1.2方法 所有受试者的血液样本均为入院第二天清晨空腹采集。采用ELISA法测定TNF-α、IL-6含量，用微粒子化学发光法测定HE4和CA125含量。以上检测需严格按照标准操作规程和试剂使用说明书进行，检测当日仪器状态稳定，试剂定标通过，质控在控。实验室环境、温度、湿度等均符合操作规程的要求。

2 结果

2.1各组病例的实验室检测指标比较 由表1可知，EAOC组和浆液性卵巢癌组CA125、HE4及 IL-6和TNF-α均高于EM组、良性肿瘤组和对照组，差异有统计学意义(P<0.05)；EAOC组CA125和HE4均高于浆液性卵巢癌组，IL-6和TNF-α均低于浆液性卵巢癌组;EM组与良性肿瘤组，除IL-6略有升高外，其他指标差异无统计学意义(P>0.05)。

2.2EAOC组病例不同组织学分级的实验室指标比较 不同分级的EAOC组病例中，低分化组CA125、HE4及IL-6和TNF-α表达水平较高分化组升高，差异均有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表1 实验室指标在各组间的比较

表2 各指标在不同分级的EAOC组病例的比较

表3 各指标在不同临床分期的EAOC组病例的比较

表4 HE4及IL-6诊断EAOC的ROC曲线分析

图1 HE4及IL-6诊断EAOC的ROC曲线Fig.1 ROC curve of HE4 and IL-6 for EAOC diagnosis

2.3EAOC组病例不同病理分期的实验室指标比较 EAOC组病例中，CA125、HE4及IL-6和TNF-α的表达水平均随临床分期的增加而增高，差异均有统计学意义(P<0.05)，见表3。

2.4炎症因子与肿瘤标志物的相关性分析 经Spearman 等级相关分析统计，证实EAOC患者HE4与CA125和IL-6均呈正相关，相关系数分别为(r=0.415,P<0.05;r= 0.362,P<0.05)，HE4和TNF-α无相关性。

2.5炎症因子与肿瘤标志物在EAOC中的诊断价值 通过ROC曲线评价实验室指标HE4、CA125、IL-6和TNF-α在EAOC中的诊断价值，AUC在0.5以下，说明该指标诊断价值很小，在0.5～0.7之间表示有较低的准确性，在0.7～0.9之间表示有较高的准确性。本研究中CA125、TNF-α的AUC分别为0.615和0.571，诊断价值较低，而HE4及IL-6的AUC分别0.778和0.762，有较高的准确性，将二者联合检测发现，其AUC为0.905，联合检测的灵敏度和特异性分别为89.7%和95.2%，高于单项检测。见图1和表4。

3 讨论

EM在组织上属于妇科良性病变，但其具有侵袭、转移、恶变成相关恶性肿瘤的特征[7]，卵巢是常见的侵袭部位。卵巢子宫内膜异位症，尤其是EM相关卵巢癌严重危害女性的健康，近年来，EM恶变成EAOC的问题日益成为人们关注的热点。有报道称EM和EAOC的发生、发展与炎性血管生成紧密相关，炎症的存在是肿瘤发病原因之一，炎症因子的代谢紊乱影响了炎症和肿瘤的发生发展过程。IL-6和TNF-α是机体内有代表性的炎症因子，IL-6 是淋巴细胞、单核-巨噬细胞及某些肿瘤细胞产生的，调节机体损伤和炎症反应的炎症因子。机体发生炎症时，血清中IL-6含量会迅速升高[8]。在肿瘤发生损伤、坏死或者炎症时，IL-6水平也会升高。因此，IL-6可以作为早期诊断肿瘤炎症反应的一个重要指标。TNF-α作用于血管内皮细胞，损伤内皮细胞或导致血管功能紊乱，使血管损伤和血栓形成，并可使肿瘤组织的局部血流阻断而发生出血、缺氧坏死。TNF-α还可以促进肿瘤间质的生长及肿瘤血管的形成，为肿瘤细胞的增殖提供良好的环境。TNF-α对卵巢恶性肿瘤免疫功能的调节作用，可促进T细胞及其它杀伤细胞对肿瘤细胞的杀伤。本研究结果表明，IL-6、TNF-α与EAOC的病程、病情相关，EAOC组高于浆液性卵巢癌组，癌症组高于EM组，病情越严重，IL-6、TNF-α水平越高，炎症反应程度越高。EM是由于细胞因子和生长因子聚集形成的局部炎症反应，炎症导致血管生成，细胞增殖，进而导致侵袭和转移[9]。同时炎症促进了子宫内膜生长和侵袭，子宫内膜从异位转变成肿瘤状态[10]。有研究发现，EM中的炎症反应是由补体系统介导产生的，并在EAOC中保持活性状态，而在浆液性卵巢癌中则无此现象，推测EAOC的主要病变特点为炎症改变[11]。本研究结果与文献报道一致[12]，这些结果提示EAOC患者疾病过程中存在炎症反应，临床分期越高，炎症反应程度越高，肿瘤越容易发生转移。CA125和HE4是预测卵巢癌的有效指标，可用于卵巢肿瘤患者的疗效监测及预后评估，EM中也可见二者的升高。临床上通常通过联合检测CA125和HE4来提高卵巢癌诊断的灵敏度和特异性[13]。CA125和HE4在EM和卵巢良性肿瘤中也有表达[14，15],有研究证实，EAOC与浆液性卵巢癌相比，发病期和病变期早，病理分级处于高分化的较多，且CA125和HE4在EAOC中较浆液性卵巢癌水平低，一般分别小于200 U/ml或200 pmol/L[16]。本研究中Ⅰ、Ⅱ期EAOC有25例，占71.43%，高分化21例，占60%。本实验结果表明，癌症组CA125和HE4水平高于EM组和对照组，且与肿瘤的分期和分级相关，发病越早，分化越高，CA125和HE4水平越低。研究证实，浆液性卵巢癌发生腹水的比例较大，腹水中CA125和HE4含量是血清中的8倍，处于早期的EAOC患者未产生腹水，可能是血清中CA125和HE4水平低于浆液性卵巢癌的原因之一[17]。ROC曲线显示，HE4及IL-6对早期诊断EAOC具有较高的诊断价值，二者联合检测价值最高，研究结果显示联合检测HE4及IL-6的敏感度和特异性均明显高于单一检测，表明血清联合检测HE4及IL-6可以减少EAOC的漏诊，提高诊断的敏感度和特异性，具有重要应用价值。综上所述，炎症因子TNF-α、IL-6和肿瘤标志物HE4、CA125在EAOC中均有表达，联合检测HE4和IL-6对EAOC的早期发现有较高的灵敏度和特异性，并可以和浆液性卵巢癌相鉴别，具有较高的应用价值。