新型SysmexUF5000尿沉渣分析仪在快速筛查泌尿道感染中的应用

杨立

【摘  要】目的：以尿沉渣涂片革兰染色为标准，比较新型Sysmex UF5000尿沉渣分析仪细菌革兰染色分型结果和尿沉渣涂片革兰染色镜检结果一致性，为泌尿道感染的快速诊断和指导临床医生经验性用药提供更快速、精准的依据。方法：收集该院2019年11月1日-2019年11月30日的199 例合格中段尿标本，各分成2份，分别进行UF5000上机检测和尿沉渣涂片革兰染色镜检，结果以尿沉渣革兰染色镜检作为参考标准。结果：通过对199例标本结果分析，共有164例相符，总符合率为82.4%，其中革兰阳性菌相符的40例，符合率81.6%，革兰阴性菌相符的112例，符合率83.6%，革兰阳性菌混革兰阴性菌相符的12例，符合率75%。采用SPSS20.0分析，Kappa值为0.667，一致性良好。剔除混合菌感染的例数，Kappa值为0.832，一致性良好。结论：UF5000在细菌分类上与尿沉渣涂片革兰染色镜检具有良好的一致性，并且快速，经济，有利于临床进行大规模开展，可作为一种泌尿道感染的快速筛查方法。

【关键词】一致性;革兰染色;尿路感染快速筛查;全自动尿沉渣分析仪;显微镜人工镜检

尿路感染（urinary tract infection，UTI）是指病原体在尿路中生长繁殖，并侵犯泌尿道黏膜或组织而引起的炎症，是细菌感染中最常见的一种感染，其常见于外科手术术后并发症，尤其是老年人免疫力低下人群。[1]可由细菌感染引起，易反复感染，若不及时医治还会引起慢性感染。

目前在众多辅助诊断中中段尿细菌培养是诊断尿路感染的金标准，但是检验周期比较长，通常需要2-4天才能出结果，不能满足临床快速诊断的需求。与之相比，尿沉渣革兰染色镜检能够直观地反映细菌的有无及革兰染色特性，简单迅速，在尿路感染的快速诊断和经验性的抗生素治疗上起到了重要的辅助作用[2]。目前日本希森美康公司生产的最新尿沉渣检测仪UF5000在原有检测项目基础上增加了细菌革兰染色分型及尿路感染提示信息。其原理主要是利用革蘭阴性菌和革兰阳性菌细胞壁肽聚糖层的厚度不同及可以透过的荧光色素量的多少来区分。本研究将尿沉渣革兰染色和UF5000对细菌革兰染色分型进行比较，研究两者在检测细菌有无和革兰染色分型的一致性，为尿路感染的快速鉴别诊断和初步指导临床经验性用药提供依据。

1 资料与方法

1.1一般资料 收集西安交通大学第一附属医院2019年11月共199例疑似尿路感染患者的中段尿标本。按《全国临床检验操作规程（第四版）》标准[3]，嘱咐患者留取无菌中段尿标本，1小时内送检，将每份标本平均分成2份，先在UF5000上完成尿沉渣的检测，然后离心弃上清取沉渣涂片革兰染色并镜检。

1.2 仪器与试剂 希森美康尿沉渣检测仪UF5000以及原装配套试剂、质控物。莱卡DM750显微镜及其配套拍摄系统。 珠海贝索快速革兰氏染液。中佳低速离心机。

1.3 方法

1.3.1 尿沉渣细菌定量计数及革兰染色分型：收集尿标本后，用UF5000尿沉渣分析仪检测细菌数，并记录其革兰染色分型。

1.3.2 尿沉渣涂片革兰染色镜检：将检测完的尿沉渣标本以1500r/min离心5min，弃上清液取沉渣涂片进行革兰染色并镜检。然后比较与机测革兰染色分型的一致性。

1.4 统计方法：采用SPSS20.0分析，利用Kappa值评价两种检验方法的一致性。

2 结果

UF5000革兰染色分型与尿沉渣革兰染色镜检比较 199例标本中，共有164例相符，总符合率为82.4%，其中革兰阳性菌相符的40例，符合率81.6%，革兰阴性菌相符的112例，符合率83.6%，革兰阳性菌混革兰阴性菌相符的12例，符合率75%。与相关学者的研究报道结果相近[4]。采用SPSS20.0分析，Kappa值0.667，一致性良好。鉴于查阅相关文献，报道泌尿系细菌混合感染的文献比较少的情况，剔除该数据中混合菌感染的例数，只针对于革兰阳性菌和革兰阴性菌的分型的一致性求Kappa值，采用SPSS20.0分析，Kappa值0.832，一致性良好。相关数据见表1。由此可见UF5000对泌尿系的混合菌感染分型的一致性略差。

3 讨论

目前针对于临床泌尿系的感染，诊断的时效性也是越来越备受重视。虽然无菌中段尿培养是金标准，但是培养时间过长使其不能在早期的快速筛查诊断中发挥重要作用。而尿沉渣革兰染色作为最直观的一种鉴定有无细菌感染的快速方法，不论在大型三甲医院临床面对不断增多的泌尿道感染患者，还是基层医院缺乏相应培养的配套设施和技术的现状，都不失为泌尿系感染的一种快速而相对准确的筛查方法[5]，同时也有助于指导临床医生经验性用药，在一定程度上避免了细菌耐药性的发展。本文中将其与新型的尿沉渣分析仪UF5000对细菌革兰染色分型的一致性比较得出一致性良好的结论，所以UF5000也可成为快速筛查尿路感染的一种新方法。

针对于UF5000的经济时效性而言，此前也有学者在论述菌尿的即时筛选技术中也提到过很多技术，如荧光原位杂交、MS质谱技术、微流控芯片及分子生物学技术等[6]，虽然时效性及准确性能得到保证，但是操作过程相对UF5000均比较繁琐，而且试验成本高，不利于临床大规模开展。

就UF5000与尿沉渣革兰染色镜检的良好一致性而言，UF5000在检测原理上有了很大提升，其中细菌革兰氏染色性信息是利用前向散射光和侧向荧光，根据革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的细胞壁的构成差异来分析的。前向散射光强度反映了菌体的肽聚糖层等细胞壁的构成成分的差异，肽聚糖层厚的革兰氏阳性菌与革兰氏阴性菌的相比，前向散射光强度呈现居高的倾向。侧向荧光强度反映了渗透至菌体内的色素量，细胞壁的结构不同对其会产生影响。革兰氏阳性菌的情况下，由于细胞壁的肽聚糖层厚，渗透至菌体内的色素量下降，所以侧向荧光强度变低。另一方面，革兰氏阴性菌的情况下，由于渗透至菌体内的色素量变多，所以侧向荧光强度变高。

通过上述分析，UF5000尿沉渣分析仪可以作为一种新型的快速筛查尿路感染的方法，不过需要注意在尿液标本的留取方面，严格按照标准留取合格中段尿很有必要，以防止不合格的污染标本影响检验结果的准确性[7]。同时泌尿系感染除了细菌感染常见以外，近年来真菌感染也越来越不容忽视，所以UF5000对真菌的鉴别能力如何也有待于进一步考证。

参考文献

[1] 马孝武，韩学昌，苗亚飞，等.全身麻醉下老年外科手术患者术后感染的相关因素分析[J].中华医院感染学杂志.2017.27（11）：2509-2512.

[2] 尿沉渣涂片革兰染色对细菌性泌尿道感染的检测效能[J].实用医学杂志.2019.35（2）：281-284.

[3] 尚红，王毓三，申子瑜，等，全国临床检验操作规程[M].北京人民卫生出版社，2015，635.

[4] KIM  S  Y，PARK  Y，KIM  H，et al.Rapid Screening of Urinary Tract Infection and Discrimination of Gram-Positive and Gram-Negative Bacteria by Automated Flow Cytometric Analysis Using Sysmex UF-5000[J]. J Clin Microbiol ，2018，56（8），e02004-e02017.

[5] 朱小丽，杜斌，李蕾华，等，尿液革兰染色检查在尿路感染诊断中的价值[J].实用医技杂志，2005，12（19），2777-2778.

[6] 雷佳，刘世巍，邓秀敏，等，尿路感染检测方法研究进展[J].陕西医学杂志，2018，47（8），1087-1089.

[7] 孙洪军. 影响尿液检验分析前质量相关因素与应对措施探析[J].中国现代药物应用，2016，10（4）：275-276.