Sysmex-XN WDF 通道散点图对急性早幼粒细胞白血病的价值

周杰，杨小理，李娇丽，文娅，张迅

（1.遵义医科大学附属医院 检验科，贵州 遵义 563000；2.遵义医科大学 医学与科技学院，贵州 遵义 563000）

0 引言

白血病是造血组织恶性增生或淋巴结组织单克隆性增生并累及血液和（或）骨髓为主的高度异质性肿瘤，主要表现为贫血、出血、发热及髓外浸润。白血病由于发现晚，进展快，近年在肿瘤排行中呈现逐渐上升。其中急性早幼粒细胞白血病，进展快，出血倾向较明显，目前临床治疗主要是全反式维甲酸诱导成熟分化，三氧化二砷杀灭，临床治愈率较高[1-2]。针对急性早幼粒细胞白血病最有效方式就是尽早发现，尽早治疗，才能够提升患者生存率。随着全自动五分类血液分析仪的普及检测血常规项目的白细胞分类散点图广泛运用，使白血病筛查广泛开展，通过，对于急性早幼粒细胞白血病诊疗具有重要的临床意义。本研究通过分析骨髓形态学及免疫分型确诊的急性早幼粒细胞白血病患者血常规提供的白细胞散点信息图，寻找这些散点图的特点。

1 资料与方法

1.1 一般资料。收集我院2017 年10 月至2019 年8 月以来47 例通过骨髓形态学及免疫分型确诊的急性早幼粒细胞白血病患者，其中男27 人，女20 人；年龄6-75 岁，平均（38.48±18.9）岁，符合急性早幼粒细胞白血病的发病特点。依据白细胞计数进行分类分析，将白细胞计数小于4.0×109/L 分为共计25 人，将白细胞计数介于4-10×109/L 分共计7 人，将白细胞计数大于10.0×109/L 分15 人。

1.2 仪器与试剂。SysmexXN9000 系列全自动血液分析仪和原厂配装配套（简称XN9000）由希森美康公司提供；奥林巴斯CX41 显微镜；瑞氏-姬姆萨染色液依据《全国临床检验操作规程》（第4 版）的要求进行配制；EDTA-K2 真空抗凝管。

1.3 血常规检测。采集上述确证患者未经过化疗后的肘静脉血2 mL，应用sysmex 的XN9000 血细胞分析仪进行血液分析，半小时内完成检测。利用射频、电阻抗和细胞化学染色法原理进行白细胞计数及分类，通过Lysercell WDF 中的表面活性剂溶解血小板和红细胞，再次通过Lysercell WDF 的荧光染料进入细胞内，对核酸级细胞器染色。通过白细胞的荧光强度差异及软件算法形成白细胞散点图。对外周血涂片染色镜检，以找到异常早幼粒细胞后进行白细胞WDF 通道散点图进行分析。

2 散点图分析

2.1 XN9000 正常白细胞WDF 通道血细胞散点图特征如图1。横坐标是侧向散射光SCC 反映细胞内颗粒物质的大小和多少，纵坐标是侧向荧光SFL，反映细胞内核酸含量的多少。依据细胞核的大小及细胞内颗粒程度展示的为正常外周血五分类白细胞分类散点图如图1。注：图1 中紫色区域代表淋巴细胞，依次出现的绿色代表单核细胞群，淡蓝色代表中性粒细胞，红色代表嗜酸性粒细胞。

图1 XN9000 正常白细胞WDF 通道白细胞散点图

2.2 白细胞计数大于10.0×109/L 白细胞分类散点图。本群的白细胞计数明显增加，白细胞计数介于（53.57±45.20）109/L，仪器分类出现大量单核细胞，粒细胞区域和单核细胞区域出现大量异常分布均匀的灰色散点，呈椭圆形（如图2中的圈中部分所指），粒细胞区域明显上移，至中部最为密集，淋巴细胞和嗜酸性粒细胞所在区域未出现明显异常。

图2 白细胞计数大于10.0×109/L 白细胞散点图

2.3 白细胞计数介于4-10×109/L白细胞分类散点图如图3，本群白细胞平均为（6.41±1.67）109/L。在幼稚粒细胞区域大量出现灰色散点，大量聚集于成熟中性粒细胞上方，幼稚粒细胞区域散点大量聚集，呈灰色散点，部分与单核细胞区域有融合（如图3 中的圈中部分所指）。淋巴细胞区域分界明显。

图3 白细胞计数介于4-10×109/L 白细胞散点图

2.4 白细胞计数小于4.0×109/L 白细胞分类散点图如图4。本群白细胞平均计数（1.59±1.05）109/L。该群的特点是白细胞计数较少，粒细胞区域明显上移，幼稚粒细胞区域出现大量杂乱的散点，部分可见与单核细胞区域模糊融合（如图4 中的圈中部分所指）。成熟粒细胞区域可见散在的散点。淋巴细胞区域分界明显。

图4 白细胞计数小于4.0×109/L 白细胞散点图

3 讨论

五分类血液分析仪采用WDF 通道对白细胞进行分类，主要是通过大分子有机酸的特殊溶血剂和聚次甲基荧光染料根据细胞内容物复杂程度、酸碱特性和核酸荧光强度的差异性分类。通过流式细胞术及半导体激光照射将反映细胞内颗粒物质的大小和多少的侧向散射光SCC 投射于横坐标，将反映细胞内核酸含量的侧向荧光SFL 投射于纵坐标，从而将不同种类的白细胞细胞生物特性转化为光学信号和电信号。仪器的数据处理软件将散射光信号和荧光信号综合处理可区分出淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞嗜碱性粒细胞，对幼稚细胞，幼稚粒细胞及异常淋巴细胞等具有很好的提示作用[3-4]。分析外周血白细胞WDF 通道的散点图，结合外周血涂片染色镜检对初筛诊急性早幼粒细胞白血病的具有重要意义[4]。

通过分析本次收集的初诊为急性早幼粒细胞白血病外周血的WDF 散点图，发现在粒细胞散点图明显有大量散在的散点出现，具体体现在幼稚粒细胞区域大量出现灰色散点，大量聚集于成熟中性粒细胞上方，幼稚粒细胞区域散点大量聚集，呈灰色散点，部分与单核细胞区域有融合。

综上所述，全自动血液分析仪中白细胞WDF 通道散点图对白血病的初筛具有一定的价值。通过观察仪器对白细胞WDF 散点图的差异性结合涂片镜检对检出白血病初诊患者并辅助判断白血病类型的重要意义[5-9]。检验人员通过对散点图分布特征配合必要的手工镜检，避免急性早幼粒细胞白血病患者病理标本的漏检，为临床诊疗工作提供准确可靠的检测依据。通过散点图的初筛过程后进行镜检复查，对于确诊急性早幼粒细胞白血病具有重要意义。