不同杀菌剂对火龙果炭疽病菌的室内毒力测定

郑 伟，王 彬*，张 荣，王 荔，张永忠

(1.贵州省农业科学院 果树科学研究所，贵州 贵阳 550006； 2.华南农业大学 园艺学院，广东 广州 510462； 3.罗甸县农业农村局，贵州 罗甸 550100)

火龙果因其明亮的红色与绿色表皮覆盖着鳞片似蛟龙的外鳞而得名，又称仙蜜果、红龙果、吉祥果和情人果等[1-3]，属仙人掌科(Cactaceae)三角柱属(Hylocereus)和西施仙人柱属(Selenicereus)植物[4-5]。随着火龙果生产的发展，近年来在集中连片种植区火龙果病虫害发生、流行呈加剧趋势，导致火龙果产量和品质下降，进而影响火龙果种植效益。目前国内有关火龙果病害及某些病害的药剂试验已有文献报道。火龙果上常见的病害有由平脐蠕孢属(Bipolariscactivora)[6]、尖孢镰刀菌(Fusariumoxysporum)和单隔镰刀菌(Fusarium.dimerum)[7]、双间柱顶孢〔Scytalidiumdimidiatum(Penz.)Sutton and Dyko〕[8]、欧文氏菌属(Erwiniasp.)[9]及肠杆菌属(Enterobactersp.)[10]等病原菌侵染引起的腐烂病，由大豆炭疽病菌(Colletotrichumtruncatum)、胶孢炭疽菌(C.gloeosporioides)[11-12]及平头刺盘孢(C.truncatum)[13]引起的炭疽病，由尖孢镰刀菌(F.oxysporumSchlecht)、色二孢属(Diplodiasp.)、壳二孢属(Ascochytasp.)和茎点霉属(Phomasp.)[9]引起的枯萎病，由交链孢菌(Alternariasp.)[14]、球二孢属(Botryodiplodiasp.)[15]及粘隔孢属(Septogloeumsp.)[16]引起的茎斑病，由新暗色柱节孢属(Neoscytalidiumdimidiatum)[17]引起的溃疡病等。据初步调查，火龙果炭疽病是贵州火龙果种植区主要病害之一，枝条和果实均可发病，严重影响植株的生长并威胁火龙果的生产效益。2014年前期研究中对贵州火龙果炭疽病作过鉴定，主要为胶孢炭疽菌(Colletotrichumgloeosporioides)和平头刺盘孢(Colletotrichumtruncatum)。但目前相关研究还不是很多且不够全面，其发生发展及防控等方面还有待深入研究。为此，采用生长速率法，室内测定不同杀菌剂对火龙果炭疽病菌的毒力作用，以期为火龙果炭疽病的防治提供安全有效的杀菌剂及用药技术。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 供试菌株 火龙果胶孢炭疽菌和辣椒炭疽菌，课题组从采自罗甸、关岭及望谟火龙果基地的典型发病火龙果标本上分离、纯化后获得。

1.1.2 供试药剂 选择市面上常见的10种杀菌剂(表1)。

表1 供试药剂的基本信息

1.2 方法

1.2.1 含药培养基的配制 将10种药剂分别按试验要求配制成所需的系列浓度药液，以1∶9的比例与测定用培养基混合均匀即得到系列浓度梯度的含药培养基备用。

1.2.2 试验设计 利用生长速率法对菌丝生长进行室内毒力测定，筛选高效低毒的化学药剂。针对胶孢炭疽菌和辣椒炭疽菌菌株分别采用双因素试验进行测定，其中，因素1为药剂，因素2为浓度，每个药剂5个浓度，共设35个处理(表2)，以不加药剂为对照(CK)，5次重复。将胶孢炭疽菌和辣椒炭疽菌菌株接种在PDA平板上于25℃培养3 d后，用内径为5 mm的打孔器把菌落打成菌饼，在无菌操作下移植到含有不同药剂的PDA平板上，将带菌丝的一面接触培养基，在25℃恒温培养5 d。

表2 不同药剂对2种病原菌室内毒力测定的处理浓度

1.2.3 指标测定 用十字交叉法测量菌落直径，取平均值，计算抑制率。将抑制率根据反应率-机率值转换表换算成抑制机率值，以设定药剂浓度的对数(x)为横坐标，以抑制率(y)为纵坐标，作回归直线，拟合各药剂分别对火龙果茎枯病病原菌的毒力回归方程，计算抑制中浓度(EC50)及相关系数(r)。

抑制率=

1.3 数据统计与分析

采用农药室内生物测定数据处理系统(Pesticidea Laboratory Boiactvity Testa Data Syatem)处理数据。

2 结果与分析

2.1 7种杀菌剂对火龙果胶孢炭疽菌的毒力

由表3看出，7种药剂各浓度对胶孢炭疽菌均有不同程度的抑制作用，且随着浓度升高抑制率呈增加趋势。其中，克菌丹的抑制率为15.38%～71.74%，代森锰锌为10.15%～100.00%，多菌灵为10.15%～96.71%，戊唑·福美双为13.22%～88.65%，丙森锌为30.36%～87.14%，咪鲜胺为27.96%～79.97%，氟菌·肟菌酯为33.67%～96.23%。由表4看出，7种杀菌剂使用浓度与其对火龙果胶孢炭疽菌的抑制率间均存在良好的线性关系，相关系数为0.933 5～0.987 3，也说明随着药剂浓度升高抑制率呈增加趋势；7种杀菌剂对火龙果胶孢炭疽菌的毒力大小依次为戊唑·福美双>多菌灵>咪鲜胺>氟菌·肟菌酯>丙森锌>代森锰锌>克菌丹，其中，以戊唑·福美双的药效最好，EC50为22.387 6 μg/mL，其次是多菌灵、咪鲜胺和氟菌·肟菌酯，EC50分别为33.183 6 μg/mL、36.112 7 μg/mL和37.870 9 μg/mL，再次是丙森锌、代森锰锌，EC50分别为53.058 1 μg/mL和69.196 6 μg/mL，克菌丹的药效最差，EC50为151.246 4 μg/mL。

表3 不同药剂对胶孢炭疽菌菌丝生长的抑制效果

Table 3 The Inhibition effect of different fungicides on pathogen mycelium ofC.gloeosporioides

药剂名称Agent name浓度/(μg/mL)Concentration菌落直径/mmColony diameter抑制率/%Inhibition ratio克菌丹834.7222.3371.74 Captan278.2428.2064.1192.7441.6746.6330.9260.6721.8910.3165.6715.38代森锰锌800.804.00100.00 Mancozeb266.9317.3381.1888.9832.2560.1329.6659.0022.389.8967.6710.15多菌灵500.506.3396.71 Carbendazim166.8313.6786.3555.6119.6777.8918.5355.3327.566.1867.6710.15戊唑·福美双150.089.3388.65 Oftebuconzole · thiram50.0335.3354.8415.5843.3344.435.5656.5027.311.8567.3313.22丙森锌875.0011.3387.14 Propineb291.6718.6773.8097.2226.3360.1332.4134.3345.8410.8043.0030.36咪鲜胺700.7016.0079.97 Prochloraz233.5724.0069.5777.8628.0064.3725.9537.3352.248.6456.0027.96氟菌·肟菌酯857.726.6796.23 Fluopyram·otrifloxystrobin285.9112.5088.0095.3031.6760.9531.7643.2544.6110.5951.0033.67

表4 不同药剂对胶孢炭疽菌的室内防治效果

2.2 7种杀菌剂对火龙果辣椒炭疽菌的毒力

由表5看出，7种药剂各浓度对辣椒炭疽菌均有不同程度的抑制作用，且随着浓度升高抑制率呈增加趋势。其中，百菌清的抑制率为17.54%～44.74%，克菌丹的抑制率为7.60%～88.30%，代森锰锌为11.56%～100.00%，戊唑·福美双为15.76%～86.05%，波尔·锰锌8.68%～78.23%，甲基硫菌灵62.04%～74.67%、氟菌·肟菌酯38.26%～53.02%。由表6看出，7种药剂使用浓度与对辣椒炭疽菌的抑制率间均存在线性关系良好，相关系数为0.957 1～0.989 1，也说明随着药剂浓度升高抑制率呈增加趋势；7种杀菌剂对火龙果辣椒炭疽菌的毒力大小依次为甲基硫菌灵>戊唑·福美双>克菌丹>代森锰锌>波尔·锰锌>氟菌·肟菌酯>百菌清，其中，甲基硫菌灵的药效最好，EC50为0.465 5 μg/mL，其次是戊唑·福美双，EC50为15.396 5 μg/mL，再次是克菌丹、代森锰锌和波尔·锰锌，EC50分别为142.290 5 μg/mL、206.460 4 μg/mL和586.683 3 μg/mL，氟菌·肟菌酯和百菌清的药效最差，EC50分别为1 046.098 9 μg/mL和2 938.796 1 μg/mL。

表5 不同药剂对辣椒炭疽菌菌丝生长的抑制效果

Table 5 Inhibitory effects of seven fungicides on the mycelial growth ofC.capsici

药剂名称Agent name浓度/(μg/mL)Concentration菌落直径/mmColony diameter抑制率/%Inhibition ratio百菌清1 252.0937.5044.74 Chlorothalonil417.3642.5035.96139.1245.3331.0046.3747.2527.6315.4653.0017.54克菌丹834.7212.6788.30 Captan278.2420.0075.4492.7438.6742.6830.9248.5025.4410.3158.677.60代森锰锌1 000.000.50100.00 Mancozeb333.3333.1054.68111.1152.6723.1137.0454.3320.4412.3459.8311.56戊唑·福美双150.0811.6786.05 Oftebuconzole · thiram50.0320.0070.9115.5833.0047.275.5637.0040.001.8550.3315.76波尔·锰锌2 500.0018.5078.23 Boer·mancozeb833.3335.2551.21277.7844.6736.5692.5961.339.1530.8473.008.68甲基硫菌灵563.2024.6774.67 Thiophanate methyl187.7326.3371.7662.5830.0066.6720.8630.6765.746.9533.3362.04氟菌·肟菌酯857.7241.0053.02 Fluopyram·otrifloxystrobin285.9142.6750.7895.3042.3351.2331.7650.0040.9410.5952.0038.26

表6 不同药剂对辣椒炭疽菌的室内防治效果

3 结论与讨论

研究结果表明，不同药剂各浓度对火龙果炭疽病菌菌丝均有不同程度的抑制作用，其抑制率随浓度的增加而增加，同时不同药剂抑制率也存在明显差异。戊唑·福美双对胶孢炭疽菌的药效最好，EC50为22.387 6 μg/mL；其次是多菌灵、咪鲜胺和氟菌·肟菌酯，EC50分别为33.183 6 μg/mL、36.112 7 μg/mL和37.870 9 μg/mL；其余药剂的药效相对较差。甲基硫菌灵对辣椒炭疽菌的药效最好，EC50为0.465 5 μg/mL；其次是戊唑·福美双，EC50为15.396 5 μg/mL；其余药剂药效相对较差。但是在大田生产中，由于病原物、寄主和环境之间存在复杂的关系，施药量较大。因此，对筛选出的药剂直接应用于大田防治，对相应病害是否有明显的防治效果，尚需进一步深入研究。